• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    液相色譜法測(cè)定 獼猴桃果實(shí)中抗壞血酸含量的前處理技術(shù)優(yōu)化

    2015-12-21 08:34:18王柏松章秋平張素敏
    食品科學(xué) 2015年20期
    關(guān)鍵詞:勻漿抗壞血酸獼猴桃

    楊 巍,王柏松,劉 晶,王 杰,章秋平,張素敏

    (遼寧省果樹科學(xué)研究所,遼寧 熊岳 115009)

    液相色譜法測(cè)定 獼猴桃果實(shí)中抗壞血酸含量的前處理技術(shù)優(yōu)化

    楊 巍,王柏松,劉 晶,王 杰,章秋平,張素敏

    (遼寧省果樹科學(xué)研究所,遼寧 熊岳 115009)

    以獼猴桃果實(shí)為試材,去除果皮,切取月牙形果塊,按樣液比1∶4(g/mL)進(jìn)行研磨和勻漿破碎處理,通過浸提劑種類與質(zhì)量分?jǐn)?shù)、浸提溫度與時(shí)間以及貯存條件等實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,分析各處理樣品中抗壞血酸含量差異顯著性。結(jié)果表明:人工研磨與機(jī)械勻漿都是破碎處理的有效手段,其中機(jī)械勻漿是更為理想的破碎方法。浸提溫度、時(shí)間以及振蕩處理是影響樣品提取效果的主要因素,要把握適度,以在0 ℃條件下超聲波振蕩提取15 min為宜。樣品經(jīng)前處理后立即檢測(cè)與貯藏后檢測(cè)結(jié)果差異很大,最好立即分析。浸提液種類與質(zhì)量分?jǐn)?shù)、漿液是否分離、貯存溫度、光照是影響貯存效果的主要因素,利用較高質(zhì)量分?jǐn)?shù)的酸性溶液作為浸提劑,破碎后進(jìn)行離心分離處理,然后置于冷、凍且避光條件下保存是比較理想的樣品貯存辦法。獼猴桃不同果實(shí)間抗壞血酸含量不存在顯著性差異,但仍應(yīng)十分注意材料的選取。

    液相色譜;獼猴桃;抗壞血酸;前處理技術(shù)

    抗壞血酸,即VC,是人體必需的具有保健功效的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[1-6],主要存在于植物中,合成于線粒體,由載體運(yùn)輸[7-8],尤其在水果、蔬菜中分布廣泛。因此,測(cè)定果蔬抗壞血酸含量對(duì)評(píng)定其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值具有重要意義。關(guān)于抗壞血酸相關(guān)研究由來已久,前人在抗壞血酸定性定量分析技術(shù)研究過程中陸續(xù)開發(fā)了分光光度法[9-12]、原子吸收光譜法、熒光分光光度法[13]、滴定分析法[14-15]和高效液相色譜法[16-18]等多種檢測(cè)方法,這些方法均具有各自的優(yōu)越性,同時(shí)也存在相應(yīng)的局限性。其中,高效液相色譜法具有靈敏度高、選擇性好、測(cè)定準(zhǔn)確等 優(yōu)點(diǎn)[19-21],是近年來發(fā)展較快的最為先進(jìn)的一種分析方法,有很好的應(yīng)用前景。隨著色譜技術(shù)的完善與普及,液相色譜在水果營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)分析中得到了廣泛的應(yīng)用,成為抗壞血酸定性、定量分析的有效手段,但科學(xué)、系統(tǒng)的前處理技術(shù)仍鮮見報(bào)道。本研究采用獼猴桃果實(shí)為試材,對(duì)樣品破碎方法、浸提劑種類、浸提條件與方式以及樣品貯存方法進(jìn)行了全面比對(duì)、篩查與優(yōu)化,旨在尋找科學(xué)、簡(jiǎn)捷、高效的前處理技術(shù),為利用液相色譜對(duì)抗壞血酸進(jìn)行精準(zhǔn)定性、定量分析提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    成熟的獼猴桃果實(shí)于2012年10月購(gòu)于遼寧省熊岳正大超市。

    抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)品 美國(guó)Sigma公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    TOLEDO十 萬分之一電子天平 瑞士梅特勒托利多儀器公司;超純水系統(tǒng) 美國(guó)密理博公司;制冰機(jī)日本三洋公司; KQ5200型超聲波提取器 江蘇昆山舒美超聲儀器有限公司;離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;U-3000型液相色譜儀(配有紫外檢測(cè)器) 美國(guó)賽默飛世爾科技公司。

    1.3 方法

    1.3.1 樣品前處理

    取大小相似、成熟度相近的獼猴桃果實(shí),去除果皮,縱向切成月牙形果塊,以偏磷酸為浸提液,樣液比為1∶4(g/mL),于同一果實(shí)中取材進(jìn)行人工研磨和機(jī)械勻漿、超聲波處理溫度與時(shí)間以及樣品貯存條件的研究,材料破碎后轉(zhuǎn)移至離心管中在轉(zhuǎn)速為10 000 r/min條件下離心10 min,取上清液經(jīng)0.45 μm濾頭過濾保存,待上機(jī)檢測(cè)。以上每處理重復(fù)3 次。

