非正常死亡案件中丙酮含量分析

宋麗娟，趙培鐸，張廣華

（山東省公安廳物證鑒定研究中心，濟(jì)南 250001）

·技術(shù)與應(yīng)用·

非正常死亡案件中丙酮含量分析

宋麗娟，趙培鐸，張廣華

（山東省公安廳物證鑒定研究中心，濟(jì)南 250001）

目的 利用頂空氣相色譜分離分析方法，在無法實施尸體解剖時，通過測定血液或尿液中丙酮的含量為某些非正常死亡案件提供死因判定的依據(jù)。方法 利用丙酮易揮發(fā)性，用頂空氣相色譜/氫火焰離子化檢測器（HSGC/FID）進(jìn)行分離檢測；通過與平行操作的對照品比較，以保留時間為依據(jù)進(jìn)行定性分析；以峰面積為依據(jù)，采用內(nèi)標(biāo)法（叔丁醇作為內(nèi)標(biāo)物）進(jìn)行定量測定。結(jié)果 通過對死者血液和尿液測定，分析丙酮含量異常數(shù)據(jù)，同時結(jié)合前期調(diào)查所獲取的案件相關(guān)信息，為死因判定提供了依據(jù)。結(jié)論 該分析方法基質(zhì)干擾小，重現(xiàn)性良好，操作簡單，普通刑事化驗室均可進(jìn)行，對缺乏病理學(xué)數(shù)據(jù)的非正常死亡案件的死因判定具有重要意義。

法醫(yī)毒物學(xué)；非正常死亡；頂空氣相色譜/氫火焰離子化檢測器；血液；尿液；丙酮

在一些非正常死亡案件中，因死者家屬不同意尸體解剖，無法進(jìn)行病理學(xué)檢驗，影響死因判定。死者血液、尿液是否含有毒（藥）物及分解產(chǎn)物、是否含有某些疾病標(biāo)志物，成為死因判定的最好佐證。

2014年某日，一名美籍華人（男，67歲）在濟(jì)南市某酒店內(nèi)死亡。因死者家屬不同意解剖，辦案人員提取了死者的血液和尿液送檢。利用GC/MS檢驗檢出丙酮成分，排除了常見毒（藥）物，采用頂空氣相色譜法對檢材中丙酮含量進(jìn)行測定。血液及尿液中丙酮含量異常，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)，推斷可能為疾?。ㄌ悄虿。┘捌洳l(fā)癥（心腦血管疾?。┱T導(dǎo)的非正常死亡。與死者家屬溝通后，對死亡結(jié)論無異議。

1 實驗部分

1.1 主要儀器

美國安捷倫Agilent 6890N氣相色譜儀。GC條件：色譜柱 DB-624色譜柱（30 m×0.535 mm×3.0 μ m）；柱溫40℃，恒溫5 min；進(jìn)樣口溫度150℃；檢測器溫度260℃；氮?dú)猓∟2）流速：5 mL/min，分流比10∶1；空氣（Air）流速：300 mL/min；氫氣（H2）流速：30 mL/min；Make up flow：25 mL/min；FID檢測器。

CTC ANALYTICS自動頂空進(jìn)樣器。CTC條件：爐箱溫度60℃；加熱時間7 min；機(jī)械搖動速度500 r/min；進(jìn)樣針溫度70℃；進(jìn)樣體積300 μ L。

1.2 試 劑

丙酮、叔丁醇（色譜純）（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）。

1.3 樣品處理

用精密移液器平行吸取檢材血液或尿液0.5 mL各兩份，分別置于10 mL頂空玻璃瓶中，各加4.5 mL叔丁醇內(nèi)標(biāo)（0.078 mg/mL），用專用瓶蓋和內(nèi)襯密封。精密吸取丙酮標(biāo)樣（0.79 mg/mL）0.5 mL置于10 mL頂空玻璃瓶中，加4.5 mL叔丁醇內(nèi)標(biāo)（0.078 mg/mL），用專用瓶蓋和內(nèi)襯密封。

1.4 定量計算：

1.4.1 內(nèi)標(biāo)法計算公式

1.4.2 相對相差計算公式

相對相差（%）=

2 結(jié)果與討論

2.1 測定結(jié)果

利用上述方法，得到血液和尿液的氣相色譜圖（見圖1，圖2）。與空白血液和尿液相比，檢材血液和尿液中丙酮含量顯著異常。利用丙酮和叔丁醇的峰面積（見表1），通過內(nèi)標(biāo)法定量計算3次平均值，得到檢材血液中丙酮含量分別為6.89 mg/100mL，相對相差為0.87%；檢材尿液中丙酮含量57.1 mg/100mL，相對相差為0.35%。

圖 1 血液樣品的頂空氣相色譜圖。a：空白血；b：檢材血；c：標(biāo)準(zhǔn)添加血。Fig.1 Headspace gas chromatograms of blank blood（a）， case blood（b） and standard spiking blood（c）

圖 2 尿液樣品的頂空氣相色譜圖 。a：空白尿；b：檢材尿；c：標(biāo)準(zhǔn)添加尿。Fig.2 Headspace gas chromatograms of blank urine （a）， case urine （b） and standard spiking urine （c）

表 1 檢材血液和尿液中丙酮的定量數(shù)據(jù)Table 1 Quantification data of acetone in blood and urine

