地鱉蟲的化學成分和藥理活性研究進展

羅情??巫秀美??郭娜娜??羅建蓉??肖懷

[摘要] 昆蟲藥一直是我國特色的醫(yī)藥資源，地鱉蟲作為一種傳統(tǒng)的中藥材，具有多種功效并被廣泛應用于中藥處方中。現(xiàn)代藥理學的研究表明地鱉蟲對心腦血管系統(tǒng)有保健作用，能降脂調(diào)脂、抗凝血、抗血栓等，具有抗腫瘤和抗氧化作用，還具有促進骨折愈合、鎮(zhèn)痛、增強人體免疫等功效。本研究就地鱉蟲的化學成分和藥理活性研究作一簡單的概述，為地鱉蟲的深入研究和應用提供依據(jù)和參考。

[關(guān)鍵詞] 地鱉蟲；化學成分；藥理活性；進展

[中圖分類號] R284 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2015）17-41-04

Research progress of chemical constituents and pharmacological activities in eupolyphaga sinensis walker

LUO Qing WU Xiumei GUO Nana LUO Jianrong XIAO Huai

School of Pharmacy and Chemistry， Dali College， Dali 671000， China

[Abstract] Insecta drug has always been characteristic medical resources of our country. Eupolyphaga sinensis walker which has various efficacy has been widely used in chinese herbs prescription as a kind of traditional chinese medicinal materials. The study of modern pharmacology showed that， eupolyphaga sinensis walker has the health function on cardio-cerebrovascular system， could depress and regulate lipid， resist coagulation and thrombus and so on， has the function of antitumor and antioxidation， has the efficacy of promoting fracture healing， analgesia， and enhancing human immune function and so on. This paper had simply summarized the chemical constituents and pharmacological activities to provide basis and references on further study and application on eupolyphaga sinensis walker.

[Key words] Eupolyphaga sinensis walker； Chemical constituents； Pharmacological activities； Progress

地鱉蟲（Eupolyphage sinensis Walker）是一種重要的藥用昆蟲。原名蟄蟲，又稱土鱉蟲、土元、簸箕蟲、地烏龜?shù)?，屬?jié)肢動物門昆蟲綱蜚蠊目鱉蠊科昆蟲，是《中華人民共和國藥典》記載的正品藥材，傳統(tǒng)的活血化瘀類動物藥。地鱉蟲常用于入藥的有中華真地鱉（Eupolyphaga sinensis Walker）、冀地鱉（Polyphaga plancyi Boliver）和金邊土鱉（Opisthoplatia orientalis Burmeister），雌蟲可以全蟲入藥。古醫(yī)著作記載其性寒、味咸，具有破血逐瘀、接骨續(xù)筋、消腫散結(jié)、補骨止血、下乳通經(jīng)等功效[1-2]。而現(xiàn)代醫(yī)藥研究又發(fā)現(xiàn)地鱉蟲具有廣泛的藥理作用，能抑制腫瘤的生長，能溶解血栓、抗凝血、降血脂、抗氧化、抗突變等，對肝硬化、脈管炎、腦損傷等疾病都有康復和保健作用[3-4]。本研究就地鱉蟲的化學成分及藥理作用做一簡單的綜述，為地鱉蟲的研究及開發(fā)提供依據(jù)。

1 化學成分

對地鱉蟲的化學成分研究已有較多的報道，主要成分有氨基酸、蛋白質(zhì)、揮發(fā)油，還包括生物堿、

脂肪酸、纖溶活性成分、脂溶性成分及一些微量元素等其他成分。

1.1 氨基酸與蛋白質(zhì)

周彥鋼等[5]對地鱉蟲的營養(yǎng)成分分析中發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)含量非常高，其體內(nèi)的蛋白質(zhì)含量高達60%以上（干重），是名副其實的高蛋白昆蟲。其游離和水解氨基酸包含了構(gòu)成蛋白質(zhì)的18種主要氨基酸，該類成分在活血化瘀治療中起到了一定的作用。韓雅莉等[6]采用硫酸銨分段鹽析的方法從雌性地鱉蟲活體內(nèi)分離純化得到三種纖溶活性成分EFF-1、2和3，經(jīng)纖維蛋白平板法檢測，發(fā)現(xiàn)EFF-1具有纖溶酶激酶活性，EFF-2和EFF-3兼有纖溶激酶活性和纖溶酶活性作用。王淑敏等[7]從地鱉蟲的水浸醇沉提取物中分離提純得到了一類纖維蛋白水解酶，發(fā)現(xiàn)其具有直接降解纖維蛋白的作用，也有纖溶酶原激活劑的功效。