    1.3.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

    樣品破碎采用室溫(25 ℃)條件下人工研磨與機(jī)械勻漿兩種處理方式;浸提劑選擇0.0%、0.2%、2.0%、6.0% 4 種質(zhì)量分?jǐn)?shù)的偏磷酸溶液;超聲波振蕩于0 ℃和25 ℃條件下分別處理0、15、30 min;樣品貯存時(shí),分別選擇浸提劑為水與0.2%偏磷酸溶液,漿液分離與共存,貯藏溫度為-50、4 ℃與25 ℃,貯藏環(huán)境為避光和照光;不同果實(shí)是于同一果箱中隨機(jī)抽取的樣品。

    1.3.3 色譜條件

    利用紫外檢測(cè)器進(jìn)行有機(jī)酸定量測(cè)定,采用Agilent ZOBAX C18柱(250 mm×4.6 mm),柱溫20 ℃,檢測(cè)波長(zhǎng)260 nm,流速為1.0 mL/min,利用戴安變色龍軟件進(jìn)行儀器操作程序控制與數(shù)據(jù)處理。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 液相色譜圖

    圖1 標(biāo)準(zhǔn)品(A)與樣品中(B)抗壞血酸色譜圖Fig.1 Chromatograms of ascorbic acid standard and sample

    由圖1可知,標(biāo)準(zhǔn)溶液中抗壞血酸與樣品中抗壞血酸的保留時(shí)間均為3.973 min。

    2.2 破碎處理方式對(duì)提取效果的影響

    圖2 破碎處理方式對(duì)抗壞血酸含量的影響Fig.2 Ascorbe acid contents in kiwi pulp samples after manual grinding and mechanical homogenization

    由圖2可知,獼猴桃果實(shí)經(jīng)人工研磨處理后抗壞血酸獲得量為138.877 2 mg/100 g,經(jīng)機(jī)械勻漿處理后抗壞血酸獲得量為157.783 4 mg/100 g,兩者相差18.906 2 mg/100 g,存在極顯著性差異。二者相較,以機(jī)械勻漿破碎效果更好。

    2.3 偏磷酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)提取效果的影響

    以4種不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)偏磷酸為提取劑對(duì)樣品進(jìn)行浸提處理,圖3結(jié)果表明,0.0%、0.2%、2.0%、6.0%偏磷酸浸提處理抗壞血酸獲得量不存在顯著性差異,但從數(shù)據(jù)量值觀察,有隨著偏磷酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)升高而抗壞血酸獲得量隨之增加的趨勢(shì),說明浸提劑的酸性有利于抗壞血酸的溶出和保持。在抗壞血酸定量分析實(shí)驗(yàn)當(dāng)中,在一定范圍內(nèi),應(yīng)盡量選擇酸性較強(qiáng)的浸提劑,以使檢測(cè)數(shù)值更接近樣品中指標(biāo)的真實(shí)含量。

    圖3 偏磷酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)抗壞血酸含量的影響Fig.3 Ascorbe acid contents in kiwi pulp samples extracted with different concentrations of metaphosphoric acid aqueous solution

    2.4 超聲波振蕩時(shí)間和溫度對(duì)提取效果的影響

    圖4 超聲波振蕩溫度和時(shí)間對(duì)抗壞血酸含量的影響Fig.4 Ascorbe acid contents in kiwi pulp samples extracted at different temperatures for different times

    不同提取條件處理樣品抗壞血酸分析結(jié)果表明(圖4),6 種條件下抗壞血酸獲得量數(shù)值間不盡相同,但不存在顯著性差異。其中,25 ℃條件下未經(jīng)超聲波振蕩處理、25 ℃條件下超聲波振蕩浸提15 min、0 ℃條件下超聲波振蕩浸提15 min、0 ℃條件下超聲波振蕩浸提30 min抗壞血酸獲得量極其相近,說明使用這4種浸提劑處理樣品的方法具有幾近相同的效果。另外,0 ℃條件下未經(jīng)超聲波振蕩處理與25 ℃條件下超聲波振蕩浸提30 min抗壞血酸獲得量雖與以上4 種提取方式?jīng)]有顯著性差異,但數(shù)值明顯較低,分別為126.536 7 mg/100 g和121.710 8 mg/100 g。同時(shí)可以看出,在25 ℃條件下,浸提時(shí)間越長(zhǎng),抗壞血酸的獲得量反而越低,而在0 ℃條件下,浸提時(shí)間越長(zhǎng),抗壞血酸的獲得量隨之增加。從以上結(jié)果可看出,樣品浸提過程中溫度、時(shí)間以及是否采用振蕩輔助措施都會(huì)影響抗壞血酸的提取效果,在一定范圍內(nèi),提高提取溫度、延長(zhǎng)提取時(shí)間、采用振蕩提取方式都會(huì)提高抗壞血酸的獲得量,但如超出一定范圍,反而會(huì)導(dǎo)致抗壞血酸的轉(zhuǎn)化損失。綜合以上,0 ℃條件下超聲 波振蕩15 min是比較理想的抗壞血酸提取條件。

    2.5 貯存條件對(duì)樣品抗壞血酸含量的影響

    2.5.1 浸提劑種類對(duì)貯存效果的影響采用0.2%偏磷酸溶液與超純水作為樣品提取溶劑,機(jī)械勻漿破碎,經(jīng)離心分離后,放置于4 ℃冰箱中避光冷藏貯存,7 d后檢測(cè)抗壞血酸含量分別為153.970 1 mg/100 g和82.049 4 mg/100 g,二者差異極顯著,0.2%偏磷酸溶液勻漿樣品經(jīng)冷藏后抗壞血酸含量顯著高于利用水溶液勻漿所得經(jīng)冷藏貯存的樣品(圖5)。樣品如需貯存,應(yīng)注意浸提劑的選擇,其酸性作用對(duì)抗壞血酸含量的保持十分重要。

