王林林 陳培欽 羅 云 李夏蘭
(華僑大學(xué)化工學(xué)院,廈門 361021)
本課題組前期研究結(jié)果表明:阿魏酸酯酶(EC 3.1.1.73,feruloyl esterase,F(xiàn)AE)與木聚糖酶存在協(xié)同作用,能提高麥糟中阿魏酸(4-羥基-3-甲氧基肉桂酸,ferulic acid,F(xiàn)A)及低聚木糖(xylooligosaccharide,XOS)的釋放率,有利于麥糟的降解。在優(yōu)化的工藝條件下,木聚糖酶和FAE共同作用于植物細(xì)胞壁,F(xiàn)A釋放量最高可達(dá)0.97 mg/g(干麥糟),XOS 的釋放量為 161 mg/g(干麥糟)[1]。在發(fā)酵飼料安全、有效、不污染環(huán)境、無耐藥性的基礎(chǔ)上,本課題將固態(tài)發(fā)酵得到的FAE添加于杏鮑菇菌柄的發(fā)酵飼料原料中,欲提高抗?fàn)I養(yǎng)因子的降解效率,同時(shí)產(chǎn)生對(duì)動(dòng)物具有生理作用且安全無毒的FA和XOS[2]。FA具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗突變、抗癌、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗血栓、降低膽固醇和降血脂等生理功能[3];XOS其無毒安全的特性,已成為最具潛力的動(dòng)物保健品和抗生素替代品[4]。本文研究了FAE酶化發(fā)酵飼料的品質(zhì)及FAE酶化發(fā)酵飼料對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響。
選用20日齡黃腳麻雞180只,將肉雞分為4組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)9只雞,試驗(yàn)前稱重。試驗(yàn)組1為對(duì)照組(基礎(chǔ)飼糧中添加10%菌柄),試驗(yàn)組2為基礎(chǔ)飼糧中添加10%普通發(fā)酵飼料(僅添加益生菌劑發(fā)酵),試驗(yàn)組3為基礎(chǔ)飼糧中添加10%FAE酶化飼料(僅添加FAE酶化),試驗(yàn)組4為基礎(chǔ)飼糧中添加10%酶化發(fā)酵飼料(添加益生菌劑發(fā)酵及FAE酶化)。采用地面平養(yǎng)方式飼養(yǎng),全天光照,每天飼喂3次,自由采食、飲水,定時(shí)對(duì)雞舍進(jìn)行消毒清掃(每周2次),試驗(yàn)時(shí)間為25 d,按正常肉雞免疫程序進(jìn)行免疫。
肉雞基礎(chǔ)飼糧標(biāo)準(zhǔn)參照NY/T 33—2004《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》中肉雞營養(yǎng)需要配制[5],其組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %
1.2.1 主要器材
反式阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品(美國sigma公司);阿魏酸甲酯(華僑大學(xué)曾慶友老師合成);XOS標(biāo)準(zhǔn)品、木二糖標(biāo)準(zhǔn)品(日本和光純藥工業(yè)株式會(huì)社);超濾膜包Vivaflow 200(MWCO 30KD)(北京Sartorius公司);發(fā)酵袋(鄭州百益寶生物科技有限公司)。1 100高效液相色譜儀(美國Agilent公司);HPX-42A柱(美國Bio-Rad公司);ODS-C18色譜柱(美國Thermo公司);SP-2 102UV紫外可見分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司);凝膠成像系統(tǒng)GIS-2008(上海天能公司)。
1.2.2 飼料原料
玉米蛋白粉(山東濱州海星飼料廠);瓜爾豆粕(廣饒六合化工有限公司);棕櫚仁粕(大連鎂達(dá)國際貿(mào)易有限公司);預(yù)混料(廈門百穗行科技有限公司);益生菌劑(1.0×1010CFU/g)(山東寶來利來生物工程公司);杏鮑菇菌柄(福建嘉勝集團(tuán)大建飼料有限公司)。
