高血壓腎功能損害患者血清中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1含量檢測(cè)及其臨床價(jià)值分析

王 恭 云 輝 曾學(xué)平

高血壓腎功能損害患者血清中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1含量檢測(cè)及其臨床價(jià)值分析

王 恭①云 輝①曾學(xué)平②

目的：研究高血壓腎功能損害患者血清中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)含量檢測(cè)及其臨床價(jià)值。方法：篩選150例原發(fā)性高血壓患者，根據(jù)病情將其分為3組：①原發(fā)性高血壓未合并靶器官功能損害的患者為對(duì)照組(50例)；②原發(fā)性高血壓合并腎功能損害Ⅰ期的患者為腎功能Ⅰ期組(50例)；③原發(fā)性高血壓合并腎功能損害Ⅱ期的患者為腎功能Ⅱ期組(50例)。比較3組受試者的血清TGF-β1含量以及腎功能指標(biāo)。結(jié)果：3組受試者的血肌酐(Scr)和血尿素氮(Urea)水平相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；腎功能Ⅰ期組、Ⅱ期組患者的內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)低于對(duì)照組；TGF-β1水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=23.523，P＜0.05)；TGF-β1水平與Ccr呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。結(jié)論：當(dāng)腎功能損害為Ⅰ期、Ⅱ期時(shí)，TGF-β1水平發(fā)生明顯改變，且與菊粉清除率(Cin)水平具有良好的相關(guān)性，是反應(yīng)腎功能的理想指標(biāo)。

高血壓；腎功能損害；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1；內(nèi)生肌酐清除率

[First-author’s address] Department of Out-Patient, No.187 Hospital of PLA, Haikou 571159, China.

原發(fā)性高血壓常常合并靶器官功能損害，而腎臟是最常見(jiàn)的受累靶器官，故在臨床實(shí)踐中，治療方案的制定有賴(lài)于疾病的早期發(fā)現(xiàn)和診斷[1]。血肌酐和血尿素氮是臨床上用于檢測(cè)腎功能的常用指標(biāo)，但只有當(dāng)腎功能損害＞50%時(shí)，以上兩項(xiàng)指標(biāo)才會(huì)發(fā)生變化，這無(wú)疑延誤了疾病的診斷和治療[2]。內(nèi)生肌酐清除率(creatinine clearance rate，Ccr)是反應(yīng)腎功能的金標(biāo)準(zhǔn)，能夠早期發(fā)現(xiàn)腎功能的損害，但檢測(cè)步驟繁瑣、需要使用外源性的標(biāo)志物，難以被患者接受。因此探尋檢測(cè)更為便捷、反應(yīng)腎功能更為靈敏的指標(biāo)具有現(xiàn)實(shí)的臨床意義。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是具有廣泛生物學(xué)功能的細(xì)胞因子，在腎臟功能損害的病理生理過(guò)程中發(fā)揮了重要作用[3]。本研究分析探討高血壓腎功能損害患者血清中TGF-β1含量及其臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年8月至2013年9月在解放軍第187醫(yī)院心內(nèi)科和腎內(nèi)科門(mén)診就診的150例原發(fā)性高血壓患者，根據(jù)病情將其分為3組：①原發(fā)性高血壓未合并靶器官功能損害的患者為對(duì)照組(50例)，其中男性32例，女性18例，年齡(57.9±7.2)歲；②原發(fā)性高血壓合并腎功能損害Ⅰ期的患者為腎功能Ⅰ期組(50例)，其中男性30例，女性20例，年齡(59.4±6.9)歲；③原發(fā)性高血壓合并腎功能損害Ⅱ期的患者為腎功能Ⅱ期組(50例)，其中男性34例，女性16例，年齡(57.3±7.8)歲。3組受試者在年齡、性別、血壓水平以及口服降壓藥情況相比無(wú)差異，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①明確的原發(fā)性高血壓診斷；②檢測(cè)Ccr，對(duì)照組患者Ccr為80～120 ml/min，腎功能損害Ⅰ期組Ccr為60～80 ml/min，腎功能損害Ⅱ期組Ccr為40～60 ml/min；③取得患者及家屬知情同意，愿意參加所有受試項(xiàng)目的檢測(cè)。

(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①繼發(fā)性高血壓患者；②合并明顯心功能損害以及腎功能損害Ⅲ期、Ⅳ期患者；③未能堅(jiān)持參加所有受試項(xiàng)目檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 TGF-β1檢測(cè)