1.2 揮發(fā)油

傅桂香等[8]通過用毛細管氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)鑒定了地鱉蟲揮發(fā)油中的20個組分，包括樟腦、萘、醋酸乙酯、2-乙基環(huán)丁醇、二氯苯、2，5-二甲基吡嗪和2，3，5，6四甲基吡嗪兩個生物堿成分及芳香醛和脂肪醛。田軍鵬[9]用GC/MS分析鑒定了地鱉蟲中的多種生物堿，其中包括1個甾醇類生物堿，3個氨基酸衍生物類生物堿，2個哌啶類生物堿和8個其他類生物堿。劉建國等[10]用同樣方法對三種地鱉蟲的揮發(fā)油成分進行了比較分析，共鑒定了35種化合物，其中乙酸乙酯、十七烷、十六酸、2，6-二特丁基-4-甲基酚和萘等為三種地鱉蟲所共有的化學成分。盧穎等[11]通過提取分離從地鱉蟲正己烷及正丁醇萃取物中分離得到5個化合物，分別為二十八烷醇、β-谷甾醇、十八烷基甘油醚（鯊肝醇）、尿嘧啶、尿囊素。

1.3 脂溶性成分與脂肪酸

金向群等[12]從地鱉蟲石油醚部分分離得到3個脂溶性成分，鑒定為膽甾醇、棕櫚酸、5，4'-二羥基-7-甲氧基黃銅。李永超等[13]對金邊地鱉營養(yǎng)成分進行了分析測定，鑒定了其中的多個脂肪酸，包括棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸、花生烯酸、豆蔻酸、花生酸等，其中油酸含量最高，而不飽和脂肪酸占脂肪酸總量的75%。

1.4 維生素與礦物元素

有報道[5]從地鱉蟲中測得脂溶性維生素A、D、K、E，其中維生素E的含量較高，達到12.5mg/100g，而維生素E對人體具有抗氧化作用，維生素K和體內(nèi)凝血機制有關(guān)；另有學者[13]從地鱉蟲中測得各種礦物元素Ca、P、Mg、P、Na及人體必需的微量元素Fe、Cu、Mn、Zn、Se，其中血紅蛋白所含的Fe元素對人體有益，谷胱甘肽過氧化酶中的元素Se，可以防癌癥，還能防止不飽和脂肪酸的氧化，并抑制可能成為致癌過氧化物和游離基的形成。而Mn和Mg元素含量也較高，且與抗癌、抑癌作用有關(guān)。

2 藥理活性及應用

地鱉蟲的藥理作用在我國早期醫(yī)學古籍中就有記載，現(xiàn)代藥理學的研究表明地鱉蟲對心腦血管系統(tǒng)有保健作用，能降脂調(diào)脂、抗凝血、抗血栓等；還具有促進骨折愈合，增強人體免疫等功效；近年來，其在抗氧化和抗腫瘤方面的作用受到眾多學者的關(guān)注和研究。