    圖5 浸提劑種類對(duì)抗壞血酸含量的影響Fig.5 Ascorbe acid contents in kiwi pulp samples extracted with different extractants

    2.5.2 漿液共存與分離對(duì)貯存效果的影響

    圖6 漿液共存與分離對(duì)抗壞血酸含量的影響Fig.6 Ascorbe acid contents in kiwi pulp samples with and without centrifugation

    樣品勻漿破碎處理后,部分直接轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中,另一部分經(jīng)離心分離也轉(zhuǎn)移至離心管中,于-4 ℃冷藏避光條件下貯存7 d后,抗壞血酸定量檢測(cè)結(jié)果(圖6)表明,經(jīng)離心分離樣品貯存7 d后抗壞血酸含量為153.970 1 mg/100 g,未經(jīng)分離處理樣品抗壞血酸含量為139.658 1 mg/100 g,二者差異顯著。樣品破碎后離心除去其中的果肉碎屑再進(jìn)行貯存更有利于抗壞血酸指標(biāo)含量的保持。

    2.5.3 貯存溫度對(duì)貯存效果的影響

    圖7 貯存溫度對(duì)抗壞血酸含量的影響Fig.7 Ascorbe acid contents in kiwi pulp samples after storage at different temperatures

    設(shè)置了-50 ℃避光貯藏7 d、4℃避光貯藏7 d、25 ℃避光貯藏7 d 3 個(gè)處理,結(jié)果表明(圖7),3 類樣品抗壞血酸含量較立即檢測(cè)樣品抗壞血酸含量均有不同程度的降低,立即檢測(cè)樣品抗壞血酸含量雖明顯高于4 ℃避光貯藏7 d的樣品,但不存在顯著性差異,而立即檢測(cè)樣品與其他兩種方式貯存樣品抗壞血酸含量卻存在著極顯著性差異,冷、凍環(huán)境較常溫條件明顯有利于樣品的保存,而冷藏與冷凍間溫度的變化卻沒有對(duì)指標(biāo)含量帶來顯著性影響。綜上,樣品經(jīng)前處理后最好立即檢測(cè),如不能按時(shí)完成,以4 ℃避光冷藏貯存效果最好。

    2.5.4 光照對(duì)貯存效果的影響

    圖8 光照對(duì)抗壞血酸含量的影響Fig.8 Ascorbe acid contents in kiwi pulp samples after storage under dark and light conditions

    樣品利用勻漿破碎,經(jīng)離心分離后置于培養(yǎng)箱中,在25 ℃條件下,一組進(jìn)行照光保存,光照強(qiáng)度為5 lx,一組利用雙層黑色塑料袋包裝再密封于紙箱中進(jìn)行避光保存,定量檢測(cè)結(jié)果表明(圖8),照光處理抗壞血酸含量為77.024 0 mg/100 g,避光處理含量為122.823 1 mg/100 g,二者存在極顯著性差異。貯藏過程中,遮光使樣品抗壞血酸含量得到了較好的保持。

    2.6 獼猴桃不同果實(shí)抗壞血酸含量分析

    3 個(gè)不同果實(shí)當(dāng)中,果A抗壞血酸含量為130.828 3 mg/100 g,果B為143.640 7 mg/100 g,果C為157.783 4 mg/100 g,果B較果A高12.8134 mg/100 g,果C較果B高14.1427 mg/100 g,依次相差10%左右,而果A與果C更是相差26.9551 mg/100 g,超過20%。獼猴桃不同果實(shí)間抗壞血酸含量雖不存在顯著性差異,但數(shù)值相差明顯(圖9)。

    圖9 獼猴桃不同單果抗壞血酸含量Fig.9 Ascorbe acid contents in different kiwi fruits

    3 討 論

    3.1 樣品的前處理技術(shù)

    本研究樣品前處理雖不是十分復(fù)雜,但也包含破碎、浸提與分離等多個(gè)環(huán)節(jié),每一步驟都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量,應(yīng)全面考慮、注意細(xì)節(jié)。浸提過程當(dāng)中溫度、時(shí)間、振蕩等提取條件與手段均會(huì)促進(jìn)抗壞血酸的獲得,這與劉劍利[22]、葉新紅[23]等在香菇多糖與葡萄多酚提取研究中的結(jié)論相似,但采用振蕩提取方式、提取溫度過高、提取時(shí)間過長(zhǎng)都會(huì)使抗壞血酸的獲得量下降,在一般實(shí)驗(yàn)中建議采用0.2%偏磷酸溶液作為浸提劑在冰浴條件下振蕩提取15 min為宜。這與寧德生等[17]在對(duì)羅漢果抗壞血酸定量分析研究中對(duì)前處理時(shí)間的考察結(jié)論相同。