采集3組患者外周靜脈血5 ml，離心后采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)TGF-β1含量。檢測(cè)步驟：①反應(yīng)板每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100 ul，充分混勻后在37℃水浴箱中靜置120 min；②用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4～6次，并在濾紙上印干；③每孔中加入第一抗體工作液100 ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37 ℃ 60 min，洗滌4～6次；④每孔加酶標(biāo)抗體工作液100 ul，將反應(yīng)板置37 ℃ 30 min，洗滌4～6次；⑤每孔加入底物工作液100 ul，置37 ℃暗處反應(yīng)15 min，每孔加入100 ul終止液混勻；⑥于30 min內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。比較3組受試者的血清TGF-β1含量以及腎功能指標(biāo)。

1.3.2 腎功能檢測(cè)

采集3組患者外周靜脈血5 ml，離心后采用電化學(xué)發(fā)光儀檢測(cè)肌酐和尿素氮水平；測(cè)定菊粉清除率(inulin clearance rate，Cin)來(lái)反應(yīng)腎小球的濾過(guò)功能。

檢測(cè)步驟：早晨給予留置導(dǎo)尿，取10 ml尿液和4 ml靜脈血作為空白對(duì)照；將5 g菊粉溶于150 ml生理鹽水中，15 min內(nèi)靜脈推注完成，然后用含5 g菊粉的生理鹽水400 ml維持滴注，30 min后夾閉導(dǎo)尿管，20 min后取靜脈血4 ml，測(cè)定血液中菊粉含量；排空膀胱，測(cè)定尿量和尿菊粉含量(公式1)：

Cin=尿菊粉含量÷(血漿菊粉含量×稀釋倍數(shù))×尿量(ml/min) (1)

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0軟件對(duì)計(jì)量資料進(jìn)行方差分析、計(jì)數(shù)資料進(jìn)行卡方檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用以TGF-β1為自變量、Ccr為應(yīng)變量的單因素回歸分析。檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組受試者資料比較

(1)對(duì)照組：收縮壓為(142.4±16.2)mm Hg，舒張壓為(92.5±12.4)mm Hg；口服一種降壓藥19例，口服兩種降壓藥20例，口服三種降壓藥11例。

(2)腎功能Ⅰ期組：收縮壓為(144.8±15.9)mm Hg，舒張壓為(93.4±15.9)mm Hg；口服一種降壓藥17例，口服兩種降壓藥21例，口服3種降壓藥12例。

(3)腎功能Ⅱ期組：收縮壓為(145.4±16.0)mm Hg、舒張壓為(93.3±11.2)mm Hg；口服一種降壓藥15例，口服兩種降壓藥22例，口服3種降壓藥13例。

2.2 血液學(xué)指標(biāo)

3組受試者的血肌酐、血尿素氮水平的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.894，F(xiàn)=0.587；P＞0.05)；3組受試者Ccr的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=13.874，P＜0.05)；經(jīng)過(guò)LSD法兩兩比較表明，腎功能Ⅰ期組、Ⅱ期組患者的Cin低于對(duì)照組(見(jiàn)表1)。

2.3 TGF-β1水平

對(duì)照組患者TGF-β1水平為(24.7±4.4)ng/ml、腎功能Ⅰ期組患者TGF-β1水平為(42.8±7.3)ng/ ml、腎功能Ⅱ期組患者TGF-β1水平為(75.5±10.3) ng/ml。經(jīng)方差分析可知，3組受試者內(nèi)生Ccr的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=23.523，P＜0.05)；經(jīng)過(guò)LSD法兩兩比較可知，腎功能Ⅰ期組、Ⅱ期組患者的TGF-β1水平高于對(duì)照組，其差異顯著。

2.4 TGF-β1與Cin的相關(guān)性

以TGF-β1為自變量、Ccr為應(yīng)變量進(jìn)行單因素回歸分析可知，TGF-β1水平與Ccr呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，回歸方程為Y=-1.2716X+144.26，決定系數(shù)r2=0.8344，t=16.984，P＜0.05。

3 討論

高血壓是臨床最常見(jiàn)的慢性疾病，血壓水平異?？蓪?dǎo)致腎臟血流動(dòng)力學(xué)改變，腎臟入球小動(dòng)脈痙攣、管腔狹窄、腎小球灌注不足，進(jìn)而導(dǎo)致腎小球?yàn)V過(guò)功能受損，表現(xiàn)為血肌酐和血尿素氮水平升高[4]。臨床上常用血肌酐和血尿素氮水平作為反應(yīng)腎功能的指標(biāo)，但對(duì)于判斷早期腎功能損害具有較大的局限性。由于腎臟本身具有較強(qiáng)的代償能力，當(dāng)發(fā)生腎小球灌注不足時(shí)，可通過(guò)腎臟入球小動(dòng)脈的收縮和舒張來(lái)調(diào)節(jié)血液灌注，使得腎臟的濾過(guò)功能維持在正常范圍[5]。只有在腎功能損害＞50%時(shí)，血肌酐和血尿素氮水平才會(huì)發(fā)生明顯改變，此時(shí)腎功能衰竭已發(fā)展至Ⅲ期、Ⅳ期，不利于疾病的早期發(fā)現(xiàn)和早期診斷[6]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腎功能Ⅰ期、Ⅱ期患者的血肌酐和血尿素氮水平與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異，表明這兩項(xiàng)指標(biāo)無(wú)法在腎功能損害的早期診斷疾病。

