2015長(zhǎng)沙市參加省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析

劉增再，寧華杰，陳 智，鄭姣妹，唐愛(ài)明

（湖南省長(zhǎng)沙市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南長(zhǎng)沙410013）

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室主要承擔(dān)動(dòng)物疫病診斷和檢測(cè)、動(dòng)物疫情和免疫狀況監(jiān)測(cè)、動(dòng)物疫病防控科學(xué)研究等工作，是各級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)運(yùn)轉(zhuǎn)的根基，也是提供動(dòng)物疫病防控技術(shù)支撐的保障[1]。開(kāi)展獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)，是評(píng)價(jià)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)水平的重要手段，也是加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的有效方法[2]。為進(jìn)一步加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理，提高獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)水平，按照湖南省有關(guān)加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理工作的文件要求，自2011年起長(zhǎng)沙市已連續(xù)五年參加湖南省畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局組織的獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)活動(dòng)，對(duì)提升市縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)能力和充分發(fā)揮獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室功能起到了積極作用。

1 比對(duì)范圍

1個(gè)市級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室（長(zhǎng)沙市），2個(gè)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室（長(zhǎng)沙縣、瀏陽(yáng)市）。

2 比對(duì)方法

2.1比對(duì)項(xiàng)目設(shè)置

市級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室參加口蹄疫病毒、豬2型圓環(huán)病毒、豬O型口蹄疫抗體和布魯氏菌病抗體等四個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目；縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室參加豬O型口蹄疫抗體、H5亞型禽流感抗體、布魯氏菌病抗體等三個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，瀏陽(yáng)市還參加了口蹄疫病毒檢測(cè)項(xiàng)目。

2.2比對(duì)檢測(cè)方法

針對(duì)設(shè)置的比對(duì)項(xiàng)目，統(tǒng)一采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)家參考實(shí)驗(yàn)室推薦的方法，見(jiàn)表1。

表1 比對(duì)項(xiàng)目的檢測(cè)方法和標(biāo)準(zhǔn)

2.3比對(duì)樣品的制備與發(fā)放

樣品制備：由湖南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室完成相應(yīng)比對(duì)樣品的制備、標(biāo)定、分裝，并將對(duì)比對(duì)樣品統(tǒng)一編號(hào)后，作為盲樣下發(fā)使用。

樣品和試劑發(fā)放：各市縣實(shí)驗(yàn)室派出專人，在指定時(shí)間內(nèi)持有效證件到湖南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)取比對(duì)樣品和試劑，并在12 h內(nèi)送達(dá)參加比對(duì)的實(shí)驗(yàn)室。

2.4結(jié)果評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

H5亞型禽流感抗體、豬O型口蹄疫抗體、布魯氏菌病試管凝集抗體檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：檢測(cè)值與參考值完全吻合，判為結(jié)果精確；檢測(cè)值與參考值上、下浮動(dòng)1個(gè)滴度，判為結(jié)果準(zhǔn)確?？谔阋卟《緳z測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：樣品的檢測(cè)結(jié)果閾值與參考值±3，判為結(jié)果符合。豬2型圓環(huán)病毒檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陽(yáng)性”；陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。布魯氏菌病平板凝集抗體檢測(cè)：強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陽(yáng)性”；陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.5比對(duì)結(jié)果的遞交

市縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在收到樣品之日起3d內(nèi)完成檢測(cè)，并將檢測(cè)結(jié)果填寫在固定的表格中，傳真至湖南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室。同時(shí)，各參與實(shí)驗(yàn)室出具正式的檢驗(yàn)報(bào)告書通過(guò)快遞郵寄或直接送達(dá)。

3 結(jié)果分析

3.1總體結(jié)果

根據(jù)比對(duì)結(jié)果評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，長(zhǎng)沙市3個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室所有比對(duì)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果全部符合。

3.2比對(duì)項(xiàng)目分項(xiàng)分析

口蹄疫病毒檢測(cè)項(xiàng)目：長(zhǎng)沙市和瀏陽(yáng)市參加了該項(xiàng)目比對(duì)，檢測(cè)樣品總計(jì)10份，結(jié)果正確樣品10份，總正確率100%。

豬2型圓環(huán)病毒檢測(cè)項(xiàng)目：長(zhǎng)沙市參加了該項(xiàng)目比對(duì)，檢測(cè)樣品總計(jì)5份，結(jié)果正確樣品5份，總正確率100%。