    3.2 處理后樣品的保存

    科學(xué)貯存的樣品,檢測(cè)結(jié)果能夠真實(shí)反映樣品中目標(biāo)物質(zhì)的實(shí)際存在,而不良的貯藏條件,所檢結(jié)果與樣品指標(biāo)真值含量相距甚遠(yuǎn),不能作為科學(xué)分析的理論依據(jù),樣品采集后應(yīng)盡量立即處理、檢測(cè),直接獲得結(jié)果,再科學(xué)的貯藏技術(shù)也與新鮮樣品的分析結(jié)果存在一定的距離??箟难崾且环N極易被氧化的物質(zhì),因此,貯藏過程中樣品的狀態(tài)、溫度、光照等因素都會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果有較大的影響,漿液分離樣品貯藏后檢測(cè)結(jié)果明顯高于漿液共存的樣品,這可能是因?yàn)?,未?jīng)離心分離的樣品中含有很多果肉碎塊,其中一些有機(jī)物質(zhì)可能能夠促進(jìn)抗壞血酸的氧化轉(zhuǎn)化,而使其含量明顯下降。貯藏過程中的溫度與光照也十分關(guān)鍵,高溫、照光均能夠使樣品中的抗壞血酸發(fā)生變化,使其含量顯著下降。由此我們可以得出,經(jīng)前處理后的樣品最好立即進(jìn)行檢測(cè)分析[24],如不能立即檢測(cè),也要對(duì)樣品進(jìn)行離心分離去除部分雜質(zhì)后,在低溫、避光的環(huán)境下短期貯藏。王樂樂等[25]在刺梨果實(shí)VC含量分析中也有相似的結(jié)論。

    3.3 材料的選取

    不同單果指標(biāo)含量差異明顯,實(shí)驗(yàn)當(dāng)中應(yīng)注意試材的選取,以盡量減少選材所造成的誤差,確保實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性。這與程志強(qiáng)等[26]在西瓜果實(shí)VC含量研究結(jié)果相同。植物生長(zhǎng)與農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中,由于種植品種、植株個(gè)體、生長(zhǎng)氣候環(huán)境以及栽培管理技術(shù)水平的不同,而使不同材料本身相互間存在差異甚至相去甚遠(yuǎn)。由不同果實(shí)中抗壞血酸含量差異可以看出,材料間的差異確實(shí)能夠影響甚至改變處理間的結(jié)果,足以誤導(dǎo)對(duì)客觀規(guī)律的應(yīng)有認(rèn)識(shí),甚至背道而馳。因此在同一實(shí)驗(yàn)不同處理過程中應(yīng)盡量在品種相同、個(gè)體長(zhǎng)勢(shì)相近、同一地域和相同栽培管理方式的果園選取試材,有時(shí)甚至需要選取同一樹上、位置相近、外觀相似的果實(shí),必要時(shí)可以選擇同一果實(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),以進(jìn)一步減小誤差,提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。郜海燕[27]、田世平[28]等在桃品質(zhì)分析研究中對(duì)實(shí)驗(yàn)材料的選取均有相似嚴(yán)格的要求。

    [1] 宋圃菊, 徐勇. 中華獼猴桃的防癌作用[J]. 營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 1988, 10(1): 50-54.

    [2] HOLICK C N, de VIVO I, FESKANICH D, et al. Intake of fruits and vegetables, carotenoids, folate, and vitamins A, C, E and risk of bladder cancer among women (United States)[J]. Cancer Causes and Control, 2005, 16: 1135-1145.

    [3] KIM D S, LEE M S, KIM Y S, et al. Effect modifi cation by vitamin C on the relation between gastric cancer and Helicobacter pylori[J]. European Journal of Epidemiology, 2005, 20: 67-71.

    [4] JIAN L, DU C J, LEE A H, et al. Do dietary lycopene and other carotenoids protect against prostate cancer[J]. International Journal of Cancer, 2005, 113: 1010-1014.

    [5] WRIGHT M E, MAYNE S T, SWANSON C A, et al. Dietary carotenoids, vegetables, and lung cancer risk in women: the Missouri women’s health study (United States)[J]. Cancer Causes and Control, 2003, 14: 85-96.

    [6] KUCUK O. Chemoprevention of prostate cancer[J]. Cancer and Metastasis Reviews, 2002, 21: 111-124.

    [7] HOREMANS N, FOYER C H, POERTTRS G. Ascorbate function and assiciated transport systems in plants[J]. Plant Physiology Biochemistry, 2000, 38: 531-560.

    [8] HOREMANS N, ASARD H, CAUBERGS R J. The ascorbate carrier of higher plant plasma membranes preferentially translocates the fully oxidized (dehydroascorbate) molecule[J]. Plantphysiol, 1997, 114: 1247-1253.

    [9] 安華明, 陳力耕, 樊衛(wèi)國(guó), 等. 刺梨果實(shí)中維生素C積累與相關(guān)酶活性的關(guān)系[J]. 植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報(bào), 2005, 31(4): 431-436.

    [10] 趙樹堂, 關(guān)軍鋒, 孟慶瑞, 等. 李果實(shí)發(fā)育過程中、酸、維生素C含量的變化[J]. 果樹學(xué)報(bào), 2004, 21(6): 612-614.

    [11] 周德慶, 韓雅珊. 紫外分光光度法快速測(cè)定果蔬及飲料中維生素C含量的研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 1997, 2(5): 7-13.

    [12] 王桂榮. 蔬菜維生素C含量測(cè)定試驗(yàn)[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2009(24): 325-326.

    [13] 楊青珍, 饒景萍, 王玉萍. ‘徐香’獼猴桃采收后逐步降溫處理對(duì)果實(shí)冷害、品質(zhì)和活性氧代謝的影響[J]. 園藝學(xué)報(bào), 2013, 40(4): 651-662.