2.2 討 論

頂空氣相色譜法采用氣體進(jìn)樣，收集樣品易揮發(fā)成分，免除冗長繁瑣的樣品前處理過程，并避免因使用有機(jī)溶劑而引入的雜質(zhì)干擾，尤其適用于揮發(fā)性目標(biāo)物的分析檢測［1］。本文利用丙酮的易揮發(fā)性，用頂空氣相色譜/氫火焰離子化檢測器（HS-GC/FID）進(jìn)行檢測；經(jīng)與平行操作的對照品比較，以保留時間進(jìn)行定性分析；以峰面積為依據(jù)，采用內(nèi)標(biāo)法定量測定。結(jié)果顯示，本方法基質(zhì)干擾小，重現(xiàn)性良好，通過對揮發(fā)性目標(biāo)物分析檢測，可應(yīng)用于案件定性。

本案死者血液及尿液中丙酮含量分別高達(dá)6.89 mg/100mL、57.1 mg/100mL，表明其生理機(jī)能已經(jīng)嚴(yán)重紊亂。正常情況下，血酮體由β-羥丁酸、乙酰乙酸、丙酮組成，前兩者是酮體的主要成分，分別占78%和20%，丙酮僅占2%［2］，血液中酮體濃度小于0.5 mmol/L［3］。糖尿病患者體內(nèi)脂類代謝紊亂，血中酮體增多［4］，當(dāng)腎小球濾過濃度超過腎小管最大重吸收能力時，尿中出現(xiàn)酮體［2］。另據(jù)2010年美國糖尿病協(xié)會（ADA）統(tǒng)計，三年以上糖尿病患者，出現(xiàn)并發(fā)癥的幾率在46%以上；五年以上糖尿病患者，出現(xiàn)并發(fā)癥的幾率在61%以上；十年以上糖尿病患者，出現(xiàn)并發(fā)癥的幾率高達(dá)98%［5］。腎病、腦病、心臟病等都是糖尿病最常見的并發(fā)癥，是導(dǎo)致糖尿病患者死亡的主要因素。結(jié)合前期調(diào)查，死者有多年糖尿病史并出現(xiàn)并發(fā)癥。由此推斷死者可能是糖尿病及其并發(fā)癥誘導(dǎo)的突然死亡，死者家屬對死亡結(jié)論無異議。

針對缺乏病理學(xué)數(shù)據(jù)的非正常死亡案件，若通過常規(guī)排毒后，仍無法為死亡原因提供合理依據(jù)，可以結(jié)合偵辦部門的前期調(diào)查，采用適當(dāng)?shù)姆治鍪侄?，從不同角度不同層面挖掘信息?］，推進(jìn)案件偵辦。

［1］ 喬靜，楊士云.頂空GC/MS法檢驗血液中的硫化氫［J］.刑事技術(shù)， 2012（3）：22-23.

［2］ 陸菊明，谷偉軍.血酮體測定方法及臨床應(yīng)用進(jìn)展［J］.藥品評價， 2008，5（12）：569-570.

［3］ 馬念章，李光，廖靜敏.人體內(nèi)酮體檢測技術(shù)的研究進(jìn)展［J］.分析化學(xué)評述與進(jìn)展，2005，33（7）：1019-1022.

［4］ 翁偉，唐吉斌.β-羥丁酸與血酮體測定在糖尿病酮癥酸中毒中的應(yīng)用與比較［J］.實用醫(yī)技雜志， 2008，15（27）：3672-3673.

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［6］ 徐斌.無尸體證據(jù)命案的證據(jù)收集［J］.刑事技術(shù)， 2014（2）：41-42.

Quantitative Analysis of Acetone in An Unusual Death

SONG Lijuan， ZHAO Peiduo， ZHANG Guanghua
（Institute of Forensic Science， Shandong Provincial Public Security， Jinan 250001， China）

Objective To solve an unusual death case and develop a method for determining concentration of acetone in blood or urine samples from the dead body by headspace gas chromatography （HS-GC）， which is quite helpful under certain circumstance when autopsy can't be performed because of social customs， religious belief or other reasons. Methods A 67-year-old man， who had diabetes， was found dead in a hotel room and his family didn't agree to perform an autopsy. In order to determine the cause of death， the blood and urine samples were sent to laboratory for poison and drugs analysis， but no common poison was found. Based on the excellent volatility， acetone in blood or urine samples was analyzed by a head-space gas chromatography system with hydrogen fi re ionization detector （HS-GC/FID）. Qualitative analysis result was obtained according to retention time， and quantitative analysis was performed by internal standard （tert-butyl alcohol） method. The average peak area derived from three replicate injections of each sample was used for the calculation of acetone concentration in blood or urine. Results Concentration of acetone in blood and urine was 6.89 mg/100mL and 57.1 mg/100mL respectively，both were much higher than the normal value. Conclusions Determination of acetone in blood or urine by HS-GC/FID provides a useful evidence for determining the manner of death， which is especially effective when short of pathology data. In such casework， thorough information about the dead should be taken into consideration to ensure the scientifi c deduction.

forensic toxicology； unusual death； HS-GC/FID； blood； urine； acetone

DF795.1

B

1008-3650（2015）03-0256-03

2014-05-05

格式：宋麗娟， 趙培鐸， 張廣華. 非正常死亡案件中丙酮含量分析 ［J］. 刑事技術(shù)， 2015，40（3）：256-258.

宋麗娟（1983—），女，山東濰坊人，工程師，理學(xué)博士，研究方向為法醫(yī)毒物毒品分析。 E-mail： ljsong@iccas.ac.cn

10.16467/j.1008-3650.2015.03.023