通脈降濁顆粒對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化家兔脂質(zhì)代謝及相關(guān)炎性因子表達(dá)的影響*

宋筱靚　王　帥　王鳳榮

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧沈陽(yáng)110032）

·研究報(bào)告·

通脈降濁顆粒對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化家兔脂質(zhì)代謝及相關(guān)炎性因子表達(dá)的影響*

宋筱靚王帥王鳳榮△

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧沈陽(yáng)110032）

目的觀(guān)察通脈降濁顆粒對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化（AS）家兔血脂及相關(guān)炎性因子表達(dá)的影響，進(jìn)一步闡明其防治AS性疾病的可能作用機(jī)制。方法45只家兔按隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組、模型組、血脂康組、通脈降濁組（TMM）及高劑量組（TMH），每組9只。采用高脂飼料喂飼家兔10周建立AS模型，空白組基礎(chǔ)飼料喂飼；血脂康組給予血脂康0.1 g/（kg·d）；通脈降濁組以及高劑量組分別給予通脈降濁的供試品，劑量分別為3.51 g/（kg·d）［12 g生藥/（kg·d）］以及10.5 g/（kg·d）［（36 g生藥/（kg·d）］，連續(xù)10周，取主動(dòng)脈進(jìn)行病理觀(guān)察，檢測(cè)各組家兔血脂情況及炎癥浸潤(rùn)情況，檢測(cè)家兔主動(dòng)脈細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）、NF-κB mRNA表達(dá)。結(jié)果主動(dòng)脈病理結(jié)果顯示，通脈降濁組和血脂康組家兔主動(dòng)脈內(nèi)斑塊面積及厚度較模型組小，泡沫細(xì)胞數(shù)量及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)較少，隨著通脈降濁劑量增高，病理改變程度減輕。血脂結(jié)果顯示，通脈降濁顆粒兩組均具有顯著的降低血清TG的作用（P＜0.05），通脈降濁高劑量組對(duì)血清總膽固醇（TC）以及低密度脂蛋白膽固醇（LDL）有明顯的降低作用（P＜0.05），通脈降濁組對(duì)HDL的影響無(wú)意義。血脂康組、通脈降濁兩組在ICAM-1、NF-κB mRNA及蛋白表達(dá)方面顯著低于模型組（P＜0．01）。結(jié)論通脈降濁顆粒具有明顯的降低血脂作用，并通過(guò)抑制家兔主動(dòng)脈ICAM-1、NF-κB的表達(dá)，起到延緩AS斑塊的形成及炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)的作用。

動(dòng)脈粥樣硬化通脈降濁顆粒脂質(zhì)代謝炎癥反應(yīng)

動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是人類(lèi)致死的首要原因［1］。對(duì)AS疾病的發(fā)病機(jī)制的研究是近年來(lái)醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)。隨著研究的不斷深入，炎癥及免疫機(jī)制在A(yíng)S的形成、發(fā)展過(guò)程中的作用得到越來(lái)越多的重視，而脂質(zhì)代謝紊亂不僅可以激活炎癥反應(yīng)［2］，且能誘導(dǎo)血液流變性異常［3］，直接損害內(nèi)皮功能，形成惡性循環(huán)，進(jìn)而導(dǎo)致AS的形成［4］。所以控制或阻斷脂質(zhì)代謝紊亂途徑、抑制炎性因子表達(dá)，保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免受損傷是防治AS發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵。AS歸屬中醫(yī)學(xué)心系病證范疇，筆者認(rèn)為AS的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)痰、毒、瘀不斷變化的動(dòng)態(tài)過(guò)程，三者之間相互影響，互為因果，導(dǎo)致血液、脈道功能失調(diào)而發(fā)生的一種病理改變，從而導(dǎo)致心脈瘀阻，不通則痛的冠心病臨床表現(xiàn)。本研究通過(guò)構(gòu)建高脂飲食家兔AS模型，觀(guān)察通脈降濁顆粒對(duì)AS家兔脂質(zhì)代謝及相關(guān)炎性因子細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）、NF-κB mRNA表達(dá)的影響，對(duì)中藥防治AS性疾病的臨床應(yīng)用及后續(xù)研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為臨床尋找中藥防治AS的有效方法提供理論依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1動(dòng)物普通家兔45只，雌雄兩性，體質(zhì)量1.5～2.0 kg，由沈陽(yáng)藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證編號(hào)：SCXK（遼）2009-0002。遼寧省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證編號(hào)：0006052。動(dòng)物一般狀態(tài)良好，皮毛光澤，進(jìn)食與活動(dòng)正常。