1.2.3 雞苗
黃腳麻雞(廈門五顯鎮(zhèn)三秀種禽廠)。
1.2.4 試驗(yàn)地點(diǎn)和時(shí)間
廈門市集美區(qū)仙靈旗農(nóng)莊,試驗(yàn)時(shí)間為2013年4—5月。
1.3.1 FAE 粗酶液的制備
1.3.1.1 菌種
黑曲霉,實(shí)驗(yàn)室自行篩選并保藏。
1.3.1.2 培養(yǎng)基成分
種子培養(yǎng)基:PDA 培養(yǎng)基[6],36 ℃,200 r/min培養(yǎng)2 d。發(fā)酵培養(yǎng)基:麥糟及麥麩干燥粉碎過100目篩,麥糟∶麥麩=1∶4(m/m)比例加入白瓷盤中并按1∶1.5(m/V)添加營養(yǎng)鹽溶液,混勻,121℃滅菌30 min,33℃培養(yǎng)6 d。營養(yǎng)鹽溶液:蛋白胨 0.2%,酵母粉 0.4%,NaH2PO4·2H2O 0.152%,KH2PO40.1%,CaCl20.03%,MgSO4·7H2O 0.03%,Na2HPO4·12H2O 3.14 g,Na2HPO4·2H2O 1.56% 。
1.3.1.3 粗酶液的制備
發(fā)酵料中加入8倍體積的蒸餾水,33℃,180 r/min中抽提2.5 h,靜置,用 8 層紗布過濾,得濾液,再將濾液超濾制備得FAE粗酶液,F(xiàn)AE粗酶液酶活達(dá)20 U/mL以上。超濾條件為操作溫度20℃、壓力0.1 MPa及進(jìn)料速度200 mL/min。
1.3.2 普通發(fā)酵飼料及酶化發(fā)酵飼料的制備
發(fā)酵培養(yǎng)基(以干物質(zhì)計(jì)):菌柄12%,玉米蛋白26%,棕櫚仁粕11%,谷殼粉16%,瓜爾豆粕5%,玉米粉5%,糖蜜0.3%。
普通發(fā)酵飼料制備:將發(fā)酵培養(yǎng)基加入0.1%益生菌劑混合均勻,裝入發(fā)酵袋常溫發(fā)酵。每袋質(zhì)量為1 000 g。
酶化發(fā)酵飼料制備:按8 U/g干菌柄將FAE粗酶液加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中,再加入0.1%益生菌劑混合均勻,裝入發(fā)酵袋常溫發(fā)酵。每袋質(zhì)量為1 000 g。
1.4.1 飼料常規(guī)成分測定
粗蛋白質(zhì)含量按GBT 6432—1994《飼料中粗蛋白質(zhì)測定方法》分析[7];中性洗滌纖維(neutral detergent fiber,NDF)含量按 GB/T 20806—2006《飼料中中性洗滌纖維的測定》分析[8];酸性洗滌纖維(acid detergent fiber,ADF)含量按 NY/T 1459—2007《飼料中酸性洗滌纖維的測定》分析[9];酸 性 洗 滌 木 質(zhì) 素 (acid detergent lignin,ADL)含量按GB/T 20805—2006《飼料中酸性洗滌木質(zhì)素的測定》分析[10]。
1.4.2 總氨基酸、乳酸含量測定
總氨基酸含量采用南京建成生物工程研究所的總氨基酸測定試劑盒,原理為銅離子(Cu2+)與氨基酸的顯色反應(yīng)[11]。乳酸含量采用南京建成生物工程研究所的乳酸測試盒測定,原理為乳酸脫氫酶的顯色反應(yīng)[12]。
1.4.3 總菌數(shù)、乳酸菌數(shù)測定
總菌數(shù)按GB/T 13093—2006《飼料中細(xì)菌總數(shù)的測定》分析[13]。乳酸菌數(shù)按 GB 4789.35—2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)乳酸菌檢驗(yàn)》分析[14]。
1.4.4 飼料發(fā)酵前后小分子肽變化測定
采用不連續(xù)凝膠電泳分析[15]。上層丙烯酰胺5%,下層丙烯酰胺15%。
1.4.5 XOS 和 FA 含量測定
XOS含量采用HPLC測定。HPX-87H色譜柱,示差折光檢測器。柱溫50℃,流動(dòng)相5 mmol/L的硫酸,流速 0.4 mL/min[6]。
FA含量采用HPLC法測定。色譜柱為ODS-C18柱,318 nm檢測,柱溫30℃。流動(dòng)相為甲醇∶水∶冰醋酸 =30∶69.5∶0.5(V/V/V),流速為0.9 mL/min[6]。