2.1 對心腦血管系統(tǒng)的作用

有報道[14-15]顯示地鱉蟲總生物堿可直接擴張血管，還能延長小鼠心電消失時間。其水提物可使家兔耐缺氧功能明顯增強，地鱉蟲對心、腦血管有保護作用并能提高心腦對缺血的耐受力。以上結(jié)果為預防及治療心腦血管疾病的藥物開發(fā)和研究提供了理論依據(jù)，也表現(xiàn)出了良好的應用前景。趙志壯[16]通過自然飼喂高脂飼料的方法建立高脂血癥家兔模型，證實地鱉蟲的凍干粉具有調(diào)節(jié)家兔高脂血癥的功效，其機制可能是調(diào)節(jié)肝臟中ApoE基因和LDL-R的基因表達。黃鎮(zhèn)林等[17]給大鼠皮下注射腎上腺素造成急性血瘀癥，對其灌胃給藥地鱉蟲抗凝組分F2-2，結(jié)果顯示地鱉蟲抗凝組分F2-2具有良好的體內(nèi)抗凝療效。馮光軍等[18]通過比較地鱉蟲不同提取物的抗凝血活性，發(fā)現(xiàn)地鱉蟲乙酸乙酯提取部分抗凝作用最強，這種抗凝機制可能與直接抑制凝血酶原催化纖維蛋白原凝固的作用有關(guān)。

2.2 抗氧化抗衰老作用

張璐等[19]通過正交試驗測定地鱉蟲酶解液的體外抗氧化活性，實驗表明，地鱉蟲的酶解液具有很好的清除自由基以及抑制亞油酸自氧化反應的能力，其對·OH、O2- ·、DPPH三種自由基的最高清除率分別為75.15%、31.72%、74.88%；當肽含量為2.0mg時，對亞油酸的自氧化反應抑制率為95%。王懋存等[20]從中華真地鱉酶解物中分離得到3個抗氧化肽組分FⅠ、FⅡ、FⅢ 。其中FⅡ組分對以上三種自由基的清除能力最強。樸美子等[21]通過頸背部皮下注射D-半乳糖致衰老模型小鼠，將中華真地鱉酶解短肽灌胃給藥，研究其體內(nèi)抗氧化活性，結(jié)果顯示，中華真地鱉酶解短肽對三種自由基的清除作用比較強。其抗氧化作用機制可能是中華真地鱉酶解短肽在小鼠體內(nèi)能夠阻止脂質(zhì)過氧化反應，減少MDA（丙二醛）的生成，并且在其代謝的過程中激活內(nèi)源性的抗氧化酶類，從而清除體內(nèi)的自由基。

谷崇高等[22]通過給小鼠腹腔連續(xù)注射D-半乳糖20d，建立衰老模型，同時每日給小鼠灌服不同劑量的地鱉多肽提取物探討其抗氧化抗衰老機制，實驗結(jié)果表明地鱉多肽可能是通過啟動Nrf2-ARE抗氧化信號通路，提高了D-半乳糖致衰老小鼠抗應激和抗氧化的能力，從而延緩了小鼠的氧化衰老。有研究[23]通過比較地鱉蟲的不同提取物的體外抗氧化活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)地鱉多肽、多糖和水提物都能有效的清除3種自由基，抑制紅細胞溶血和肝臟線粒體腫脹，保護肝腎組織氧化損傷，具有一定程度體外抗氧化活性。

2.3 抗腫瘤作用

鄒璽等[24-25]采用四氮唑鹽法（MTT法）測定地鱉蟲水提物和醇提物對人胃低分化腺癌BGC-823細胞的生長抑制活性，其醇提物對BGC-823具有顯著的細胞毒活性并有較好的劑量依賴關(guān)系和時間依賴性。將其細胞毒活性部位制備成脂肪乳劑，觀察對S180荷瘤小鼠移植瘤生長的影響情況，試驗發(fā)現(xiàn)地鱉蟲的脂肪乳劑各劑量組均具有抑制腫瘤生長的作用，并呈劑量相關(guān)性。張微等[26]用地鱉蟲乳劑給SD大鼠灌胃，采用MTT法檢測含藥血清對肝癌細胞HepG-2細胞增殖的抑制作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)地鱉蟲的含藥血清可以明顯抑制肝癌HepG-2細胞的體外增殖，且抑制率呈濃度依賴關(guān)系。曹付春[27]構(gòu)建荷瘤小鼠模型，用小鼠制備EFP含藥血清，采用MTT法檢測EFP含藥血清對細胞體外增殖的抑制作用，用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測小鼠血清中的血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）和堿性成纖維生長因子（bFGF）的含量。結(jié)果顯示EFP的含藥血清對人臍靜脈內(nèi)皮細胞HUVEC、肺癌細胞A549和乳腺癌細胞MCF-7均有顯著的生長抑制作用，即對其VEGF和bFGF的表達有抑制作用。林澤飛等[28]通過制備不同濃度的EFP小鼠含藥血清，研究其含藥血清對人肺癌A549細胞凋亡的影響及凋亡相關(guān)基因的表達。結(jié)果顯示，EFP含藥血清各組能使A549細胞發(fā)生細胞凋亡，細胞周期發(fā)生改變，EFP對A549細胞有明顯的生長抑制作用。

