丹參、黃芪注射液對(duì)自體脂肪移植存活率的影響

李鵬飛 鄭丹寧 周 佳 王 健 張波朱 昌余力

丹參、黃芪注射液對(duì)自體脂肪移植存活率的影響

李鵬飛 鄭丹寧 周 佳 王 健 張波朱 昌余力

目的觀(guān)察中藥丹參、黃芪注射液對(duì)自體脂肪移植成活率的影響，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)及臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法建立新西蘭白兔自體脂肪移植動(dòng)物模型，實(shí)驗(yàn)組分別予以腹腔注射丹參、黃芪注射液，于不同時(shí)間點(diǎn)采血、取材，測(cè)定血清VEGF表達(dá)水平和脂肪存活率，HE染色觀(guān)察組織細(xì)胞形態(tài)，血小板-內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子CD31、周脂素免疫組化染色觀(guān)察毛細(xì)血管密度及細(xì)胞活性。結(jié)果自體脂肪移植術(shù)后第12周，實(shí)驗(yàn)組脂肪存活率顯著高于對(duì)照組；各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組血清VEGF表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組；HE、CD31、周脂素染色示，實(shí)驗(yàn)組在細(xì)胞形態(tài)、新生毛細(xì)血管密度及細(xì)胞活性方面均明顯優(yōu)于對(duì)照組。結(jié)論配合應(yīng)用丹參、黃芪注射液，能夠顯著提高新西蘭白兔自體脂肪移植的存活率。

丹參注射液黃芪注射液自體脂肪移植存活率

自體脂肪具有取材簡(jiǎn)便、來(lái)源豐富、充盈外觀(guān)好、組織相容性好等優(yōu)點(diǎn)[1-5]，臨床上被用于修復(fù)因軟組織缺損引起的各種先天性和后天性畸形。然而自體脂肪移植頗高的吸收率卻使得其臨床應(yīng)用受到限制。研究表明，提高自體脂肪移植細(xì)胞的存活能力，早期重建移植組織的血供，對(duì)于自體脂肪移植的存活具有重要意義[6]。

丹參又名赤參，是最常用的活血化瘀中藥之一，具有活血調(diào)經(jīng)、祛瘀止痛、涼血消癰、清心除煩、養(yǎng)血安神之功效[7]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，丹參常用于治療心血管系統(tǒng)疾病，具有改善微循環(huán)、促進(jìn)血管新生、抗腫瘤、抗肝纖維化、預(yù)防應(yīng)激性潰瘍、調(diào)節(jié)免疫、抗菌消炎等作用[8-11]。黃芪是最常用的益氣中藥之一，具有補(bǔ)氣升陽(yáng)、益衛(wèi)固表、托毒生肌、利水消腫的功效[12]?，F(xiàn)代藥理學(xué)認(rèn)為，黃芪對(duì)心血管、循環(huán)、物質(zhì)代謝、肝腎功能及腫瘤等均可發(fā)揮良好的治療作用[13-14]。黃芪具有顯著的抗氧化活性，能夠抑制自由基的產(chǎn)生，并且能夠有效清除機(jī)體內(nèi)過(guò)剩的自由基，使得細(xì)胞減輕或免受自由基產(chǎn)生的過(guò)度氧化作用，保護(hù)線(xiàn)粒體的結(jié)構(gòu)和功能，從而起到保護(hù)細(xì)胞、延長(zhǎng)細(xì)胞壽命的作用[15]。本實(shí)驗(yàn)建立新西蘭白兔自體脂肪移植動(dòng)物模型，觀(guān)察比較丹參、黃芪注射液對(duì)自體脂肪移植中對(duì)細(xì)胞保護(hù)、血運(yùn)重建、毛細(xì)血管新生及成活率的影響，為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑、材料

丹參注射液、黃芪注射液（正大青春寶）；ELISA試劑盒（R&D公司，美國(guó)）；鼠單克隆抗CD31因子抗體（Abcam公司，英國(guó)）；鼠抗免疫組化試劑盒（欣博盛公司）；羊抗人多克隆抗周脂素抗體（Bio-Sciences公司，英國(guó)）；生物素標(biāo)記兔抗山羊IgG（武漢博士德生物工程有限公司）；堿性磷酸酶（Sigma-Aldrich公司，美國(guó)）；BCIP/NBT顯色試劑盒（武漢博士德生物工程有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