1.4.6 飼料衛(wèi)生指標(biāo)檢測
飼料送至福建省分析檢測中心,按GB 13078—2001《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》[16]分析。
1.4.7 肉雞雞肉品質(zhì)
肉雞送至福建省分析檢測中心,按GB 18406.3—2001《農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量 無公害畜禽安全要求》[17]分析。
數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件的ANOVA進(jìn)行方差分析,Duncan氏法進(jìn)行多重比較,各組數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。
2.1.1 發(fā)酵過程中飼料重量變化
由表2可知,發(fā)酵過程中2個(gè)試驗(yàn)組飼料重量都呈下降趨勢(shì),第0天與第15天飼料重量差異顯著(P<0.05),隨著發(fā)酵進(jìn)行,酶化發(fā)酵飼料重量減少比普通發(fā)酵飼料多,說明酶化發(fā)酵飼料代謝較徹底。發(fā)酵過程中飼料重量的減少是由于發(fā)酵基料水分的揮發(fā)、發(fā)酵過程中微生物的活動(dòng)及酶促反應(yīng),使基料中的碳水化合物及蛋白質(zhì)等大分子有機(jī)物分解成小分子物質(zhì)而損失。
2.1.2 發(fā)酵過程中FA含量變化
由表3可知,在整個(gè)發(fā)酵過程中普通發(fā)酵飼料 FA 含量在 0.23~0.40 mg/g,變化范圍小;而酶化發(fā)酵飼料隨著發(fā)酵時(shí)間的延長,F(xiàn)A含量迅速上升,第10天 FA含量達(dá)最高,為4.11 mg/g,與第0天比,差異極顯著(P<0.01)。這是因?yàn)樵诿富l(fā)酵飼料中加入了FAE,F(xiàn)AE與益生菌產(chǎn)生的木聚糖酶協(xié)同作用釋放出FA;而普通發(fā)酵飼料因沒有添加FAE,發(fā)酵過程中FA含量很低。
2.1.3 發(fā)酵過程中XOS含量變化
由表4可知,2個(gè)試驗(yàn)組發(fā)酵開始,XOS含量都是隨著發(fā)酵時(shí)間增加而增加,但酶化發(fā)酵飼料XOS含量明顯比普通發(fā)酵飼料高,這是由于酶化發(fā)酵飼料添加的FAE與益生菌產(chǎn)生的木聚糖酶協(xié)同作用,提高了XOS的含量。發(fā)酵第10天,酶化發(fā)酵飼料其XOS含量達(dá)最高,為36.33 mg/g,與第0天比,差異顯著(P<0.05);而普通發(fā)酵飼料第9天達(dá)最高,為20.43 mg/g,與第0天比,差異顯著(P<0.05),隨后2個(gè)試驗(yàn)組XOS含量都緩慢下降。
表2 飼料重量隨發(fā)酵時(shí)間變化Table 2 Feed quality changed with fermentation time g
表3 飼料中FA含量隨發(fā)酵時(shí)間變化Table 3 Content of FA in feed changed with fermentation time mg/g
表4 飼料中XOS含量隨發(fā)酵時(shí)間變化Table 4 Content of XOSin feed changed with fermentation time mg/g
2.1.4 發(fā)酵過程中粗蛋白質(zhì)含量變化
由表5可知,在整個(gè)發(fā)酵過程中,酶化發(fā)酵飼料的粗蛋白質(zhì)含量高于普通發(fā)酵飼料。這是因?yàn)镕AE的加入,增加飼料中XOS的量,而XOS有利于益生菌劑中乳酸菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌的繁殖,從而提高了酶化發(fā)酵飼料中粗蛋白質(zhì)的含量。發(fā)酵第5天,酶化發(fā)酵飼料及普通發(fā)酵飼料粗蛋白質(zhì)含量都達(dá)最高,酶化發(fā)酵飼料粗蛋白質(zhì)含量到達(dá)24.67%,與第0天比,差異極顯著(P<0.01);而普通發(fā)酵飼料最高為23.15%,與第0天比,差異顯著(P<0.05),隨后粗蛋白質(zhì)含量都緩慢下降。試驗(yàn)結(jié)果與胡瑞等[18]研究酶菌聯(lián)合發(fā)酵對(duì)豆粕品質(zhì)影響時(shí),粗蛋白質(zhì)含量變化結(jié)果一致。