    [14] 甘霖, 謝永紅, 吳正琴, 等. ‘嘉平大棗’果實(shí)發(fā)育過程中糖、酸及維生素C含量的變化[J]. 園藝學(xué)報(bào), 2000, 27(5): 317-320.

    [15] 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社第一編輯室. 中國(guó)農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)匯編: 果蔬卷: 上[M].北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2002: 90-93.

    [16] 胡志群, 王惠聰, 胡桂兵. 高效液相色譜測(cè)定荔枝果肉中的糖、酸和維生素C[J]. 果樹學(xué)報(bào), 2005, 22(5): 582-585.

    [17] 寧德生, 梁小燕, 方宏. 高效液相色譜法對(duì)羅漢果中VC含量的檢測(cè)[J].食品科學(xué), 2010, 31(20): 311-313.

    [18] 張雪, 楊曼, 安華明, 等. 外源 Ca2+、Mg2+、Cu2+和吖啶黃素對(duì)刺梨果實(shí)維生素C合成的影響[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué), 2012, 45(6): 1144-1149.

    [19] 劉嘉祺, 孫仁國(guó), 李磊. 高效液相色譜法測(cè)定芒果中的VC含量[J].中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng), 2013, 19(12): 66-68.

    [20] 劉文海, 范潔, 劉麗莉. HPLC法測(cè)定5 種果汁中抗壞血酸的含量[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2009, 37(4): 1412-1413.

    [21] 李玉明, 張少華. 獼猴桃中維生素C的HPLC分析[J]. 計(jì)算機(jī)與應(yīng)用化學(xué)2011, 28(4): 458-460.

    [22] 劉劍利, 曹向宇, 蘆秀麗, 等. 香菇菌絲體多糖的分離純化和抗氧化作用[J]. 食品科學(xué), 2011, 32(12): 19-23.

    [23] 葉新紅, 李永春, 胡彩香, 等. 不同處理對(duì)葡萄皮中多酚類化合物溶出效果的研究[J]. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué), 2009, 46(4): 877-880.

    [24] 朱立偉, 錢炳俊, 肖晨龍, 等. 純氧貯藏梨果肉褐變及相關(guān)生理的研究[J]. 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2010, 26(2): 25-33.

    [25] 王樂樂, 安華明. HPLC測(cè)定刺梨果實(shí)中維生素C含量方法的優(yōu)化[J].現(xiàn)代食品科技, 2013, 29(2): 397-400.

    [26] 程志強(qiáng), 劉文革, 劉志敏, 等. 不同倍性西瓜果實(shí)維生素C含量比較研究[J]. 果樹學(xué)報(bào), 2008, 25(5): 760-763.

    [27] 郜海燕, 陳杭君, 陳文烜, 等. 采收成熟度對(duì)冷藏水蜜桃果實(shí)品質(zhì)和冷害的影響[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué), 2009, 42(2): 612-618.

    [28] 田世平, 徐勇, 姜愛麗, 等. 冬雪蜜桃在氣調(diào)冷藏期間品質(zhì)及相關(guān)酶活性的變化[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué), 2001, 34(6): 656-661.

    Optimization of Pretreatment Conditions for Determination of Ascorbic Acid Content in Kiwi Fruit Pulp by Liquid Chromatography

    YANG Wei, WANG Baisong, LIU Jing, WANG Jie, ZHANG Qiuping, ZHANG Sumin (Liaoning Institute of Pomology, Xiongyue 115009, China)

    Ripe kiwi fruits were peeled, cut into crescent pieces and ground with aqueous metaphosphoric acid at a solid to water ratio of 1:4 manually or by mechanical homogenization, and then the mash was ultrasonically extracted, centrifuged and stored until being analyzed for the ascorbic acid content by liquid chromatography. The pretreatment conditions including manual or mechanical grinding, extractant type and concentration, extraction temperature and time, and storage conditions were optimized. Signifi cant difference analyses were carried out among various processed samples. The results showed that both manual grinding and mechanical homogenization were effective means of mashing the fruit, and the latter method was superior to the former. Extraction temperature and time were identifi ed as main factors infl uencing extraction effi ciency. An extraction temperature of 0 ℃ and 10 min extraction proved optimal. Accurate results were obtained when the analysis was carried out immediately after sample preparation, signifi cantly different from those reported for the stored samples. Extractant type and concentration, separation of the mash, storage temperature, and light condition were main factors affecting the accuracy of the determination of ascorbic acid using the stored samples. The samples prepared by extraction using higher concentrations of acid and centrifugation should be stored at low temperatures in darkness if analysis cannot be performed immediately. Though no signifi cant difference in ascorbic acid content existed among three kiwifruits, much attention should be paid to selection of the test material.

    liquid chromatography; kiwi fruit; ascorbic acid; pretreatment technologies

    S661.1

    A

    1002-6630(2015)20-0163-05

    10.7506/spkx1002-6630-201520031

    2015-02-09

    遼寧省百千萬人才工程項(xiàng)目;遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(20102223)