王鳳霞[29]從中華真地鱉新鮮的雌蟲體中分離純化得到一分子質(zhì)量約為72kDa的抗腫瘤蛋白，并命名為EPS72，發(fā)現(xiàn)該蛋白對人肝癌細胞株Bel-7402、肺癌細胞株A549等多種人癌細胞株的增殖有較強的抑制作用。并初步探討了EPS72體外抗腫瘤轉(zhuǎn)移的機制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)EPS72能夠影響肌動蛋白細胞骨架成分F-actin的聚合，直接影響β1-整合素的表達，推測其可能是通過直接靶向腫瘤細胞表面的β1-整合素，進而影響整合素一細胞骨架信號通路發(fā)揮體外抗腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。

2.4 免疫調(diào)節(jié)作用

唐慶峰[30]通過研究中華真地鱉的免疫調(diào)節(jié)作用，給小鼠灌胃地鱉蟲水煎萃取物，觀察小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用，結(jié)果表明地鱉蟲的水煎萃取物能提高機體的免疫功能。

2.5 促進骨折愈合

高躍川等[31]通過地鱉蟲內(nèi)服聯(lián)合脛骨交鎖髓內(nèi)釘手術(shù)治療脛骨中下段骨折，發(fā)現(xiàn)地鱉蟲在其手術(shù)治療脛骨中下段骨折中，骨折愈合快，副作用小，骨折延遲愈合或者不愈合發(fā)生率低，臨床療效顯著。

2.6 鎮(zhèn)痛作用

汪梅嬌等[32]通過比較蟲類藥蜈蚣、地龍、地鱉蟲的水提物的鎮(zhèn)痛作用，采用熱板法和扭體法實驗比較，發(fā)現(xiàn)在熱板法疼痛試驗中地龍的鎮(zhèn)痛作用強于地鱉蟲，但在醋酸致小鼠扭體反應實驗中的結(jié)果相反，地鱉蟲的鎮(zhèn)痛作用強于地龍，說明地鱉蟲在短效鎮(zhèn)痛效果中療效較好。

近年來，將昆蟲作為食品、保健食品也越來越受到人們的青睞。地鱉蟲中含有大量的營養(yǎng)成分，在營養(yǎng)食品、保健品市場也被廣泛應用。有用地鱉蟲，再輔以蛹蟲草、人參、枸杞、桂圓等中藥材研制成的高蛋白、低脂肪型滋補地鱉蟲保健酒，起到強身健體的保健作用[33]。

3 前景與展望

隨著人們生活水平的不斷提高，對強身健體的需求越發(fā)迫切，而昆蟲的藥用價值也逐漸得到重視，在疾病的預防和治療中得到廣泛應用。現(xiàn)今腫瘤的高發(fā)、低齡化及多樣化已成為全人類面臨的最大健康威脅。多項科學研究證明地鱉蟲有著廣泛的藥理作用和良好的臨床療效，特別是在抗腫瘤和抗氧化方面取得了很好的進展，在臨床上含地鱉蟲的復方制劑應用于多項病癥，作為一種傳統(tǒng)的中藥材，毫無疑問有著良好的開發(fā)利用前景。

近年來，地鱉蟲的研究工作雖取得了較大進展，但還有一些亟待解決的問題需深入探討和研究。地鱉蟲抗腫瘤、抑制心腦血管疾病等方面的作用機制尚未非常明確。地鱉蟲的有效生物活性成分及結(jié)構(gòu)研究也需得到更為深入的分析和鑒定。因此，地鱉蟲的藥理作用機制和體內(nèi)活性成分的研究是深入開發(fā)應用該昆蟲藥物的前提和基礎。

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（收稿日期：2015-04-17）