2.1.5 發(fā)酵過程中總氨基酸含量變化
由表6可知,在整個(gè)發(fā)酵過程中,酶化發(fā)酵飼料總氨基酸含量都高于普通發(fā)酵飼料。發(fā)酵開始,2個(gè)試驗(yàn)組中總氨基酸含量都隨著發(fā)酵時(shí)間增加而增加,第8天酶化發(fā)酵飼料及普通發(fā)酵飼料總氨基酸含量都達(dá)最高,分別為 21.26、13.29 mg/g,與第0天比,差異顯著或極顯著(P<0.05或P<0.01),隨后總氨基酸含量逐漸下降。與李龍等[19]利用復(fù)合益生菌發(fā)酵飼料時(shí),總氨基酸的變化趨勢(shì)一致。
表5 飼料中粗蛋白質(zhì)含量隨發(fā)酵時(shí)間變化Table 5 Content of crude protein in feed changed with fermentation time %
表6 飼料中總氨基酸含量隨發(fā)酵時(shí)間變化Table 6 Content of total amino acid in feed changed with fermentation time mg/g
2.1.6 發(fā)酵過程中總菌數(shù)變化
如表7可知,在發(fā)酵開始階段,由于飼料中營養(yǎng)豐富,2個(gè)試驗(yàn)組總菌數(shù)都是呈上升趨勢(shì),第10天酶化發(fā)酵飼料總菌數(shù)為22.00×105個(gè)/g,與第0天比,差異顯著(P<0.05),第9 天普通發(fā)酵飼料總菌數(shù)為10.00 ×105個(gè)/g,與第0天比,差異顯著(P<0.05);隨后,乳酸的生成使得飼料中pH降低,導(dǎo)致飼料中有些菌不適應(yīng)環(huán)境而數(shù)量開始減少;發(fā)酵后期總菌數(shù)保持穩(wěn)定,這與賈鵬輝等[20]試驗(yàn)結(jié)果相類似。酶化發(fā)酵飼料可能由于FAE作用,產(chǎn)生較多XOS,促進(jìn)益生菌大量增殖而總菌數(shù)較普通發(fā)酵飼料多。
表7 飼料中總菌數(shù)隨發(fā)酵時(shí)間變化Table 7 Total number of bacteria in feed changed with fermentation time 個(gè)/g
2.1.7 發(fā)酵過程中乳酸菌數(shù)變化
如表8可知,發(fā)酵開始,酶化發(fā)酵飼料及普通發(fā)酵飼料乳酸菌數(shù)都是呈上升趨勢(shì),在第12天其菌數(shù)都達(dá)最大,其乳酸菌數(shù)分別為 9.300×105及3.200×105個(gè)/g,與第 0天比,差異都顯著(P <0.05)。之后由于乳酸菌處于衰亡期,2個(gè)試驗(yàn)組的乳酸菌數(shù)開始下降并趨于平衡。
2.1.8 發(fā)酵過程中乳酸含量變化
從表9可知,整個(gè)發(fā)酵過程2個(gè)試驗(yàn)組乳酸含量一直增加,在第10天,酶化發(fā)酵飼料乳酸含量達(dá)最大,為8.79 g/kg,與第0天比,差異顯著(P <0.05);普通發(fā)酵飼料在第9天達(dá)最大,為7.14 g/kg,與第0天比,差異顯著(P<0.05)。經(jīng)過一定時(shí)間發(fā)酵后,乳酸菌增殖減緩,分泌的乳酸減少,乳酸含量維持在一定水平。乳酸含量增加會(huì)提高飼料的適口性,對(duì)動(dòng)物的生長有積極的促進(jìn)作用。
表8 飼料中乳酸菌數(shù)隨發(fā)酵時(shí)間變化Table 8 Number of Lactobacillus in feed changed with fermentation time 個(gè)/g