健康新西蘭白兔12只（我院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供），雌雄不限，體質(zhì)量2.7±0.3 K g。隨機(jī)分成3組：對(duì)照組4只，行自體脂肪移植術(shù)+腹腔注射生理鹽水；實(shí)驗(yàn)組1（丹參組）4只，行自體脂肪移植術(shù)+腹腔注射丹參注射液2.5 g/K g·d；實(shí)驗(yàn)組2（黃芪組）4只，行自體脂肪移植術(shù)+腹腔注射黃芪注射液2.5 g/Kg·d。術(shù)前1周至術(shù)后3周用藥，持續(xù)4周。

1.2.2 自體脂肪移植動(dòng)物模型

圖1術(shù)中暴露新西蘭白兔肩胛區(qū)脂肪組織并游離Fig.1 The adipose tissue was exposed and dissociated in the New Zealand white rabbit's scapular area

圖2 將移植脂肪組織注射入兔耳背部皮下Fig.2 Autologous adipose tissue was injected into the dorsum of the ears subcutaneously

動(dòng)物術(shù)前禁食12 h。全麻后，備皮，俯臥位固定于清潔手術(shù)臺(tái)上，背部肩胛區(qū)正中線(xiàn)距頸部約5 cm處作5 cm長(zhǎng)切口，垂直切開(kāi)皮膚及皮下組織，顯露附著于背闊肌筋膜淺層的脂肪墊（圖1），取出脂肪組織約4～5 m L。轉(zhuǎn)移到PBS溶液中，沖洗，剪碎，獲得直徑約1～2 mm的脂肪顆粒。消毒耳背部皮膚，將脂肪顆粒置入2 m L注射器，以12號(hào)注射針頭分別注入雙耳背部皮下4個(gè)部位，每次0.6～0.7 m L（圖2）。

1.2.3 標(biāo)本采集與檢測(cè)

分別于術(shù)中、術(shù)后1、2、4、6、8周在兔后腿外側(cè)表淺靜脈取血，每只取血1～2 m L，取上層血清，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)VEGF表達(dá)水平。術(shù)后第2、4、12周取材，于移植體周邊切開(kāi)皮膚，沿被膜仔細(xì)分離，完整取下脂肪移植體，分離修去周?chē)M織及包膜，精密稱(chēng)重，與術(shù)前記錄對(duì)比計(jì)算存活率。4%多聚甲醛固定標(biāo)本24 h，石蠟包埋切片，行HE染色及血小板-內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子CD31、周脂素免疫組化染色。HE染色后，以囊和空泡、纖維化、結(jié)締組織以及淋巴和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的炎癥反應(yīng)等作為指標(biāo)，按嚴(yán)重程度將組織形態(tài)劃分為0到5級(jí)：0級(jí)，重度彌漫性分布；1級(jí)，中到重度彌漫；2級(jí)，中度分布；3級(jí)，輕到中度分布；4級(jí)，偶然出現(xiàn)；5級(jí)，無(wú)出現(xiàn)[16]。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS13.0軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)或單因素方差分析，存活率比較采用卡方檢驗(yàn)，等級(jí)資料采用Kruskal Wallis檢驗(yàn)。P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 自體脂肪移植組織大體觀(guān)察

移植術(shù)后取材，存活良好的移植體表現(xiàn)為質(zhì)地柔軟、邊界清晰、活動(dòng)度好的組織團(tuán)塊，呈暗黃色，外部被一層纖維組織包膜所包裹，界線(xiàn)較明顯（圖3）。

2.2 存活率的比較

移植術(shù)后第2、4周，對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組存活率無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；術(shù)后第12周，各實(shí)驗(yàn)組存活率均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）；實(shí)驗(yàn)組間未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。丹參組存活率最高，黃芪組次之，對(duì)照組最低（圖4）。

圖3 脂肪組織移植體體積對(duì)比（左起：對(duì)照組、黃芪組、丹參組）Fig.3 The volume com parison among representative grafts in different groups.The sequence from the left:control group, astragalus propinquus group and salvia m iltiorrhiza group

圖4 移植術(shù)后各組脂肪移植體存活率比較Fig.4 The survival rates of grafts of three groups after transplantation