    楊?。?972—),男,副研究員,碩士,研究方向?yàn)楣麡滟Y源品質(zhì)生理。E-mail:ywsys@yeah.net

    猜你喜歡
    勻漿抗壞血酸獼猴桃
    摘獼猴桃
    提取獼猴桃的DNA
    摘獼猴桃
    勻漿法提取沙棗果總黃酮工藝研究
    植物研究(2018年4期)2018-07-24 00:52:26
    養(yǎng)個(gè)獼猴桃
    不同誘導(dǎo)方式制備的大鼠肝勻漿代謝酶活性及凍儲(chǔ)方式的比較
    抗壞血酸的電化學(xué)研究
    高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定水果蔬菜中L-抗壞血酸、D-異抗壞血酸、脫氫抗壞血酸及總維生素C的含量
    抗壞血酸-(熒光素+CTMAB+Cu2+)化學(xué)發(fā)光檢測(cè)尿液的尿酸
    前列安丸對(duì)瓊脂所致慢性前列腺炎模型大鼠前列腺勻漿中IgG和血清Zn的影響
    www.色视频.com| 欧美日韩国产亚洲二区| 色av中文字幕| 欧美极品一区二区三区四区| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日本五十路高清| 亚洲精品粉嫩美女一区| 欧美一区二区亚洲| 欧美中文日本在线观看视频| 成人二区视频| 少妇的逼水好多| 成人av一区二区三区在线看| www日本黄色视频网| 久久热精品热| 91久久精品国产一区二区三区| 最近在线观看免费完整版| 国产真实乱freesex| 日本一本二区三区精品| ponron亚洲| 五月玫瑰六月丁香| 有码 亚洲区| 精品欧美国产一区二区三| 乱码一卡2卡4卡精品| 免费av不卡在线播放| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲av成人av| 嫩草影院新地址| 成年免费大片在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 国产精品无大码| 听说在线观看完整版免费高清| 久久精品夜色国产| 91狼人影院| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 精品午夜福利在线看| 禁无遮挡网站| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 成年版毛片免费区| 日韩制服骚丝袜av| 美女内射精品一级片tv| 国产在线精品亚洲第一网站| 日本熟妇午夜| 日韩制服骚丝袜av| 精品欧美国产一区二区三| 99热这里只有是精品50| 在线观看av片永久免费下载| 我要看日韩黄色一级片| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 一区福利在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 欧美一级a爱片免费观看看| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 人妻少妇偷人精品九色| 赤兔流量卡办理| 成人毛片a级毛片在线播放| 五月玫瑰六月丁香| 可以在线观看的亚洲视频| 免费人成在线观看视频色| 色哟哟哟哟哟哟| 国产高清视频在线观看网站| 美女 人体艺术 gogo| 日韩欧美在线乱码| 婷婷色综合大香蕉| 69av精品久久久久久| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 婷婷亚洲欧美| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 午夜激情福利司机影院| 一个人看视频在线观看www免费| 美女大奶头视频| 精品免费久久久久久久清纯| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产熟女欧美一区二区| 国国产精品蜜臀av免费| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产老妇女一区| 高清日韩中文字幕在线| 高清毛片免费观看视频网站| 赤兔流量卡办理| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 欧美成人一区二区免费高清观看| 搞女人的毛片| 日产精品乱码卡一卡2卡三| av.在线天堂| 午夜a级毛片| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 免费观看的影片在线观看| 老司机福利观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产 一区精品| 深爱激情五月婷婷| 一级黄片播放器| 99热精品在线国产| 91狼人影院| 1000部很黄的大片| 国产高清视频在线观看网站| 天天躁日日操中文字幕| 夜夜夜夜夜久久久久| 老女人水多毛片| 久久久久免费精品人妻一区二区| 精品一区二区三区人妻视频| 国产真实伦视频高清在线观看| 在线免费观看的www视频| 成人漫画全彩无遮挡| 久久九九热精品免费| 校园春色视频在线观看| 免费观看精品视频网站| .国产精品久久| 国产三级在线视频| 国产精品一区二区三区四区久久| av在线播放精品| 国产麻豆成人av免费视频| av在线老鸭窝| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 一进一出抽搐gif免费好疼| 久久久久久久久大av| 国产黄色小视频在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 午夜久久久久精精品| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 日韩成人av中文字幕在线观看 | 成人性生交大片免费视频hd| 欧美色视频一区免费| 午夜精品国产一区二区电影 | 日日摸夜夜添夜夜爱| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 3wmmmm亚洲av在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 最近2019中文字幕mv第一页| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产成人一区二区在线| 两个人的视频大全免费| 久久久久久伊人网av| 国产高清有码在线观看视频| 51国产日韩欧美| 精品久久久久久久久久免费视频| 波野结衣二区三区在线| 久久精品国产自在天天线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 日韩亚洲欧美综合| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 日韩精品中文字幕看吧| 免费看a级黄色片| a级毛片a级免费在线| 午夜爱爱视频在线播放| 联通29元200g的流量卡| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 综合色av麻豆| 国产精品久久电影中文字幕| 悠悠久久av| 超碰av人人做人人爽久久| 高清毛片免费看| 永久网站在线| 免费观看人在逋| 亚洲不卡免费看| 我的老师免费观看完整版| 成人漫画全彩无遮挡| 国产久久久一区二区三区| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 校园春色视频在线观看| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久久久国内视频| 少妇的逼水好多| 在线观看一区二区三区| 亚洲成人久久爱视频| 黄色配什么色好看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲人成网站在线播| 国产一级毛片七仙女欲春2| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久欧美精品欧美久久欧美| 午夜老司机福利剧场| 国产在线男女| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲国产精品成人久久小说 | www日本黄色视频网| 久久国内精品自在自线图片| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲精品色激情综合| 秋霞在线观看毛片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 