表9 飼料中乳酸含量隨發(fā)酵時(shí)間變化Table 9 Content of lactate in feed changed with fermentation time g/kg
2.1.9 發(fā)酵過程中飼料pH變化
由表10可知,發(fā)酵第1天,2個(gè)試驗(yàn)組pH基本一致,第3天后,由于乳酸菌的繁殖,導(dǎo)致pH下降,由于酶化發(fā)酵飼料乳酸菌較普通發(fā)酵飼料多,使得酶化發(fā)酵飼料的pH較低。發(fā)酵第15天,酶化發(fā)酵飼料的pH為4.25,普通發(fā)酵飼料的pH為4.32,與第0天比,差異都極顯著(P<0.01)。
表10 飼料中p H隨發(fā)酵時(shí)間變化Table 10 The pH of feed changed with fermentation time
2.1.10 發(fā)酵過程中 ADF、ADL、NDF 含量變化趨勢(shì)
由表11可知,酶化發(fā)酵飼料中ADL、ADF和NDF含量都比普通發(fā)酵飼料要低,且第10天2種發(fā)酵飼料ADL、ADF和NDF含量與第0天比都差異顯著或極顯著(P<0.05或P<0.01)。這是因?yàn)槊富l(fā)酵飼料中FAE與益生菌劑中微生物分泌的非淀粉降解酶協(xié)同降解發(fā)酵原料中的木質(zhì)纖維,提高了木質(zhì)纖維的降解率,因此酶化發(fā)酵飼料在降低飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子的同時(shí)還能提高飼料中的營養(yǎng)成分。
2.1.11 發(fā)酵過程飼料中小分子肽變化
圖1可知,隨著發(fā)酵時(shí)間進(jìn)行,普通發(fā)酵飼料與酶化發(fā)酵飼料中大分子蛋白質(zhì)能夠降解為小分子肽,這是因?yàn)榘l(fā)酵飼料中有益菌的生長產(chǎn)生了更多的蛋白質(zhì)水解酶,促進(jìn)了小分子肽含量的增加。肽更容易被動(dòng)物吸收,提高飼料品質(zhì)。
2.1.12 飼料衛(wèi)生指標(biāo)檢測
經(jīng)檢測,酶化發(fā)酵飼料的各項(xiàng)衛(wèi)生指標(biāo)符合GB 13078—2001《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》要求。
2.2.1 發(fā)酵飼料對(duì)肉雞成活率的影響
將不同的發(fā)酵飼料以10%的比例添加到肉雞基礎(chǔ)飼糧中,肉雞飼養(yǎng)結(jié)果如表12。在飼喂全程中,飼糧中未添加任何的抗生素及其他的藥物,各組雞的死亡率均為0,死亡率差異不顯著(P>0.05),并未體現(xiàn)出添加發(fā)酵飼料抗病的優(yōu)勢(shì),這 可能與飼養(yǎng)管理合理,場地衛(wèi)生條件好有關(guān)。
表11 飼料發(fā)酵過程中ADF、ADL、NDF含量變化趨勢(shì)Table 11 The contents of ADF,ADL,NDF changed with fermentation time %
圖1 發(fā)酵過程飼料中小肽變化電泳圖Fig.1 Electrophoresis of small peptides before and after fermented
2.2.2 發(fā)酵飼料對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響
從表13可知,與對(duì)照組相比,F(xiàn)AE酶化飼料和酶化發(fā)酵飼料均能提高肉雞平均日增重,分別提高了1.23%、4.31%,而普通發(fā)酵飼料則使肉雞平均日增重降低了1.98%,但是差異不顯著(P>0.05)。發(fā)酵飼料能提高平均日增重,這與發(fā)酵飼料中含有更多的營養(yǎng)物質(zhì)且肉雞養(yǎng)分利用率的提高有關(guān)。普通發(fā)酵飼料、FAE酶化飼料和酶化發(fā)酵飼料均有降低平均日采食量的趨勢(shì),分別降低了 2.58%、3.01%、8.34%,但是差異不顯著(P >0.05)。酶化發(fā)酵飼料對(duì)降低料重比具有極顯著的作用(P<0.01),降低了12.45%,雖然普通發(fā)酵飼料和FAE酶化飼料也能降低料重比,但是只分別降低1.24%和8.30%(P >0.05)。酶化發(fā)酵飼料與普通發(fā)酵飼料相比,肉雞平均日增重提高了6.42%(P >0.05),平均日采食量降低了 5.91%(P >0.05),料重比降低了 11.34%(P >0.05)。而本課題組的楊道秀等[21]將FAE粗酶液及商品飼料酶-“溢多酶”(主要含木聚糖酶、纖維素酶、淀粉酶等)添加入飼料中,試制酶化飼料飼喂肉雞,與對(duì)照組相比,肉雞平均日增重提高了4.37%,料重比降低了7.63%,與本試驗(yàn)結(jié)果相近。