2.3 血清VEGF的表達(dá)水平

實(shí)驗(yàn)組VEGF表達(dá)水平在移植術(shù)的當(dāng)天及術(shù)后1、2、4、6、8周與對(duì)照組比較均有明顯增高（P＜0.05）；黃芪組在各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)水平較丹參組稍高，但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（圖5）。

圖5 各組血清VEGF表達(dá)水平比較Fig.5 The expression levels of VEGF in serum in each group

2.4 組織學(xué)觀(guān)察

圖6 術(shù)后第2、4、12周，各組HE染色觀(guān)察（200×）Fig.6 Histological observation by HE staining 2,4,12 weeks after transplantation(200×)

HE染色顯示，丹參組的脂肪細(xì)胞存活最好，形態(tài)上較完整，脂滴大小一致，血液供應(yīng)較充裕；黃芪組的存活情況尚好，細(xì)胞的完整度稍差，有更多的結(jié)締組織隔膜和炎性浸潤(rùn)，卻有更豐富的新生血管；對(duì)照組存活情況最差，有很多大而不規(guī)則的空泡及較嚴(yán)重的組織纖維化（圖6）。

2.5 血小板-內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子CD31免疫組化染色

對(duì)照組脂肪組織中血運(yùn)不豐富，新生血管不明顯。實(shí)驗(yàn)組移植體組織中血管較豐富，又以周邊區(qū)域更多。實(shí)驗(yàn)組中又以黃芪組新生血管數(shù)量更多，較多分布于細(xì)胞間的結(jié)締組織內(nèi)；丹參組新生血管數(shù)量較少，散在分布于細(xì)胞周邊島狀結(jié)締組織中（圖7）。

圖7 各組CD31免疫組化染色（200×）Fig.7 The expression of platelet endothelial cell adhesion molecule-1(CD31)in each group by immune-histochem istry (200×)

2.6 周脂素免疫組化染色

對(duì)照組移植體組織中染成晶藍(lán)色的脂肪細(xì)胞少，多位于移植體的邊緣，表明脂肪細(xì)胞活性較差；實(shí)驗(yàn)組有活性的脂肪細(xì)胞相對(duì)多，又以丹參組更多。丹參組有活性的脂肪細(xì)胞較多，脂肪細(xì)胞邊緣染成完整的晶藍(lán)色，存活較好；黃芪組有部分活性脂肪細(xì)胞，呈淺藍(lán)色，細(xì)胞活性相對(duì)較差（圖8）。

圖8 各組周脂素免疫組化染色（200×）Fig.8 The expression of perilipin in each group by immune-histochemistry(200×)

3 討論

自體脂肪移植已廣泛應(yīng)用于以美容和重建為目的軟組織充填中[17]。但移植后較高的吸收率導(dǎo)致治療效果存在不確定性，成為自體脂肪移植進(jìn)一步發(fā)展的障礙，也是近年來(lái)研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)[18-19]。

促進(jìn)脂肪細(xì)胞增殖分化、加快移植組織的血供重建是提高存活率的關(guān)鍵因素。隨著分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展，在各種因子應(yīng)用于提高脂肪移植存活率的研究中，除VEGF外，尚有諸如b-FGF、前列腺素E1、瘦素（Leptin）、EGF、富血小板血漿（Platelet-Rich Plasma，PRP）、ANG-1、PDGF等，均可不同程度地促進(jìn)移植脂肪組織的存活[20-26]。然而，這些因子大多價(jià)格昂貴，半衰期短，臨床效果個(gè)體差異較大。盡管目前已有相當(dāng)數(shù)量的基礎(chǔ)和臨床研究初步驗(yàn)證了應(yīng)用生長(zhǎng)因子的有效性，但我們對(duì)生長(zhǎng)因子仍然存在著質(zhì)疑，擔(dān)憂(yōu)其可能帶來(lái)的不良反應(yīng)及并發(fā)癥，這種擔(dān)憂(yōu)主要是一些腫瘤組織中存在著生長(zhǎng)因子或相關(guān)基因的高表達(dá)，或是某些生長(zhǎng)因子本身就是癌基因的產(chǎn)物[27-28]。臨床應(yīng)用生長(zhǎng)因子是否能導(dǎo)致過(guò)度表達(dá)，甚至誘發(fā)腫瘤，仍然是值得特別關(guān)注的問(wèn)題。