1.2試劑與儀器通脈降濁顆粒組成：柴胡15 g，黃芩15 g，法半夏10 g，枳實(shí)15 g，白芍20 g，大黃10 g，澤瀉15 g，丹參15 g，茯苓20 g，甘草10 g。通脈降濁實(shí)際的供試品是通脈降濁處方的提取物。性狀呈棕黃色，每克相當(dāng)于生藥3.42 g。由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)中心制劑室提供，提供的供試品是經(jīng)中心制劑室配制成的實(shí)驗(yàn)所需濃度的混懸液。血脂康膠囊（批號(hào)：200511119），0.3 g/粒，由北京北大維信生物科技有限公司生產(chǎn)。RT-PCR引物及試劑：TRIzol（加拿大Bio Basic Inc.）；TaKaRa RNA PCR Kit（AMV）Ver. 3.0試劑盒（TaKaRa大連寶生物公司）；DNA Marker DL2000（TaKaRa公司）；ICAM-1引物（由TaKaRa大連寶生物公司合成）；NF-κB引物（由TaKaRa大連寶生物公司合成）。CHOL、TG、HDL-C試劑盒購(gòu)置北京中生生物工程高技術(shù)公司。主要儀器包括全自動(dòng)生化分析儀，型號(hào)：7600—020，日立高新技術(shù)（上海）國(guó)際貿(mào)易有限公司。奧林巴斯BX51顯微鏡。MDF-382E超低溫冰箱，Heidolph DIAX90型勻漿機(jī)（德國(guó)，Heidolph），Biometra Tpersona1 PCR擴(kuò)增儀（德國(guó)），Chemi Imager 5500型電泳成像分析儀（美國(guó)Alpha公司），垂直板電泳裝置（美國(guó)Bio-Rad公司），多功能電泳儀，DYY-40B型轉(zhuǎn)印電泳槽，722型分光光度計(jì)。

1.3分組與造模參考文獻(xiàn)［5-6］，家兔給予高脂飼料120 g/d，連續(xù)10周。高脂飼料的配比按照基礎(chǔ)飼料78.5%、蛋黃粉10%、膽固醇1.5%、豬油10%的比例加工成高脂顆粒飼料。實(shí)驗(yàn)兔配合飼料（基礎(chǔ)飼料），購(gòu)于北京華阜康生物科技股份公司。蛋黃粉購(gòu)于大連綠雪有限公司（批號(hào)：20110528）。膽固醇購(gòu)于安徽天啟化工科技有限公司（批號(hào)：20110913）。豬油紅楓葉精煉豬油購(gòu)于廣州市加益食品有限公司（生產(chǎn)日期：2011年10月31日）。將45只家兔置于室溫為18～24℃、濕度為50%～60%的環(huán)境中，每只獨(dú)籠喂養(yǎng)，糞便每日清理，環(huán)境每日消毒。按照雄雌的順序隨機(jī)分為5組（隨機(jī)數(shù)字表法），包括空白組、模型組、血脂康組、通脈降濁組、通脈降濁高劑量組（通高組），將雄性標(biāo)注為單號(hào)，雌性標(biāo)注為雙號(hào)。實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)1）空白組第1周開(kāi)始給予普通飼料120 g/d。2）模型組：第1周開(kāi)始高脂飼料喂養(yǎng)至10周末實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束。3）血脂康組：在喂飼AS模型組飼料基礎(chǔ)上，第1周給予血脂康0.1 g/（kg·d），至10周末實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束。4）通脈降濁組：造模第1周開(kāi)始分別給予通脈降濁的供試品，劑量為3.51 g/（kg·d）［（12 g生藥/（kg·d）］，至10周末實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束。5）通高組：造模第1周開(kāi)始給予通脈降濁的供試品，劑量為10.5 g/（kg·d）［（36 g生藥/（kg·d）］，至10周末實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束。實(shí)驗(yàn)周期中，每組家兔自由飲水。每周家兔稱(chēng)質(zhì)量1次，根據(jù)體質(zhì)量調(diào)整家兔灌胃劑量。每日飲水不限，每日觀(guān)察動(dòng)物進(jìn)食和行為變化，定期抽血。