2.2.3 肉雞衛(wèi)生檢測指標(biāo)結(jié)果
雞肉各項(xiàng)衛(wèi)生指標(biāo)符合GB 18406.3—2001《農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量-無公害畜禽安全要求》。
廈漳食用菌的生產(chǎn)規(guī)模位居全國之首,在生產(chǎn)過種中,產(chǎn)生了大量的菌柄下腳料。菌柄營養(yǎng)非常的豐富,如杏鮑菇的菌柄,經(jīng)本課題組測定,粗蛋白質(zhì)含量為12.53%(干重),多糖含量為33.74%(干重),游離氨基酸含量為3.56%(干重)。但其非淀粉多糖抗?fàn)I養(yǎng)因子高,直接飼喂動(dòng)物適口性差。因此試驗(yàn)選用杏鮑菇菌作為主要的發(fā)酵原料。
目前已有FAE對(duì)反芻動(dòng)物飼料中提高木質(zhì)纖維降解率的報(bào)導(dǎo),楊紅建等[22]申請(qǐng)專利《一種飼用復(fù)合阿魏酸酯酶添加劑》,表明飼料原料中添加FAE可提高牧草、農(nóng)作物秸稈及糠麩類飼料酶解過程中還原糖釋放量、細(xì)胞壁降解率以及瘤胃發(fā)酵揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)生量。Krueher等[23]在百喜草、百慕達(dá)草中添加不同濃度的FAE酶液,結(jié)果發(fā)現(xiàn)瘤胃微生物對(duì)NDP的降解有顯著的促進(jìn)作用,降解程度與酶的添加量成線性關(guān)系。這些報(bào)導(dǎo)關(guān)注的都是阿魏酸酯酶對(duì)飼料中非淀粉多糖降解率的影響,未涉及酶與木質(zhì)纖維降解產(chǎn)物(如阿魏酸及低聚糖)的關(guān)系及降解產(chǎn)物對(duì)動(dòng)物的影響。本文研究結(jié)果表明添加了FAE的發(fā)酵飼料,不僅提高了飼料中的ADF、NDF及ADL降解率,且產(chǎn)生了對(duì)動(dòng)物有生理活性的FA及XOS,飼喂肉雞時(shí),有利于降低料重比。
表12 不同發(fā)酵飼料對(duì)肉雞成活率的影響Table 12 Effects of different fermented feed on the survival of broilers
表13 不同發(fā)酵飼料對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響Table 13 Effects of different fermented feed on broiler’s performance
①酶化發(fā)酵飼料與普通發(fā)酵飼料相比,其產(chǎn)生的XOS和FA更多,酶化發(fā)酵飼料FA含量最高為 4.11 mg/g,其 XOS 含量最高為 36.33 mg/g。
②酶化發(fā)酵飼料與普通發(fā)酵飼料相比,飼料中粗蛋白質(zhì)含量、總氨基酸含量、總菌數(shù)及乳酸菌數(shù)都更高,且其ADF、NDF及ADL在發(fā)酵過程中得到更好的降解。
③酶化發(fā)酵飼料與普通發(fā)酵飼料相比,肉雞平均日增重提高了6.42%,平均日采食量降低了5.91%,料重比降低了11.34%,而肉雞飼糧中添加普通發(fā)酵飼料和FAE酶化飼料均能夠促進(jìn)肉雞的生長,但效果不顯著。
[1] 李夏蘭,程珊影,楊道秀,等.阿魏酸酯酶和木聚糖酶協(xié)同降解麥糟[J].化工進(jìn)展,2012,31(5):1096-1102.
