婁紅軍 顏澤清
由于犬體散熱困難,在夏令時(shí)節(jié),我國(guó)大部分地區(qū)屬高溫高濕狀態(tài),犬體易遭受?chē)?yán)重的熱應(yīng)激。在熱應(yīng)激條件下,警犬往往喪失工作能力。目前在復(fù)方中草藥抗熱應(yīng)激的研究中,主要集中在中草藥對(duì)熱應(yīng)激動(dòng)物血液指標(biāo)的影響,對(duì)中草藥抗犬熱應(yīng)激作用機(jī)理方面的報(bào)道甚少。本研究以夏季高溫為應(yīng)激源,以20 頭8 ~10 歲的拉布拉多犬為試驗(yàn)動(dòng)物,以中草藥添加劑保健犬糧為試驗(yàn)材料,進(jìn)行為期90 天的飼喂試驗(yàn),檢測(cè)血清促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、皮質(zhì)醇(COR)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4 )、白細(xì)胞介素-2(IL-2)等指標(biāo),旨在探討中草藥添加劑對(duì)犬的抗熱應(yīng)激效果及其可能的作用機(jī)理。
基礎(chǔ)犬糧由南京警犬研究所科技開(kāi)發(fā)中心動(dòng)物食品廠(chǎng)提供的“競(jìng)?cè)迸瞥扇Z,試驗(yàn)犬糧由基礎(chǔ)犬糧加入一定劑量的中草藥添加劑。其中中草藥添加劑主要成份為紅參、生地黃、天冬、麥冬、地骨皮、茯苓等中草藥。
由公安部南京警犬研究所老年拉布拉多犬20 頭,健康、體重等狀況基本一致,年齡從8 ~10 歲之間,其中母犬16 頭,公犬4 頭。在分別性別的基礎(chǔ)上,采用隨機(jī)方式,分為試驗(yàn)組和對(duì)照組,其中每組公犬2 頭,母犬8 頭。
所有試驗(yàn)犬按統(tǒng)一采用封閉式飼養(yǎng)管理,集中飼養(yǎng),一犬一舍,定量喂食(按體重的2%計(jì)算飼喂量),每天早晚各飼喂一次,其中對(duì)照組犬飼喂基礎(chǔ)犬糧,試驗(yàn)組飼喂試驗(yàn)犬糧;保證飲水,定時(shí)打掃犬舍,每犬每天上、下午各活動(dòng)30 分鐘。
實(shí)驗(yàn)時(shí)間為90 天,從5月至7月,犬舍溫度早(6 點(diǎn)~9 點(diǎn))、中(11 點(diǎn)~14 點(diǎn))、晚(19 點(diǎn)~22 點(diǎn)),5月、6月、7月的平均溫度分別為23.6 ℃(±3 ℃)、29.7 ℃(±2 ℃)和34.9℃(±2℃)。
血液標(biāo)本采集分別于試驗(yàn)結(jié)束的最后一天清晨血清采集,采用前肢靜脈采血方式,空腹采血5ml,3500 轉(zhuǎn)離心15 分鐘,分離血清。取圓底聚苯乙烯管若干,用記號(hào)筆編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)管和待測(cè)樣品管,然后用微量加樣器按要求加樣。加樣前所有試劑(尤其分離劑)包括待測(cè)樣品要搖勻,并且平衡到室溫。
采用全自動(dòng)生化分析儀和試劑盒測(cè)定血清促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、皮質(zhì)醇(COR)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4 )、白細(xì)胞介素-2(IL-2)的值。
用t 檢驗(yàn)法分析組間差異。
由表1可知,ACTH、COR、IL-2 試驗(yàn)各組均低于對(duì)照組,其中ACTH試驗(yàn)組比對(duì)照組降低31.20%,差異顯著(P<0.05); COR 試驗(yàn)組比對(duì)照組降低30.66%,差異顯著(P<0.05); IL-2 試驗(yàn)組比對(duì)照組降低7.01%,但差異不顯著。
甲狀腺素(T4) 試驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組,比對(duì)照組高30.62% ,差異顯著(P<0.05);試驗(yàn)組T3 比對(duì)照組有所提高,但差異均不顯著。