表1 3組受試者血液學(xué)指標(biāo)比較

內(nèi)生Ccr是判斷腎功能情況的金標(biāo)準(zhǔn)，能夠準(zhǔn)確反應(yīng)腎小球率過(guò)濾，臨床上多通過(guò)Cin的測(cè)定來(lái)反應(yīng)內(nèi)生Ccr，但是Cin的測(cè)定需要給予外源性標(biāo)志物，操作步驟繁瑣，患者和家屬多無(wú)法接受，因而不易推廣使用[7-8]。在臨床中，準(zhǔn)確判斷腎小球?yàn)V過(guò)功能、早期發(fā)現(xiàn)腎功能損害有利于針對(duì)高血壓合并腎功能損害給予及時(shí)的治療措施。因此，探尋更為便捷、準(zhǔn)確、靈敏的腎功能檢測(cè)指標(biāo)具有現(xiàn)實(shí)的臨床應(yīng)用價(jià)值[9]。TGF-β1是一類(lèi)具有極為廣泛生物學(xué)作用的多肽類(lèi)細(xì)胞因子，參與體內(nèi)的細(xì)胞增殖、細(xì)胞外基質(zhì)聚積、血管新生以及損傷后修復(fù)等各種病理生理學(xué)過(guò)程，在高血壓患者發(fā)生腎功能損害的各個(gè)階段中，TGF-β1均發(fā)揮了重要作用[10-12]。

國(guó)內(nèi)外學(xué)者近年來(lái)的研究顯示，TGF-β1在腎臟局部的主要作用為：①通過(guò)旁分泌、自分泌的方式作用于腎臟入球小動(dòng)脈，經(jīng)過(guò)一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑促進(jìn)膠原蛋白、纖維蛋白及層粘連蛋白等的合成，進(jìn)而造成腎小球內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)聚集，發(fā)生腎小球硬化和間質(zhì)纖維化；②抑制纖溶系統(tǒng)的活性，進(jìn)而加重細(xì)胞外基質(zhì)聚集的情況，導(dǎo)致腎小球硬化和間質(zhì)纖維化不斷發(fā)展；③募集成纖維細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞，介導(dǎo)入球小動(dòng)脈內(nèi)膜的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致動(dòng)脈痙攣、腎小球灌流量減少[13-14]。

本研究通過(guò)比較3組受試者的血清TGF-β1水平顯示，腎功能Ⅰ期組、Ⅱ期組患者的TGF-β1水平高于對(duì)照組，表明TGF-β1水平在腎功能損害的早期已發(fā)生改變，預(yù)期可作為判斷腎功能情況的理想指標(biāo)。Ccr是反應(yīng)腎功能的金標(biāo)準(zhǔn)，而Cin在檢測(cè)時(shí)的步驟較為繁瑣，因此判斷腎功能的理想指標(biāo)應(yīng)該具有取材方便、檢測(cè)步驟簡(jiǎn)單的特點(diǎn)，并且能夠與Cin存在較好的相關(guān)關(guān)系[15]。通過(guò)單因素回歸的方法分析TGF-β1與Ccr的相關(guān)性可知，TGF-β1水平與Ccr呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，決定系數(shù)達(dá)到了0.8344，表明Ccr的變化有83.44%可以用TGF-β1的變化來(lái)解釋。同時(shí)說(shuō)明血清TGF-β1能夠準(zhǔn)確反應(yīng)腎小球?yàn)V過(guò)情況，在臨床實(shí)踐中，可以通過(guò)血清TGF-β1水平的檢測(cè)來(lái)反應(yīng)腎功能。

綜上所述，當(dāng)腎功能損害Ⅰ期、Ⅱ期時(shí)，TGF-β1水平發(fā)生明顯改變，且與Ccr水平具有良好的相關(guān)性，是反應(yīng)腎功能的理想指標(biāo)。

[1]宋寧,張顯坤,孫艷玲,等.腎功能指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)老年原發(fā)性高血壓患者早期腎損傷的診斷價(jià)值[J].山東醫(yī)藥,2012,52(5):60-61.