近來(lái)，中藥的相關(guān)研究也開(kāi)展得越來(lái)越深入，許多藥理作用得到了較廣泛的認(rèn)同。在中醫(yī)理論中，丹參是最常用的活血化瘀的藥物之一。據(jù)現(xiàn)代藥理學(xué)的研究，丹參的水溶性成分具有很強(qiáng)的清除自由基和抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用[29-30]。其有效成分可用于治療心血管疾病，且對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞還有保護(hù)作用。此外，丹參還能提高紅細(xì)胞的變形能力，改善微循環(huán)障礙，有促進(jìn)血管新生、抗腫瘤、抗肝纖維化、預(yù)防應(yīng)激性潰瘍、調(diào)節(jié)免疫、抗菌消炎等作用[8-11]。鑒于自體脂肪移植對(duì)血供的需求，我們通過(guò)引入丹參來(lái)探討和觀(guān)察其對(duì)自體脂肪移植的影響。

黃芪常與丹參搭配使用，是最常用的益氣中藥之一。具有補(bǔ)氣升陽(yáng)、益衛(wèi)固表、托毒生肌、利水消腫之功[12]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，黃芪對(duì)心血管、循環(huán)、物質(zhì)代謝、肝腎功能及腫瘤治療等疾病均可發(fā)揮良好的治療作用[13-14]。黃芪具有顯著的抗氧化活性，能夠?qū)ψ杂苫漠a(chǎn)生起到抑制作用，并能有效清除機(jī)體內(nèi)過(guò)剩的自由基，使得細(xì)胞減輕或免受自由基產(chǎn)生的過(guò)度氧化作用，保護(hù)線(xiàn)粒體的結(jié)構(gòu)和功能，從而起到保護(hù)細(xì)胞、延長(zhǎng)細(xì)胞壽命的作用[15]。研究顯示，黃芪確有提高自體脂肪移植存活率的作用[31]。鑒于黃芪保護(hù)細(xì)胞、延長(zhǎng)細(xì)胞壽命和丹參改善微循環(huán)的作用，我們通過(guò)丹參、黃芪對(duì)自體脂肪移植的作用來(lái)比較兩者對(duì)自體脂肪移植的影響，希望能為將來(lái)的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，自體脂肪移植術(shù)后第12周，兩實(shí)驗(yàn)組的存活率明顯高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。提示應(yīng)用丹參、黃芪注射液有助于提高自體脂肪移植成活率?？赡芤浦搀w血管新生和血運(yùn)重建是一個(gè)相對(duì)緩慢的過(guò)程，在早期（第2、4周）誘導(dǎo)足量新生血管形成之前，各組之間的差異不明顯。

血清VEGF結(jié)果顯示，丹參、黃芪組的表達(dá)水平在移植術(shù)的當(dāng)天及術(shù)后第1、2、4、6、8周與對(duì)照組比較均有明顯增高，推測(cè)中藥制劑在移植術(shù)后的早期發(fā)揮了擴(kuò)張小動(dòng)脈和改善微循環(huán)的作用，同時(shí)上調(diào)了VEGF的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組在VEGF的作用下誘導(dǎo)毛細(xì)血管新生，以增加移植組織所需的血供。

血管內(nèi)皮細(xì)胞因子CD31免疫組化法染色結(jié)果顯示，對(duì)照組移植脂肪組織中血運(yùn)不豐富，新生血管少。中藥組移植體組織中新生血管較豐富，又以周邊區(qū)域更多。中藥組中又以黃芪組新生血管數(shù)量較多。周脂素免疫組化法染色結(jié)果顯示，中藥處理的兩實(shí)驗(yàn)組相對(duì)對(duì)照組有活性的脂肪細(xì)胞分布更廣泛、數(shù)量更多，其中又以丹參組活性高、數(shù)量多。