1.4觀(guān)察指標(biāo)一般情況：每日觀(guān)察動(dòng)物進(jìn)食和行為變化，定期稱(chēng)體質(zhì)量。主動(dòng)脈標(biāo)本取材與觀(guān)察方法：實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束后，配制20%烏拉坦溶液，4 mL/kg腹腔注射，淺麻醉后剖開(kāi)腹部，從主動(dòng)脈的起始部到髂總動(dòng)脈分叉處止，將主動(dòng)脈逐漸剝離，摘取整條動(dòng)脈，縱行剖開(kāi)，置于10%的甲醛溶液固定24 h。油紅O染色，斑塊呈紅色，血管內(nèi)膜為透明淡粉色，肉眼觀(guān)察動(dòng)脈斑塊病變并用相機(jī)拍照。主動(dòng)脈病變光鏡下觀(guān)察，從主動(dòng)脈起始部剪下0.5 cm動(dòng)脈組織，常規(guī)石蠟包埋切片，HE染色，40×高光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行主動(dòng)脈病理觀(guān)察。血液生化指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后由心腔穿刺法取血測(cè)血清總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）。RT-PCR檢測(cè)ICAM-1、NF-κB mRNA含量表達(dá)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，取主動(dòng)脈組織塊，Trizol一步法提取主動(dòng)脈組織總RNA，并進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。計(jì)量資料以（±s）表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，兩組間比較采用成組t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組家兔一般情況比較實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，各組動(dòng)物精神狀態(tài)良好，毛色光澤，進(jìn)食及活動(dòng)正常。各組體質(zhì)量增加分別為：空白組（0.85±0.10）kg，模型組（1.0± 0.22）kg，血脂康組（0.9±0.15）kg，通脈降濁組（0.97± 0.11）kg，通高組（0.90±0.13）kg，各組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)空白組、通脈高劑量組因腹瀉各死亡家兔1只，模型組1只家兔因抽血時(shí)固定過(guò)緊窒息死亡，1只家兔因肺內(nèi)感染、血脂康組有2只家兔肺內(nèi)感染死亡、通脈降濁組1只因腹瀉死亡，1只不明原因死亡，死后經(jīng)尸檢，排除心血管系統(tǒng)疾病，懷疑患有其他某種慢性疾病而致。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)動(dòng)物數(shù)量：空白組8只、模型組7只、血脂康組7只、通脈降濁組7只、通高組8只。

2.2各組家兔主動(dòng)脈大體病變的比較見(jiàn)圖1。空白組家兔主動(dòng)脈內(nèi)膜光滑，無(wú)斑點(diǎn)及條狀隆起。模型組可見(jiàn)不同程度的紅色斑塊呈點(diǎn)、條狀隆起，病變以主動(dòng)脈弓最嚴(yán)重，融合成片，凸向管腔。血脂康組可見(jiàn)點(diǎn)狀紅色斑塊，偶見(jiàn)隆起，未見(jiàn)條索樣改變。通脈降濁組：可見(jiàn)散在點(diǎn)狀紅色斑塊，偶見(jiàn)細(xì)條狀隆起。通高組：內(nèi)膜光滑，偶見(jiàn)散在點(diǎn)狀紅色斑塊無(wú)隆起。

圖1　主動(dòng)脈斑塊染色后大體觀(guān)察（HE，×40）

2.3各組家兔主動(dòng)脈斑塊面積比較見(jiàn)表1。與空白組比較，模型組斑塊面積百分比顯著升高（P＜0.01）。通脈降濁組及通脈降濁高劑量組與模型組比較，斑塊面積百分比均顯著降低（P＜0.01）；通脈降濁高劑量組與血脂康組比較，斑塊面積百分比均顯著降低（P＜0.01）。