豬O型口蹄疫抗體檢測(cè)項(xiàng)目：長(zhǎng)沙市、長(zhǎng)沙縣和瀏陽(yáng)市參加了該比對(duì)項(xiàng)目，檢測(cè)樣品共計(jì)18份，結(jié)果精確樣品18份，結(jié)果正確樣品18份，總精確率和正確率均為100%。

H5亞型禽流感抗體檢測(cè)項(xiàng)目：長(zhǎng)沙縣和瀏陽(yáng)市參加了該比對(duì)項(xiàng)目，檢測(cè)樣品共計(jì)10份，結(jié)果精確樣品9份，結(jié)果正確樣品10份，總精確率為90.0%，總正確率為100%。

布魯氏菌病抗體檢測(cè)項(xiàng)目：長(zhǎng)沙市參加了布病試管凝集抗體比對(duì)項(xiàng)目，檢測(cè)樣品共計(jì)5份，結(jié)果精確樣品3份，結(jié)果正確樣品5份，總精確率為60.0%，總正確率為100%。長(zhǎng)沙縣和瀏陽(yáng)市參加了布病平板凝集抗體比對(duì)項(xiàng)目，檢測(cè)樣品共計(jì)10份，結(jié)果正確樣品10份，總正確率100%。

4 討論

4.1近年來(lái)，長(zhǎng)沙市各級(jí)政府高度重視獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室軟硬件實(shí)力得到明顯提升，4個(gè)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室均建立了分子生物學(xué)檢測(cè)平臺(tái)；全市5個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室全部通過(guò)了農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室考核，瀏陽(yáng)市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室還通過(guò)了湖南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局的計(jì)量認(rèn)證。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作，是湖南省加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理的一項(xiàng)重要舉措，也是實(shí)驗(yàn)室自身的一項(xiàng)重要質(zhì)量控制活動(dòng)。2015年組織的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作緊密圍繞《湖南省2015年動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)計(jì)劃》和《湖南省中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2013-2020）》提出的優(yōu)先防治16種動(dòng)物疫病開(kāi)展。

4.2血清學(xué)檢測(cè)和病原學(xué)檢測(cè)是獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室的基礎(chǔ)檢測(cè)方法，本次比對(duì)的試驗(yàn)項(xiàng)目包含了血凝抑制試驗(yàn)、凝集試驗(yàn)、ELISA、PCR、熒光定量PCR等多種常用方法[3]；檢測(cè)的疫病類別也涵蓋了當(dāng)前重點(diǎn)防控的幾個(gè)重大動(dòng)物疫病，因此比對(duì)結(jié)果能客觀地反映實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力和技術(shù)水平。

4.3本次比對(duì)項(xiàng)目中結(jié)果準(zhǔn)確率高的主要是分子生物學(xué)和ELISA檢測(cè)項(xiàng)目，說(shuō)明我市各級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室分子生物學(xué)試驗(yàn)和液相阻斷ELISA試驗(yàn)操作的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性得到了一定的提升。近年來(lái)，我市加大了對(duì)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)人員培訓(xùn)力度，縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室基本具備了分子生物學(xué)檢測(cè)能力。

4.4本次比對(duì)項(xiàng)目中結(jié)果出現(xiàn)偏差的主要是布病試管凝集抗體項(xiàng)目和H5亞型禽流感抗體項(xiàng)目。用試管凝集試驗(yàn)檢測(cè)牛布魯氏菌病抗體，說(shuō)明定量或半定量的血清學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目，其難度和要求大于定性的分子生物學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目；也說(shuō)明我市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在半定量的試管凝集檢測(cè)技術(shù)方面還不夠穩(wěn)定，存在薄弱環(huán)節(jié)。縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在血凝和血凝抑制試驗(yàn)在試驗(yàn)的穩(wěn)定性、操作的規(guī)范性和試驗(yàn)過(guò)程中隨意性都存在一些薄弱環(huán)節(jié)。

檢測(cè)能力是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生存之基，更是各級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)發(fā)揮技術(shù)支撐作用的核心所在，其所出具的檢測(cè)數(shù)據(jù)將作為政府部門防控動(dòng)物疫病提供決策的依據(jù)。因此，各級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)都應(yīng)加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理，嚴(yán)格控制檢測(cè)質(zhì)量，確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)科學(xué)規(guī)范，檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。

[1]劉增再,王輝.長(zhǎng)沙市整合資源建設(shè)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2014,31(10)：19-21.

[2]王文,張繼紅,蘭玲,等.2010年新疆獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)試驗(yàn)的探討與建議[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2011,28(9)：19-21.

[3]董昕,欣劉偉,邴國(guó)霞,等.2014年全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2014,50(10)：101-103.