結(jié)合HE、CD31和周脂素的染色結(jié)果，通過(guò)丹參、黃芪組間的比較可以發(fā)現(xiàn)，丹參組在細(xì)胞形態(tài)上最好，而血管數(shù)量不是最豐富，多分布在細(xì)胞周邊的島狀結(jié)締組織中；黃芪組的細(xì)胞形態(tài)不是最好，但血供卻較為豐富，血管多數(shù)分布在細(xì)胞間增生的結(jié)締組織內(nèi)，豐富的血供可能并未能在脂肪細(xì)胞的成活上發(fā)揮重要作用。因此我們推測(cè)，丹參和黃芪在細(xì)胞保護(hù)、抗氧化和誘導(dǎo)血管新生、血運(yùn)重建方面均發(fā)揮了較為重要的作用。就本實(shí)驗(yàn)結(jié)果而言，丹參可能在細(xì)胞保護(hù)方面作用略佳，在上調(diào)VEGF水平和血管新生方面兩種中藥效果相仿。

[1]Kononas TC,Bucky LP,Hurley C,et al.The fate of suctioned and surgically removed fat after reimplantation for soft-tissue augmentation:a volumetric and histologic study in the rabbit[J]. Plast Reconstr Surg,1993,91(5):763-768.

[2]Rietjens M,De Lorenzi F,Rossetto F,et al.Safety of fat grafting in secondary breast reconstruction after cancer[J].J Plast Reconstr Aesthet Surg,2011,64(3):477-483.

[3]張滌生.張滌生整復(fù)外科學(xué)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2002.

[4]Nishimura T,Hashimoto H,Nakanishi I,et al.Microvascular angiogenesis and apoptosis in the survival of free fat grafts[J]. Laryngoscope,2000,110(8):1333-1338.

[5]Ellenbogen R.Free autogenous pearl fat grafts in the face--a preliminary report of a rediscovered technique[J].Ann Plast Surg,1986,16(3):179-194.

[6]Yi CG,Xia W,Zhang LX,et al.VEGF gene therapy for the survival of transplanted fat tissue in nude mice[J].J Plast Reconstr Aesthet Surg,2007,60(3):272-278.

[7]馬丙祥,董寵凱.丹參的藥理作用研究新進(jìn)展[J].中國(guó)藥房,2014, 25(7):663-665.

[8]宋偉.丹參的藥理作用的研究進(jìn)展[J].北方藥學(xué),2013,10(5):52-53.

[9]楊雪鴟,王小云,開(kāi)國(guó)銀,等.丹參酮ⅡA抗腫瘤作用及其新劑型的研究進(jìn)展[J].中成藥,2011,33(8):1389-1392.

[10]張曉雷,陳俊華,郭春霞,等.丹參多酚酸鹽的藥理作用研究[J].世界臨床藥物,2013,34(5):292-297.

[11]肖志華.丹參的臨床應(yīng)用[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2012,10(36):154-155.

[12]朱瑄.黃芪的現(xiàn)代藥理研究及其臨床新用[J].中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育,2010,8(15):72-72.

[13]袁紅霞,陳艷春.黃芪的現(xiàn)代藥理研究及其臨床應(yīng)用[J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2000,24(5):397-400.

[14]陳國(guó)輝,黃文鳳.黃芪的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)新藥雜志,2008,17(17):1482-1485.

[15]葛斌,許愛(ài)霞,楊社華.黃芪多糖抗衰老作用機(jī)制的研究[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,2004,24(10):610-612.

[16]Zhao J,Yi C,Zheng Y,et al.Enhancement of fat graft survival by bone marrow-derived mesenchymal stem cell therapy[J].Plast Reconstr Surg,2013,132(5):1149-1157.

[17]吳慧玲.自體顆粒脂肪移植成活率的實(shí)驗(yàn)研究及川芎嗪對(duì)提高脂肪移植成活率的影響[D].杭州:浙江大學(xué),2009.

[18]Hamed S,Egozi D,Kruchevsky D,et al.Erythropoietin improves the survival of fat tissue after its transplantation in nude mice[J]. Plos One,2010,5(11):419-453.

[19]Yoshimura K,Shigeura T,Matsumoto D,et al.Characterization of freshly isolated and cultured cells derived from the fatty and fluid portions of liposuction aspirates[J].J Cell Physiol,2006,208(1): 64-76.

[20]毋巨龍,李世榮.bFGF對(duì)顆粒脂肪移植成活率的影響及CT影像學(xué)研究[J].重慶醫(yī)學(xué),2008,37(12):1314-1315.

