雞卡氏住白細胞病病原學(xué)研究和防治技術(shù)

酒雅麗 (信陽市畜產(chǎn)品檢驗檢測中心，河南信陽 464000)

卡氏住白細胞(Leucocytozoon caulleryi)，寄生在雞的白細胞和紅細胞內(nèi)，由此引起的一種雞血液寄生蟲病，稱為雞住白細胞病。此病近年來在信陽地區(qū)養(yǎng)雞場的蛋雞、育成雞及雛雞中時有發(fā)生和流行，對養(yǎng)雞業(yè)有嚴(yán)重危害，特別是雛雞感染后出現(xiàn)高死亡率，給養(yǎng)雞戶造成巨大經(jīng)濟損失，嚴(yán)重威脅養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展。為摸清該病在豫南雞血液內(nèi)生長發(fā)育時蟲體各階段形態(tài)特征及其給組織器官造成的變化，進而探究此病的流行規(guī)律，對自然發(fā)病雞場抽樣采血600只，分別作涂片，同時實驗室人工接種健康雞10只發(fā)病作血片共1 000多張。對自然發(fā)病雞和人工接種發(fā)病雞采集脾、肝、心、腎、肺等制作組織印片960張，組織學(xué)切片260多張。通過實驗室觀察研究，對信陽地區(qū)病雞體內(nèi)各期病原體形態(tài)變化和組織切片中病原形態(tài)變化此病流行規(guī)律、典型癥狀及診斷等進行了總結(jié)，并提出了一些防治技術(shù)。

1 材料與方法

1．1 材料來源 信陽市郊區(qū)李某雞場自然發(fā)病雞和健康雞分別采血，作血液涂片和組織印片，作為對病原體觀察的材料。

1．2 方法

1．2．1 血液涂片檢查。2013年9月，李某雞場飼養(yǎng)的3 600只蛋雞，50 d以后有一半以上的雞出現(xiàn)精神不好，雞冠發(fā)白，嚴(yán)重拉綠色稀糞而死亡。對嚴(yán)重和不嚴(yán)重的病雞分別在翅下靜脈和雞冠處采血涂片，用姬氏和瑞氏涂片后在油鏡下觀察病原體和雞組織細胞的變化。

1．2．2 病理剖檢。取病雞的心、肝、脾、腎、肺、腦和骨髓，制成組織印片并用姬瑞氏染色，油鏡觀察病雞各組織中蟲體形態(tài)及細胞的變化。

1．2．3 人工接種試驗。將發(fā)病嚴(yán)重的雞采血共20 ml，加入抗凝劑分別給10只健康的雞接種，每天觀察臨床癥狀和血液涂片，觀察裂殖子和配子體在外周血液中出現(xiàn)的時間及蟲體形態(tài)變化和雞細胞的變化。

1．2．4 組織學(xué)切片檢查。取肝、脾、肺、腎、心、胰，用石蠟包埋切片，H．E染色鏡檢，觀察不同裂殖體的形態(tài)變化。

2 結(jié)果與分析

2．1 血液涂片檢查結(jié)果 血液涂片中，可明顯看到蟲體在雞血液內(nèi)發(fā)育時各階段形態(tài)和細胞的變化。①在血漿中可看到圓點狀的裂殖子染色呈蘭紫色，其直徑為0．4～1．0 μm，侵入紅細胞和白細胞的胞漿中的裂殖子直徑約1．1 μm，侵入紅細胞的蟲體一般為1～2個，多則可達16個以上，蟲體侵入少時蟲體在細胞核旁側(cè)，紅細胞的變化不大，但蟲體侵入多時胞漿顯示出許多網(wǎng)狀不著色的空泡。②位于雞細胞內(nèi)的球形蟲體，逐漸發(fā)育變大已形成雛形配子體，蟲體核著染深蘭紫色，胞漿淡紅色，其大小約2～3 μm，雞細胞核發(fā)生移位。③在雞細胞內(nèi)發(fā)育的配子體比前期明顯變大，將細胞核擠到邊緣，其著色變淡，核變大，胞體變大，配子體保留在雞細胞內(nèi)。配子體著色情況，核著色較淡，胞質(zhì)較多，著色淡紅。在血漿中見到配子體形狀不規(guī)則，形態(tài)多樣，其大小可達7～9×9～10 μm。④在雞細胞及血漿中發(fā)育的配子體形狀近似圓形，其大小約10～12 μm，因配子體增大將雞細胞核擠到極邊緣，快要被擠掉的狀態(tài)。⑤在雞細胞內(nèi)發(fā)育成熟的配子體，可明顯看到大配子體呈圓球形，有豐富的細胞質(zhì)，著染深蘭色。細胞核小而明顯，著染淡紅色，核仁呈紅色，其直徑大小為13～26 μm。小配子細胞質(zhì)較少，著色淺蘭色，細胞核占大部分，紫紅色，其直徑大小為8～17 μm。

2．2 病理剖檢及組織印片觀察結(jié)果 通過剖檢和肉眼觀察發(fā)現(xiàn)，腎臟腫大出血，肝臟上有豆類大、圓形、灰白色的壞死灶。氣管、粘膜有輕微的炎癥，部分病雞的肺部有紅色肝樣的壞死灶。將這些病灶剪下制成壓片并染色，在油鏡下可看到許多小點狀的裂殖子。

