細(xì)胞塊切片免疫組化染色在胸腔積液病理診斷中的應(yīng)用價值

李中祥

(太康縣人民醫(yī)院 病理科 河南 周口 475400)

胸腔積液主要來源于非小細(xì)胞肺癌、肺腺癌和惡性胸膜間皮瘤等，傳統(tǒng)胸腔積液的診斷主要采用細(xì)胞涂片檢查。但單純應(yīng)用細(xì)胞涂片進行檢查，無法對轉(zhuǎn)移性癌和漿膜腔原發(fā)性間皮性腫瘤進行區(qū)別。胸腔積液細(xì)胞免疫組化染色檢測是近年來應(yīng)用在鑒別轉(zhuǎn)移性癌和間皮性腫瘤方面具有極高敏感度的檢測方法。本文選取80例惡性胸腔積液患者作為研究對象，采用細(xì)胞免疫組化染色檢測，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以太康縣人民醫(yī)院2013年10月至2014年10月80例胸腔積液患者為研究對象，其中觀察組40例，男22例，女18例，年齡14～76 歲，平均年齡(40.2±3.1)歲;對照組40例，男20例，女20例，年齡12～73 歲，平均年齡(41.1±3.3)歲。80例送檢樣本均為胸腔積液;觀察組40例均制作細(xì)胞塊，對照組40例均進行常規(guī)細(xì)胞涂片。本次研究均經(jīng)過患者或患者家屬簽署知情同意書，且兩組患者在年齡、性別等一般資料方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 清晨收集患者新鮮胸腔積液50 ml，分3～5個試管進行離心，以3 000 r/min 的轉(zhuǎn)速離心10～15 min;離心結(jié)束后用移液槍將上清液吸出，從沉渣中取部分行常規(guī)細(xì)胞涂片學(xué)檢查;余下所有沉渣加入2.5 ml 戊二醛進行固定，再以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心5 min，離心后用移液槍將上清液吸出，將沉渣取出用濾紙包好，行常規(guī)脫水后用石蠟包埋切片，應(yīng)用HE 染色。

1.2.2 免疫組化 采用Maxvision 快捷S－ P 法進行染色，Maxvision 試劑盒和DAB 顯色試劑均購于福建邁新有限公司，CEA、CK7、Wr－l 等抗體均購于自基因公司，染色過程中嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) 陽性:CK7、CEA 在胞漿或胞膜上呈現(xiàn)棕黃色;WT－1 在胞核呈現(xiàn)棕黃色顆粒;Calretinin 在胞漿、胞膜或胞核上呈現(xiàn)黃色;間皮細(xì)胞或腺癌細(xì)胞達(dá)10%以上。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理分析，定性資料的組間比較采用χ2檢驗，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察組和對照組患者胸腔積液的陽性檢出率分別為100.0%、76.0%，細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化陽性率明顯高于常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.05)?？贵w表達(dá)分析顯示，CK7、MOC－31、CD15、TTF－1、BerEP4、CEA 是肺腺癌較為特異性的抗體，而Calretinin、Desmin、CK5/6、WT－1 是間皮性腫瘤較為特異性的抗體，各抗體在腺癌細(xì)胞和間皮性腫瘤細(xì)胞均有交叉表達(dá)。見表1。

表1 兩組患者病理診斷結(jié)果對比(n)

3 討論

胸腔積液在細(xì)胞病理學(xué)診斷中始終具有至關(guān)重要的臨床意義。由于轉(zhuǎn)移性癌和漿膜腔原發(fā)性間皮性腫瘤的細(xì)胞形態(tài)比較相似，所以細(xì)胞涂片法無法對其進行準(zhǔn)確區(qū)分，而病理結(jié)果是臨床治療方案選擇的關(guān)鍵。胸腔積液細(xì)胞塊切片在適當(dāng)?shù)目贵w組合下與免疫組化染色相聯(lián)合，可有效鑒別肺腺癌和惡性間皮病變。免疫組化染色法是利用已標(biāo)記的特異性抗體來檢測細(xì)胞內(nèi)未知抗原。并通過酶所產(chǎn)生的著色反應(yīng)來顯示細(xì)胞的活性、定位及其分布。此方法操作易于掌握，陽性物質(zhì)定位準(zhǔn)確、特異性強。同時，細(xì)胞塊的應(yīng)用彌補了傳統(tǒng)細(xì)胞涂片方法單一的缺點，使細(xì)胞標(biāo)本得以保存，具有了連續(xù)切片的性質(zhì)，更利于進行多項檢查。該組研究結(jié)果顯示，細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化陽性率明顯高于常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.05)。CK7、MOC－31、CD15、TTF－1、BerEP4、CEA 是肺腺癌較為特異性的抗體，而Calretinin、Desmin、CK5/6、WT－1是間皮性腫瘤較為特異性的抗體，說明細(xì)胞塊切片聯(lián)合免疫組化染色可顯著提高胸腔積液診斷的陽性率，為臨床治療提供一定的參考依據(jù)。

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