[21]Sato K,Nakanishi N,Mitsumoto M.Culture condition supporting adipocyte conversion of stromal-vascular cells from bovine intramuscullar adipocyte tissues[J].J Vet Med Sci,1996,58(2):1073-1078.

[22]梁杰,銀桂彬,彭智,等.血管生成素協(xié)同血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)自體脂肪移植血運(yùn)重建的影響[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué),2007,16(7): 891-894.

[23]彭青和.瘦素影響SD大鼠移植顆粒脂肪成活率的實(shí)驗(yàn)研究[D].桂林:桂林醫(yī)學(xué)院,2010.

[24]李鋒,李昆,李杰,等.富血小板血漿對(duì)顆粒脂肪移植的影響[J].中國(guó)組織工程研究,2013,17(31):5645-5651.

[25]Craft RO,Rophael J,Morrison WA,et al.Effect of local,longterm delivery of platelet-derived growth factor(PDGF)on injected fat graft survival in severe combined immunodeficient(SCID) mice[J].J Plast Reconstr Aesthet Surg,2009,62(2):235-243.

[26]梁杰,趙坤,吳浩俊,等.重組人VEGF和前列腺素E1對(duì)移植脂肪早期血管生成的作用[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2009,4(11):7-9.

[27]Plate KH,Breier G,Weich HA,et al.Vascular endothelial growth factor is a potential tumour angiogenesis factor in human gliomas in vivo[J].Nature,1992,359(6398):845-848.

[28]付小兵,程飚,盛志勇.生長(zhǎng)因子應(yīng)用于臨床創(chuàng)傷修復(fù)——十年的主要進(jìn)展與展望[J].中國(guó)修復(fù)重建外科雜志,2004,18(6):508-512.

[29]黃雙盛,吳肋杰.丹參的抗氧化與抗炎作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2002,9(1):86-87.

[30]李莉,劉耕陶.丹酚酸A對(duì)大鼠腦突觸體和線(xiàn)粒體氧應(yīng)激損傷的體外保護(hù)作用[J].中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志,1998,12(4):275-279.

[31]武承興,王健,張波,等.黃芪對(duì)自體脂肪顆粒移植存活率的影響[J].組織工程與重建外科,2013,9(3):141-144.

The Effects of Salvia m iltiorrhiza and Astragalus propinquus In jection on the Survival of Autologous Adipose Tissue Transplantation

LI Pengfei,ZHENG Danning,ZHOU Jia,WANG Jian,ZHANG Bo,ZHU Chang,YU Li.
Department of Plastic and Reconstructive Surgery,Shanghai Ninth People's Hospital,Shanghai Jiaotong University School of Medicine, Shanghai 200011,China.Corresponding author:YU Li(E-mail:yuoli@163.com).

Objective To explore the effects of Salvia miltiorrhiza and Astragalus propinquus injection on the survival of transplanted grafts,so as to provide evidence for further research and clinical application.M ethods Autologous adipose tissue transplantation model was established using New Zealand white rabbit.The experimental groups were given S. miltiorrhiza and A.propinquus injection intraperitoneally.The expression levels of VEGF in serum and survival rates were measured and calculated at different time points.Tissue morphology was observed by HE staining.The expression of platelet endothelial cell adhesion molecule-1(CD31)and perilipin were observed by immune-histochemistry to evaluate the neocapillary growth and cyto-activity of transplanted adipose tissue.Results Twelve weeks after transplantation,the survival rates in experimental groups were higher than the control group.The expression levels of VEGF in serum in experimental groups were significantly higher than those in the control group at each time point.HE and immuno-histochemical staining demonstrated better morphology,denser neo-capillaries and higher cyto-activity in experimental groups,compared with the control group.Conclusion By applying S.miltiorrhiza and A.propinquus injection,the survival of autologous transplanted adipose tissue can be significantly enhanced in New Zealand rabbits.

Salvia miltiorrhiza injection;Astragalus propinquus injection;Autologous adipose tissue transplantation; Survival rate

R622+.9

A

1673－0364（2015）03－0144－05

10.3969/j.issn.1673-0364.2015.03.007

2015年3月17日；

2015年4月26日）

200011上海市上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院整復(fù)外科。

余力（E-mail：yuoli@163.com）。