2.4藥物對(duì)AS家兔主動(dòng)脈病理學(xué)影響見(jiàn)圖2。與空白組比較，模型組內(nèi)膜明顯增厚，管腔狹窄，嚴(yán)重水腫，大量泡沫細(xì)胞形成，可見(jiàn)大塊脂質(zhì)斑塊向管腔凸出，平滑肌細(xì)胞排列紊亂，大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；血脂康組可見(jiàn)輕微內(nèi)膜水腫，少量的內(nèi)皮細(xì)胞泡沫樣改變及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，平滑肌細(xì)胞排列較規(guī)則。通脈降濁組：可見(jiàn)內(nèi)膜較光滑，偶見(jiàn)管壁各別部位有輕微的水腫，少量的內(nèi)皮細(xì)胞泡沫樣改變，平滑肌細(xì)胞排列較規(guī)則，仍可見(jiàn)增生的炎性細(xì)胞。通脈降濁高劑量組：可見(jiàn)內(nèi)膜光滑，無(wú)水腫，偶見(jiàn)個(gè)別內(nèi)皮細(xì)胞輕微泡沫樣改變，平滑肌細(xì)胞排列較規(guī)則，偶見(jiàn)增生的炎性細(xì)胞。

表1　各組家兔主動(dòng)脈斑塊面積比較（）

表1　各組家兔主動(dòng)脈斑塊面積比較（）

與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，；與模型對(duì)照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；與血脂康組比較，#P＜0.05。下同。

組別n正常對(duì)照組8模型對(duì)照組7血脂康組7斑塊面積占主動(dòng)脈面積的百分比（%）3.38±2.44 79.62±4.36**26.72±20.24△△通脈降濁組730.64±16.08△△通脈降濁高劑量組821.74±9.54△△#

圖2　光鏡下主動(dòng)脈病理結(jié)果（HE，×40）

2.5各組家兔血脂水平的比較見(jiàn)表2。與空白組比較，模型組TC、TG、LDL-C、HDL-C水平顯著升高（P＜0.01）；通脈降濁兩組與模型組比較，TG水平均有顯著下調(diào)（P＜0.05），與血脂康組無(wú)顯著性差異；與血脂康組比較，通脈降濁高劑量組對(duì)血清TC以及LDLC水平有明顯的降低作用（P＜0.05）。

2.6各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物ICAM-1、NF-κB表達(dá)比較見(jiàn)圖3和表3。ICAM-1 mRNA表達(dá)：空白組幾乎無(wú)表達(dá)；血脂康組、通脈降濁組和通脈降濁高劑量組與模型組比較明顯降低（P＜0．01）；通高組與血脂康組比較明顯降低（P＜0．05）；通脈降濁正常劑量組與血脂康組比較ICAM-1 mRNA表達(dá)減少（P＜0．05）；通脈降濁高劑量組與血脂康組比較表達(dá)明顯減少（P＜0．01）。NF-κB mRNA表達(dá)：空白組幾乎無(wú)表達(dá)；血脂康組、通脈組和通高組與模型組比較明顯降低（P＜0．01）；通高組與血脂康組比較明顯降低（P＜0．05）；通脈降濁正常劑量組與血脂康組比較ICAM-1mRNA表達(dá)減少（P＜0．05）；通脈降濁高劑量組與血脂康組比較表達(dá)明顯減少（P＜0．01）。

表2　血脂檢測(cè)結(jié)果（mmol/L，）

表2　血脂檢測(cè)結(jié)果（mmol/L，）

LDLHDL 0.7±0.41.0±0.3 42.9±7.3△△3.2±0.7△△41.2±7.43.9±0.7通脈降濁組788.2±16.911.9±6.9*42.9±6.04.2±1.1通脈降濁高劑量組881.7±13.3*＃9.8±9.0*34.5±6.4*＃3.3±0.4組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組血脂康組nTCTG 82.0±0.81.0±0.4 799.0±15.3△△20.9±5.4△△785.3±16.77.3±5.5**