在线国产一区二区在线| av免费在线看不卡| 国产精品久久久久久久久免| 日韩一本色道免费dvd| 夜夜爽天天搞| 日韩成人伦理影院| 国产精品人妻久久久影院| 国产精品一二三区在线看| 婷婷精品国产亚洲av| 97在线视频观看| 欧美极品一区二区三区四区| 22中文网久久字幕| 一本久久中文字幕| 国产成人一区二区在线| 最近2019中文字幕mv第一页| 波野结衣二区三区在线| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 一进一出抽搐gif免费好疼| 久久6这里有精品| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产一区二区三区av在线 | 精品久久久噜噜| 美女大奶头视频| 欧美色视频一区免费| 久久鲁丝午夜福利片| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产精品综合久久久久久久免费| 色播亚洲综合网| a级一级毛片免费在线观看| 热99在线观看视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 1024手机看黄色片| 日本成人三级电影网站| 欧美zozozo另类| 国产激情偷乱视频一区二区| 久久99热这里只有精品18| 少妇人妻精品综合一区二区 | 男人舔奶头视频| videossex国产| 久久久欧美国产精品| 久久久久久久久大av| 色视频www国产| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 成人午夜高清在线视频| 国产成人一区二区在线| 精品久久久久久久久av| 日本一本二区三区精品| 免费av毛片视频| 最新在线观看一区二区三区| 日韩av不卡免费在线播放| 日韩欧美精品免费久久| 欧美激情国产日韩精品一区| 我要看日韩黄色一级片| 午夜视频国产福利| 九色成人免费人妻av| 国产久久久一区二区三区| av中文乱码字幕在线| 亚洲精品国产av成人精品 | 亚洲av免费高清在线观看| 黄色一级大片看看| 18禁在线播放成人免费| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 黄片wwwwww| 99热全是精品| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲av免费高清在线观看| 99久久九九国产精品国产免费| 一级毛片电影观看 | 国内精品宾馆在线| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 久久这里只有精品中国| 亚洲av电影不卡..在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 高清毛片免费观看视频网站| 黄色一级大片看看| 嫩草影院新地址| 人人妻人人看人人澡| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 精品一区二区免费观看| 亚洲不卡免费看| 欧美日韩在线观看h| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 97在线视频观看| av在线老鸭窝| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 校园春色视频在线观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 晚上一个人看的免费电影| 日韩精品青青久久久久久| 午夜精品在线福利| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 午夜亚洲福利在线播放| 久久久久久久久中文| 最新中文字幕久久久久| 亚洲最大成人av| 日韩三级伦理在线观看| 国产高清有码在线观看视频| 直男gayav资源| 午夜福利高清视频| 黄色视频,在线免费观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲av二区三区四区| 99热网站在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 日本一本二区三区精品| 中文字幕av成人在线电影| 18禁在线播放成人免费| 内地一区二区视频在线| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 淫秽高清视频在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 九九在线视频观看精品| 男女边吃奶边做爰视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产一级毛片七仙女欲春2| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲久久久久久中文字幕| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 日本爱情动作片www.在线观看 | 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 春色校园在线视频观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 九九热线精品视视频播放| 久久精品国产亚洲av天美| 欧美日韩综合久久久久久| 麻豆国产97在线/欧美| 日本黄色片子视频| 在线a可以看的网站| 色哟哟·www| 午夜久久久久精精品| 亚洲成人中文字幕在线播放| 成年免费大片在线观看| 男人舔奶头视频| 午夜精品在线福利| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | ponron亚洲| 男插女下体视频免费在线播放| 国产探花极品一区二区| 成年女人永久免费观看视频| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 干丝袜人妻中文字幕| 我的老师免费观看完整版| 午夜福利在线观看吧| 国产精品99久久久久久久久| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 午夜精品一区二区三区免费看| 一区福利在线观看| 人妻久久中文字幕网| 神马国产精品三级电影在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 永久网站在线| 国产欧美日韩一区二区精品| 日本黄色视频三级网站网址| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 免费大片18禁| 床上黄色一级片| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 97超视频在线观看视频| 国产在线精品亚洲第一网站| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 精品熟女少妇av免费看| 99久久精品国产国产毛片| 中文亚洲av片在线观看爽| 一边摸一边抽搐一进一小说| 99视频精品全部免费 在线| 久久久久国内视频| 国产极品精品免费视频能看的| 欧美在线一区亚洲| 黄色日韩在线| 最后的刺客免费高清国语| 精品不卡国产一区二区三区| 插阴视频在线观看视频| 亚洲电影在线观看av| 毛片女人毛片| 国产高潮美女av| 能在线免费观看的黄片| 99国产极品粉嫩在线观看| 午夜激情欧美在线| 色在线成人网| 老司机福利观看| 一a级毛片在线观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 3wmmmm亚洲av在线观看| 久久久久久久久久久丰满| 99热网站在线观看| 午夜精品一区二区三区免费看| 免费高清视频大片| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 中文字幕熟女人妻在线| 国产精品99久久久久久久久| 卡戴珊不雅视频在线播放| 婷婷精品国产亚洲av| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲av二区三区四区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 日本黄大片高清| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 