上述結(jié)果表明,中草藥添加劑保健犬糧能顯著降低試驗(yàn)犬的血清促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、皮質(zhì)醇(COR)的測(cè)定值,并顯著提高試驗(yàn)犬的甲狀腺素(T4)。表明中草藥添加劑保健犬糧有利于改善犬體代謝和降低熱應(yīng)激對(duì)犬造成的不利影響。
表1 對(duì)照組與試驗(yàn)組測(cè)試指標(biāo)變化
從本試驗(yàn)結(jié)果可得出,飼喂中草藥添加劑配方犬糧的試驗(yàn)組可在一定程度上降低血清中促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、皮質(zhì)醇(COR)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)的濃度,明顯提高三碘甲腺原氨酸(T4)的濃度,并可在一定程度上提高血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平,從而有效地緩解犬的熱應(yīng)激,提高免疫力,減輕熱應(yīng)激對(duì)犬的危害。
中草藥添加劑保健犬糧中含有的活性成分如紅參、生地黃、天冬、麥冬、地骨皮、茯苓等具有調(diào)節(jié)內(nèi)分泌,增強(qiáng)機(jī)體抗應(yīng)激能力等功能。試驗(yàn)結(jié)果表明,試驗(yàn)組中有提高血清中T4,降低COR 和ACTH 含量的趨勢(shì)。T3、T4 是由甲狀腺及其外周組織分泌,是維持機(jī)體新陳代謝的重要物質(zhì),參與養(yǎng)分在機(jī)體內(nèi)再分配和穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié),當(dāng)其含量降低時(shí),代謝率隨之降低;本試驗(yàn)添加中草藥添加劑配方的試驗(yàn)犬糧可提高機(jī)體的T4 含量,從而提高代謝率。熱應(yīng)激狀態(tài)下,犬血液中的COR 濃度顯著升高,造成的免疫器官的傷害、機(jī)體熱調(diào)節(jié)和糖、 蛋白質(zhì)代謝的紊亂;ACTH 是促進(jìn)COR 釋放的一種激素,熱應(yīng)激時(shí)ACTH 濃度上升,使血清中COR 升高。本試驗(yàn)中試驗(yàn)組能明顯降低ACTH、COR 的濃度,對(duì)機(jī)體進(jìn)行免疫保護(hù)。
許多中草藥具有舒筋絡(luò)、祛濕熱、瀉火行水、通利血脈、清熱解毒、補(bǔ)氣養(yǎng)血等功效,在熱應(yīng)激期緩解機(jī)體的消化代謝紊亂和生理異常的癥狀,從而提高抗應(yīng)激能力。
中草藥含有多糖、甙類(lèi)、生物堿、揮發(fā)油類(lèi)、蔥類(lèi)和有機(jī)酸類(lèi)等有效成分,具有免疫增強(qiáng)作用,它們起著調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體免疫功能的作用,有利于提高犬對(duì)熱的耐受力。試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定犬血清中IL一2 對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的影響。IL一2 在T 細(xì)胞的生長(zhǎng)及行使功能中發(fā)揮著重要作用,它可引發(fā)T 細(xì)胞大量增殖,最終產(chǎn)生輔助型、抑制型和細(xì)胞毒性T 細(xì)胞。試驗(yàn)結(jié)果顯示,試驗(yàn)組IL一2含量降低,表明機(jī)體免疫所需的T細(xì)胞減少, 熱應(yīng)激所引起的免疫異常得以改善;驗(yàn)證以中草藥為主要原料的添加劑具有提高機(jī)體免疫力,增強(qiáng)犬抗熱應(yīng)激能力的效果。