圖3　RT-PCR測(cè)定AS家兔ICAM-1、NF-κB mRNA表達(dá)瓊脂糖凝膠電泳圖

表3　RT-PCR測(cè)定AS家兔ICAM-1、NF-κB mRNA表達(dá)的灰度值比值比較（）

表3　RT-PCR測(cè)定AS家兔ICAM-1、NF-κB mRNA表達(dá)的灰度值比值比較（）

與血脂康組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.01。

nICAM-1NF-κB 80.2447±0.01390.1623±0.01585 70.7749±0.01940.5617±0.0208 70.5313±0.0171△0.3341±0.0180△通脈降濁組70.4550±0.0227*△0.3012±0.0170*△通脈降濁高劑量組80.6514±0.0626**△0.3848±0.0222*△組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組血脂康組

3　討論

血脂代謝紊亂是誘導(dǎo)AS發(fā)生的最主要危險(xiǎn)因素之一。Framinghan研究等在內(nèi)的許多研究已證實(shí)血脂異常是公認(rèn)的動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。研究表明AS斑塊中存在大量的膽固醇；冠狀動(dòng)脈疾病患者血漿總的、游離的及酯化的膽固醇及血漿磷脂水平明顯高于健康人［7］。血TC水平增加10%，冠心病發(fā)病率增加20%～30%［8］，HDL-C含量每降低1 mg/d，冠心病發(fā)病率增加3%～4%［9］。

炎癥不僅參與了動(dòng)脈粥樣硬化的啟動(dòng)，而且參與動(dòng)脈粥樣硬化的全過(guò)程，Ross教授明確提出“AS是一種炎癥性疾病”。在A(yíng)S形成的初始階段，ICAM-1在活性?xún)?nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)是循環(huán)白細(xì)胞聚集浸潤(rùn)引起一定部位組織損傷和炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵。許多實(shí)驗(yàn)已證實(shí)在動(dòng)脈粥樣硬化中血管的內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞上均出現(xiàn)大量而持久的ICAM-1的表達(dá)。由于細(xì)胞黏附分子幾乎參與單核細(xì)胞浸潤(rùn)與遷移的整個(gè)過(guò)程，而前者又受NF-κB調(diào)控，故有學(xué)者認(rèn)為NF-κB是AS發(fā)生的始動(dòng)機(jī)制之一［10］。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為血瘀是冠心病最為重要的病因病機(jī)之一，貫穿整個(gè)疾病發(fā)生發(fā)展的全過(guò)程。筆者認(rèn)為冠心病病機(jī)規(guī)律不僅僅在于瘀血阻滯心脈，更多的是與痰瘀互結(jié)、變生濁毒密切相關(guān)，是一個(gè)動(dòng)態(tài)發(fā)展變化的過(guò)程。痰濁內(nèi)阻是誘導(dǎo)冠心病的首要因素。其病理表現(xiàn)更多地體現(xiàn)在血脂代謝紊亂方面。痰濁內(nèi)阻，礙氣阻絡(luò)，可影響血液正常運(yùn)行，致使血行滯緩而停蓄，日久為瘀，主要表現(xiàn)在血液流變性方面的異常改變；瘀血形成之后，既無(wú)以載氣，亦阻礙氣機(jī)，影響氣對(duì)津液之輸布、宣化，導(dǎo)致津液凝聚而成痰飲，出現(xiàn)痰瘀互結(jié)的病變過(guò)程。疾病中、后期兩者常多以兼夾為病，或內(nèi)結(jié)生毒，其病理表現(xiàn)則主要體現(xiàn)在炎性因子浸潤(rùn)方面。毒傷氣血，壅滯氣機(jī)，敗傷血分，損傷心脈，毒邪灼傷脈壁及斑塊，使脈壁破損、斑塊脫落，形成血栓，戕害其他臟腑組織，最終形成痰、瘀、毒共同致病的病機(jī)特點(diǎn)。臨床上此型患者可見(jiàn)胸悶、胸痛、肢體沉重、口苦口臭或口舌生瘡，大便秘結(jié)，舌紅苔黃厚膩，脈滑數(shù)等痰瘀互結(jié)，兼具熱毒內(nèi)蘊(yùn)的征象，病程纏綿，反復(fù)不愈［11］。