2．3 人工接種試驗結(jié)果 9月6日進行接種試驗，9月13日分別采血涂片，可見到紅細胞及血漿中有少量的裂殖子，第2天紅細胞染蟲率明顯上升，9月16日、9月18日、9月19日雞出現(xiàn)精神沉郁、不食、拉綠色稀糞。分別采集雞血液，制作血片檢查發(fā)現(xiàn)紅細胞染蟲率達高峰，可看到配子體的出現(xiàn)。試驗中有1只雞9月17日死亡，2只雞9月18日死亡，3只雞9月20日死亡，其余4只雞未死，到月底剖殺，剖檢時血液涂片和組織器官壓片發(fā)現(xiàn)有裂殖子和配子體。

2．4 組織學(xué)切片觀察結(jié)果 ①未成熟型的裂殖體近似圓形，直徑約140 μm，其體內(nèi)的包囊，囊壁光滑，胞質(zhì)粉紅色，壁厚14 μm，內(nèi)層色淺，囊內(nèi)看到有不規(guī)則裂片，裂殖子胚，顏色淺紫或暗紅色，其上有深紅色粒狀核2～10個;表層裂殖子胚與囊壁緊接，形狀似鋸齒，中部裂殖子胚間常有空泡或顏色較表層深。壁外有7～10 μm寬的空環(huán)。②成熟型的裂殖體呈圓形比較大，壁厚3～9 μm，囊內(nèi)含較小裂殖胚或分化為1～2個粒核的小個體，即裂殖子。③破裂型囊壁厚3～8 μm，囊壁上有1破口，內(nèi)含物由破口處流出，排空后囊壁萎縮變形，壁外有圓形或橢圓形細胞分布。④吸收型囊壁界限模糊不清，囊腔內(nèi)有多團蘭染組織細胞，肥大細胞和成纖維細胞分片占據(jù)。⑤初生型在腎、脾、心組織切片中看到裂殖體呈橢圓形暗紅色，其直徑約14～16 μm，有的內(nèi)含有深色團，無囊壁，位于雞細胞內(nèi)，雞細胞核或有或無，周圍有組織細胞團。⑥在腎遠曲管壁中見到21 μm×22 μm的裂殖體，其內(nèi)均有很多紫紅色的圓小顆粒點，雞細胞核被擠到一旁，胞體變大，胞質(zhì)著色變淡。肺臟中的裂殖體多位于近小葉間之呼吸毛細血管處。

3 防治方法

(1)在流行季節(jié)，雞舍內(nèi)外可用7%馬拉硫磷、敵殺死等藥物進行噴灑1次，門窗要釘上紗窗，防止此病的傳播者蠓進入雞舍。

(2)鹽酸二奎寧，每支 1 ml(0．25 g)，每只雞肌注 0．25 ml，每天1 次，連用 5 d。

(3)氯喹拌料200 mg/kg，連用3 d，隔2 d后再喂3 d。

(4)常山、苦參、青蒿、黃芩、地榆炭、木香、白芍、墨旱蓮各200 g，打碎后拌入500 kg飼料中，再加入少量的磺胺類藥物，效果更佳。

4 討論與結(jié)論

(1)通過實驗室對雞卡氏住白細胞病病原學(xué)的研究，發(fā)現(xiàn)信陽市近年來雞卡氏住白細胞蟲體在血液細胞內(nèi)發(fā)育各期形態(tài)變化與國內(nèi)外有關(guān)資料報道的各階段蟲體形態(tài)變化基本相同。大配子平均大小為14．86 μm，小配子體平均大小為12 μm。大配子體的數(shù)量比小配子體的數(shù)量多。

(2)通過病變組織印片觀察發(fā)現(xiàn)，在雞細胞內(nèi)外除看到第3和4期的配子體外，裂殖子。

(3)從自然發(fā)病的雞和人工接種健康雞發(fā)病分別采血涂片，通過觀察感染后的癥狀發(fā)現(xiàn)裂殖子和配子體在雞血液中寄生時間較長，引起雞體消瘦、精神沉郁、喜臥、不愿站立、貧血嚴(yán)重、生長緩慢、飼料利用率降低，給養(yǎng)殖戶帶來經(jīng)濟損失。

(4)通過病理切片檢查發(fā)現(xiàn)，可見到圓形大裂殖體，同時還能看到成熟的裂殖體呈圓球形，著染淡紅色，內(nèi)有紫紅色小點狀觀病變程度相同。腎、脾內(nèi)裂殖體數(shù)量最多，有128個/cm2，聚集或散在，最多一叢達18個，裂殖體直徑為27～68 μm，而肺、肝、心、胰臟器上的裂殖體數(shù)量較少。

(5)信陽市位于河南省南部，雨水偏多。以種水稻為主，水源豐富，傳播者蠓分布廣泛在流行季節(jié)，雞場一定加強飼養(yǎng)管理，雞舍內(nèi)外要定期消毒，噴灑驅(qū)蟲藥物，雞場周圍要鏟除雜草，墊平臭污水溝，門窗釘上紗窗，飼料中加入殺蟲、清熱、補血的中西藥物來預(yù)防和治療此病。

［1］M·S·霍夫斯塔．《禽病學(xué)》下冊［M］．胡祥壁，等，譯．北京:農(nóng)業(yè)出版社，1981:956－960．

［2］李德昌．白細胞原蟲病［M］//中國人民解放軍獸醫(yī)大學(xué)寄生蟲病學(xué)教研室．家畜寄生蟲病學(xué)．中國人民解放軍獸醫(yī)大學(xué)，1985:316－318．

［3］孔繁瑤．家畜寄生蟲學(xué)［M］．北京:北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2004:357－358．

［4］張西臣，李建華．動物寄生蟲病學(xué)［M］．北京:科學(xué)出版社，2010．