[2]陳永立,薛玲,邱忠君,等.血清TGF-β1及β2-MG水平對(duì)妊娠期高血壓疾病早期腎損傷診斷的臨床意義[J].中國(guó)婦幼保健,2012,27(13):1951-1952.

[3]曹丹,郝麗榮.糖尿病腎病與腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的關(guān)系[J].醫(yī)學(xué)綜述,2012,19(9):1386-1388.

[4]劉玉英,王立啟,朱世,等.轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1與高血壓靶器官損害的關(guān)系[J].山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2007,45(5):495-498.

[5]Argano C,Duro G,Corrao S,et al.Transforming growth factor beta1 T29C gene polymorphism and hypertension:relationship with cardiovascular and renal damage[J].Blood Press,2008,17(4):220-226.

[6]Upton PD,Morrell NW.The transforming growth factor-β-bone morphogenetic protein type signalling pathway in pulmonary vascular homeostasis and disease[J].Exp Physiol,2013,98(8):1262-1266.

[7]?ekerci ?A,I?bilen B,I?man F,et al.Urinary NGF,TGF-β1,TIMP-2 and bladder wall thickness predict neurourological findings in children with myelodysplasia[J].J Urol,2014,191(1):199-205.

[8]Lekawanvijit S,Kompa AR,Zhang Y,et al. Myocardial infarction impairs renal function,induces renal interstitial fibrosis,and increases renal KIM-1 expression:implications for cardiorenal syndrome[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol,2012,302(9):1884-1893.

[9]Meng XM,Huang XR,Xiao J,et al.Diverse roles of TGF-βreceptor II in renal fibrosis and inflammation in vivo and in vitro[J].J Pathol, 2012,227(2):175-188.

[10]葉春芳,王曉麗.糖尿病腎病合并高血壓患者TGF-1及RAAS的變化[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2010,20(1): 77-79.

[11]郭愛(ài)軍,肖占森.高血壓病患者血、尿β2微球蛋白、白蛋白濃度變化及其臨床意義[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)刊,2012,14(9)1583,1570.

[12]Ka SM,Yeh YC,Huang XR,et al.Kidneytargeting Smad7 gene transfer inhibits renal TGF-β/MAD homologue(SMAD)and nuclear factor kB(NF-kB)signalling pathways,and improves diabetic nephropathy in mice[J].Diabetol ogia,2012,55(2):509-519.

[13]Martin FL,McKie PM,Cataliotti A,et al. Experimental mild renal insufficiency mediates early cardiac apoptosis, fibrosis,and diastolic dysfunction:a kidney-heart connection[J]. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol, 2012,302(2):292-299.

[14]Ding Y,Choi ME.Regulation of autophagy by TGF-β:emerging role in kidney fibrosis[J]. Semin Nephrol,2014,34(1):62-71.

[15]劉鵬,高利霞,觀美華,等.血清胱抑素C和C-反應(yīng)蛋白對(duì)診斷痛風(fēng)患者早期腎功能損傷的作用[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)刊,2012,14(7):1234-1235.

The levels of TGF-β1 in hypertensive renal function impairment patients and its clinical value analysis

WANG Gong, YUN Hui, ZENG Xue-ping
China Medical Equipment, 2015,12(6):112-115.

Objective: To detect the levels of TGF-β1 in hypertensive renal function impairment patients and its clinical value. Methods: Primary hypertension patients with no target organs damage were enrolled in control group, primary hypertension patients with renal function stageⅠand stage Ⅱ were enrolled in renal function stage Ⅰ group and stage Ⅱ group. Serum TGF-β 1 levels and renal function indices of three groups were compared. Results: There were no significant difference of serum creatinine and blood urea nitrogen of three groups(F=23.523, P＜0.05); endogenous creatinine clearance rate of renal functionⅠand Ⅱgroups were lower than that of control group, TGF-β1 levels of renal functionⅠandⅡ groups were higher than of control group; TGF-β1 levels were negatively correlated with creatinine clearance rate. Conclusion: TGF-β 1 level is an ideal index to reflect renal function for its level significantly changes in renal damage stageⅠ, Ⅱ and has good correlation with Cin.

Hypertension; Renal function impairment; Transforming growth factor-β1; Endogenous creatinine clearance rate

王恭,男,(1968- ),本科學(xué)歷，主治醫(yī)師。解放軍第187醫(yī)院門(mén)診部，從事心血管內(nèi)科工作。

1672-8270(2015)06-0112-04

R544.14

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.06.034

2014-12-10

①解放軍第187醫(yī)院門(mén)診部 海南 ?？?571159

②解放軍第187醫(yī)院輸血科 海南 海口 571159