通脈降濁顆粒的組方源自仲景名方大柴胡湯，主治少陽(yáng)兼陽(yáng)明里熱證，具有疏利肝膽、通腑泄熱的功效。方中柴胡輕清，長(zhǎng)于宣透，可疏解少陽(yáng)郁滯，助少陽(yáng)之氣外達(dá)；黃芩苦寒，善于清胸中郁熱，清少陽(yáng)之火于里；半夏燥濕開(kāi)結(jié)氣，合生姜、大棗共調(diào)中焦脾胃，降逆止嘔；大黃苦寒瀉下，既能泄熱破結(jié)，在氣分蕩滌邪熱，使阻滯之氣機(jī)通暢；更能泄熱化瘀，去血分邪熱，使蓄留之瘀血化解，化生新血，以達(dá)氣血雙調(diào)的目的。大黃配枳實(shí)一者清泄熱結(jié)，一者開(kāi)暢結(jié)氣，通暢膽腑氣分郁熱；大黃配芍藥兩味血分藥相配，不僅能清氣分熱結(jié)，亦可治療血分熱結(jié)。諸藥合用，標(biāo)本同治，使脾能健運(yùn)，肝得條達(dá)，濕痰無(wú)滋生之源，肝絡(luò)無(wú)瘀阻之患，脂肪無(wú)蓄積之實(shí)，故獲良效［12］?，F(xiàn)代藥理研究證實(shí)，大柴胡湯能改善血脂代謝和血液流變性，既可疏通微循環(huán)促進(jìn)免疫復(fù)合物的消除，又能降低肝內(nèi)血脂含量以阻止脂肪積蓄和纖維化的發(fā)生；其中柴胡皂苷可作用于脂肪代謝的不同環(huán)節(jié)；黃芩具有抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖等作用［13］；實(shí)驗(yàn)證明大黃醇提劑使高質(zhì)飼料所致動(dòng)脈粥樣模型家兔血清三酰甘油、總膽固醇、LDL水平明顯下降，主動(dòng)脈脂質(zhì)粥樣斑塊病變程度隨劑量升高而減輕［14］。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，大柴胡湯在臨床不乏用于治療脂質(zhì)代謝疾病、心血管疾病等［15］，可改善高脂血癥所致的動(dòng)脈內(nèi)皮和平滑肌損傷［16］；可抑制血小板聚集，減少AS模型主動(dòng)脈內(nèi)膜脂質(zhì)斑塊面積及斑塊厚度，顯著減輕血管平滑肌細(xì)胞的增生［17］，并為動(dòng)脈硬化的治療指導(dǎo)方向［18］。本研究通脈降濁顆粒是在大柴胡湯基礎(chǔ)上，去生姜、大棗，加入適當(dāng)活血化瘀等藥物而成，通過(guò)和解少陽(yáng)、內(nèi)瀉熱結(jié)奏疏肝理氣、通腑瀉濁、調(diào)理脾胃、化痰祛瘀之功效，體現(xiàn)了攻補(bǔ)兼施、痰瘀毒共治的特點(diǎn)，較原方調(diào)脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化作用更具優(yōu)勢(shì)。

本研究在前期預(yù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型研究的基礎(chǔ)之上，采用高脂飼料喂養(yǎng)建立家兔AS模型，探討通脈降濁顆粒抗AS家兔的調(diào)脂的作用。研究結(jié)果顯示，通脈降濁治療組及血脂康組內(nèi)膜均較模型組光滑，斑塊面積及厚度較模型組小，泡沫細(xì)胞數(shù)量及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)較少，其抗AS程度與通脈降濁組方劑量水平呈正相關(guān)。在血脂水平方面，通脈降濁顆粒兩個(gè)劑量組均具有降低血清TG、LDL-C的作用，以通脈降濁高劑量組降脂效果為最優(yōu)，與血脂康組比較無(wú)明顯差異。在抑制炎癥方面，通脈降濁顆粒能夠使斑塊處的ICAM-1和NF-κB mRNA表達(dá)顯著減少，與血脂康比較，效果較佳或與其相當(dāng)，提示通脈降濁顆粒對(duì)血管內(nèi)膜有一定的保護(hù)作用，對(duì)斑塊處的ICAM-1和NF-κBmRNA表達(dá)有一定的抑制作用，提示其可能通過(guò)抑制炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)而起到延緩AS斑塊的形成的作用。