[2] YANG H J,XIE C Y.Assessment of fibrolytic activities of 18 commercial enzyme products and their abilities to degrade the cell wall fraction of corn stalks in in vitro enzymatic and ruminal batch cultures[J].Animal Feed Science and Technology,2010,159(3):110 -121.
[3] 趙東平,楊文鈺,陳興福.阿魏酸的研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2008,19(8):1839 -1841.
[4] 陳瑞娟.新型低聚糖的介紹[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2003(2):82-90.
[5] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.NY/T 33—2004雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2004.
[6] 鄧軼韜,李夏蘭,陳宗香,等.阿魏酸酯酶產(chǎn)生菌的篩選及產(chǎn)酶條件的優(yōu)化[J].華僑大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2011,32(3):300 -303.
[7] 中華人民共和國國家技術(shù)監(jiān)督局.GB/T 6432—1994.飼料中粗蛋白測定方法[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,1995.
[8] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T 20806—2006飼料中中性洗滌纖維(NDF)的測定[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2006.
[9] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.NY/T 1459—2007飼料中酸性洗滌纖維的測定[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2007.
[10] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T 20805—2006飼料中酸性洗滌木質(zhì)素的測定[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2006.
[11] 邢穎.氨基酸金屬離子螯合物合成條件及測定方法的研究[D].碩士學(xué)位論文.成都:四川大學(xué),2011.
[12] 孫晶,朱學(xué)伸,王苑,等.食品中L-乳酸檢測方法及其研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(31):17801-17802.
[13] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T 13093—2006飼料中細(xì)菌總數(shù)的測定[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2006.
[14] 中華人民共和國國家衛(wèi)生部.GB 4789.35—2010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)乳酸菌檢驗(yàn)[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2010.
[15] 周乃繼,李愛科,張曉琳,等.一種用于飼料肽快速檢測的Tricine-SDS-PAGE方法[J].中國生物工程雜志,2008(專刊):63-64.
[16] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB 13078—2001飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2001.
[17] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB 18406.3—2001農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量無公害畜禽肉安全要求[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2001.
[18] 胡瑞,陳艷,王之盛,等.復(fù)合益生菌發(fā)酵豆粕生產(chǎn)工藝參數(shù)的優(yōu)化及酶菌聯(lián)合發(fā)酵對(duì)豆粕品質(zhì)的影響[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(8):1896 -1903.
[19] 李龍,陳小連,徐建雄.復(fù)合益生菌發(fā)酵飼料工藝參數(shù)及其品質(zhì)研究[J].上海交通大學(xué)學(xué)報(bào):農(nóng)業(yè)科學(xué)版,2010,28(6):530 -551.
[20] 賈朋輝,郭洪新,李國軍,等.微生態(tài)發(fā)酵飼料菌群變化及其應(yīng)用[J].飼料博覽,2009(3):24-27.
[21] 楊道秀,李夏蘭,陳培欽,等.新型復(fù)合酶在肉雞飼料中的應(yīng)用[J].食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào),2013,32(4):410-416.
[22] 楊紅建,謝春元.一種飼用復(fù)合阿魏酸酯酶添加劑[P].CN101228921,中國專利.2008 -07-30.
[23] KRUEGER N A,ADESOGAN A T,STAPLES C R,et al.The potential to increase digestibility of tropical grasses with a fungal,ferulic acid esterase enzyme preparation[J].Animal Feed Science and Technology,2008,145(1):95-108.