亚洲四区av| 日本欧美国产在线视频| 国产大屁股一区二区在线视频| 欧美日韩在线观看h| 成人性生交大片免费视频hd| 三级经典国产精品| 黄色视频,在线免费观看| 中文字幕av在线有码专区| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 69人妻影院| 久久久久免费精品人妻一区二区| 日本熟妇午夜| 亚洲内射少妇av| 麻豆av噜噜一区二区三区| 99视频精品全部免费 在线| 中国国产av一级| 国产成人a区在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 成人av在线播放网站| 亚洲av五月六月丁香网| 黄色视频,在线免费观看| 国内精品久久久久精免费| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 美女 人体艺术 gogo| 三级国产精品欧美在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 波多野结衣巨乳人妻| 国产精品人妻久久久影院| 国产久久久一区二区三区| 精品人妻视频免费看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲电影在线观看av| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲无线观看免费| 免费高清视频大片| 天堂影院成人在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 99热这里只有是精品在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 国内精品宾馆在线| 欧美又色又爽又黄视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品久久久久久精品电影| 国产在线精品亚洲第一网站| 综合色av麻豆| 色综合色国产| 久久久色成人| 亚洲成人久久性| 99久国产av精品国产电影| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 我要搜黄色片| 99久久精品国产国产毛片| 国产午夜福利久久久久久| 岛国在线免费视频观看| 欧美最黄视频在线播放免费| www.色视频.com| 中文字幕免费在线视频6| 久久人人精品亚洲av| 热99re8久久精品国产| 在线天堂最新版资源| 亚洲高清免费不卡视频| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲无线在线观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 男插女下体视频免费在线播放| 成人亚洲欧美一区二区av| 午夜福利在线观看吧| av天堂中文字幕网| 午夜福利在线观看吧| 女同久久另类99精品国产91| 国产精品久久久久久av不卡| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲人与动物交配视频| 欧美bdsm另类| 国产色婷婷99| 国产黄色小视频在线观看| av天堂中文字幕网| 最近的中文字幕免费完整| www日本黄色视频网| 真实男女啪啪啪动态图| 国产精品爽爽va在线观看网站| 黄色一级大片看看| 老司机影院成人| 国产三级在线视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 看十八女毛片水多多多| 国产欧美日韩一区二区精品| 日韩欧美精品v在线| 一本精品99久久精品77| 国国产精品蜜臀av免费| 日韩精品中文字幕看吧| 1024手机看黄色片| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 又爽又黄a免费视频| 欧美一区二区国产精品久久精品| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 俺也久久电影网| 日日啪夜夜撸| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 特级一级黄色大片| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲自拍偷在线| 国产大屁股一区二区在线视频| a级毛片a级免费在线| 国产黄片美女视频| 欧美xxxx性猛交bbbb| 久久精品国产自在天天线| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产高清不卡午夜福利| 午夜激情福利司机影院| www.色视频.com| 人人妻人人看人人澡| 美女内射精品一级片tv| 亚洲av中文av极速乱| 日本在线视频免费播放| a级毛片a级免费在线| 国产精品1区2区在线观看.| 熟女人妻精品中文字幕| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 全区人妻精品视频| 国产视频内射| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲欧美成人精品一区二区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产av在哪里看| 亚洲第一电影网av| 91久久精品国产一区二区三区| 黄色日韩在线| 久久久久性生活片| 我的女老师完整版在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 男人和女人高潮做爰伦理| 少妇人妻一区二区三区视频| 久久久精品大字幕| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 中文字幕免费在线视频6| 有码 亚洲区| 三级经典国产精品| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲综合色惰| 亚洲无线观看免费| 亚洲四区av| 欧美日韩精品成人综合77777| 联通29元200g的流量卡| 色播亚洲综合网| 成人亚洲欧美一区二区av| 夜夜爽天天搞| 欧美日韩综合久久久久久| 国产片特级美女逼逼视频| 日韩精品青青久久久久久| 国产精品久久久久久久久免| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 精品久久久噜噜| 国国产精品蜜臀av免费| 国产精品乱码一区二三区的特点| 日韩高清综合在线| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 欧美极品一区二区三区四区| 国产精品免费一区二区三区在线| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 变态另类丝袜制服| 特级一级黄色大片| 午夜福利在线观看吧| 欧美一区二区精品小视频在线| 久久99热6这里只有精品| 免费av毛片视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 日韩av在线大香蕉| av在线蜜桃| 欧美3d第一页| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 最近中文字幕高清免费大全6| 全区人妻精品视频| 免费在线观看成人毛片| 日韩精品有码人妻一区| 淫妇啪啪啪对白视频| 最近视频中文字幕2019在线8| 白带黄色成豆腐渣| 国产亚洲av嫩草精品影院| 中文字幕av成人在线电影| 中出人妻视频一区二区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 男女视频在线观看网站免费| 我的老师免费观看完整版| 国产单亲对白刺激| 国产高清激情床上av| 啦啦啦韩国在线观看视频| 日韩强制内射视频| 看十八女毛片水多多多| 老司机影院成人| 亚洲真实伦在线观看| 久久久国产成人精品二区| 久久精品国产清高在天天线| 免费观看精品视频网站| 成人漫画全彩无遮挡| 国产精品1区2区在线观看.| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲国产色片| 男女啪啪激烈高潮av片| aaaaa片日本免费| 日韩欧美精品v在线| 国产av一区在线观看免费| 欧美一区二区国产精品久久精品| 黄色一级大片看看| 插阴视频在线观看视频| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲精品乱码久久久v下载方式|