綜合上述，通過(guò)與血脂康的比較可以看出，中藥以祛痰化瘀、通腑泄?jié)釣榍腥朦c(diǎn)對(duì)于A(yíng)S家兔的抑制作用顯示出一定優(yōu)勢(shì)，間接證明痰濁、瘀血、濁毒相互影響促進(jìn)AS斑塊的發(fā)生和發(fā)展，是冠心病的關(guān)鍵病機(jī)所在。因此筆者認(rèn)為通脈降濁顆?？赡芫哂歇?dú)立的多靶點(diǎn)抗AS的效應(yīng)，但是針對(duì)其抗AS的干預(yù)機(jī)制還有待于進(jìn)一步的研究。

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The Effects of Tongmai Jiangzhuo Particles on Lipid Metabolism and Related Inflammatory Cytokine Expression in Rabbits with Atherosclerosis

Expression in Rabbits with Atherosclerosis
SONG Xiaoliang，WANG Shuai，WANG Fengrong.
The Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Liaoning，Shenyang 110032，China

Objective：To investigate the effects of Tongmai Jiangzhuo Particles on lipid metabolism and related inflammatory cytokine expression in rabbits with atherosclerosis to state further the possible mechanism of AS disease prevention.Methods：45 rabbits were randomly divided into the control group，the model group，Xuezhikang group，Tongmai Jiangzhuo group（TMM）and high-dose group（TMH），9 in each group.Rabbits were fed with high fat diet for 10 weeks to build AS model.The control group received normal saline；Xuezhikang group was given Xuezhikang 0.1 g/（kg·d）；Tongmai Jiangzhuo group and high dose group were given Tongmai Jiangzhuo of the test，doses of 3.51 g/（kg·d）［12 g crude drug/（kg·d）］and 10.5 g/（kg·d）［36 g crude drug/（kg·d）］for 10 weeks，and aorta pathology was observed in rabbits in each group to detect lipid profile and inflammatory infiltration，as well as ICAM-1，NF-κB mRNA expression of rabbit aorta.Results：Aortic pathology showed that plaque area and thickness of rabbits aorta in Tongmai Jiangzhuo group and Xuezhikang group was smaller than that of the model group，the number of foam cells and inflammatory cell infiltration less.With the dose of Tongmai Jiangzhuo increasing，pathological change became small.Lipid results showed that both groups of Tongmai Jiangzhuo particles play a significant role in reducing serum TG（P＜0.05）.There was an obvious reduce of serum TC and LDL in high dose group（P＜0.05），and few effect on HDL.ICAM-1，NF-κBmRNA and protein expression of Xuezhikang group and Tongmai Jiangzhuo group were significantly lower than those of the model group（P＜0.01）. Conclusion：Tongmai Jiangzhuo particles plays a significant role in lowering blood lipids，and by inhibiting the expression ICAM-1 and NF-κB in rabbit aorta，has an effect on the delay of the formation of AS plaque and in-flammatory cell infiltration.

Atherosclerosis；Tongmai Jiangzhuo particles；Lipid metabolism；Inflammation

R285.5

A

1004-745X（2015）12-2082-05

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.12.005

2015-08-08）

北京市教育委員會(huì)科技計(jì)劃面上項(xiàng)目（KM201410025014）；首都中醫(yī)藥研究專(zhuān)項(xiàng)（13ZY01）

（電子郵箱：xulp@ccmu.edu.cn）

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遼寧省衛(wèi)生計(jì)生委項(xiàng)目—遼寧省省直醫(yī)院改革重點(diǎn)臨床科室診療能力建設(shè)項(xiàng)目（LNCC-C01-2015）

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（電子郵箱：ws821027@126.com）