調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞表達(dá)與分泌趨化因子與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系

謝 平

（廣東省佛山市順德區(qū)桂洲醫(yī)院，廣東 佛山 528305）

調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞表達(dá)與分泌趨化因子與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系

謝 平

（廣東省佛山市順德區(qū)桂洲醫(yī)院，廣東 佛山 528305）

目的 分析RANTES（調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞表達(dá)與分泌趨化因子）在子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)病中的作用與價(jià)值。方法 選取2012年2月至2014年2月于我院接受治療的40例子宮內(nèi)膜異位癥患者為觀察組，同時(shí)選取同期于我院接受宮內(nèi)節(jié)育器（IUD）治療的20例正常子宮內(nèi)膜患者為對(duì)照組，檢測(cè)兩組患者子宮內(nèi)膜標(biāo)本中RANTES的表達(dá)水平。結(jié)果 經(jīng)受IL-1β刺激2 d、3 d后觀察組患者病理標(biāo)本細(xì)胞中RANTES蛋白表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，同時(shí)觀察組患者病理標(biāo)本細(xì)胞上清液對(duì)單核細(xì)胞的趨化指數(shù)呈明顯上升趨勢(shì)，與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05）。結(jié)論 子宮內(nèi)膜異位癥患者RANTES蛋白表達(dá)水平的差異是導(dǎo)致子宮內(nèi)膜異位病灶形成的重要原因，需在臨床上引起廣泛重視。

RANTES；子宮內(nèi)膜異位癥；調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞；趨化因子

子宮內(nèi)膜異位癥多發(fā)于生育年齡婦女群體中，據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì)資料顯示，其發(fā)病率高達(dá)15%左右，臨床多表現(xiàn)為痛經(jīng)、盆腔包塊、性交痛等癥狀，且超過50%的患者可能出現(xiàn)不孕等表現(xiàn)［1］，對(duì)患者的身心健康可能造成嚴(yán)重威脅。目前臨床上對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病原因尚不明確。大量研究觀點(diǎn)表明，子宮內(nèi)膜異位癥是多項(xiàng)因素相互作用所致，且與人體調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞表達(dá)及分泌趨化因子的作用存在一定的相關(guān)性［2］?；诖?，為進(jìn)一步分析RANTES與子宮內(nèi)膜異位癥的相關(guān)性，我院對(duì)近年來收治的40例患者進(jìn)行了研究，報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：選取2012年2月至2014年2月于我院接受治療的40例子宮內(nèi)膜異位癥患者為觀察組。所有患者均行腹腔鏡手術(shù)治療，均為女性，年齡在25～44歲，平均年齡為（35.4±2.1）歲；按照美國(guó)生育協(xié)會(huì)修訂的腹腔鏡診斷內(nèi)異癥（rAFS）的分期標(biāo)準(zhǔn)將其分為Ⅰ期14例，Ⅱ期19例，Ⅲ期7例。選取同期于我院接受IUD治療的20例正常子宮內(nèi)膜者為對(duì)照組，年齡24～43歲，平均年齡為（34.9±1.8）歲。入選研究的兩組對(duì)象在性別、年齡等基礎(chǔ)資料的對(duì)比方面并不存在顯著差異（P＞0.05），具有較強(qiáng)的可比性。

1.2方法：①標(biāo)本處理：觀察組患者于手術(shù)治療過程中取患者異位囊腫壁病理組織，面積控制在2 cm×2 cm左右。對(duì)照組對(duì)象則于無菌操作下，刮取子宮內(nèi)膜。并于兩組標(biāo)本中分別置入鏈霉素與青霉素行細(xì)胞培養(yǎng)。②實(shí)驗(yàn)方法：觀察組標(biāo)本采用洗滌液沖洗2次后，將其體積剪碎至1 mm×1 mm×1 mm。并注入1.25 g/LⅠ型膠酶，于37 ℃溫度條件下，消化1 h，后過濾，離心5 min，待細(xì)胞沉淀后重復(fù)培養(yǎng)洗滌。采用玻片法，對(duì)加波形蛋白行免疫組化染色處理，隨后鑒定標(biāo)本間質(zhì)細(xì)胞的純度。將細(xì)胞接種于孔板中，待融合度高達(dá)90%時(shí)，加入低血清培養(yǎng)2 d，并于培養(yǎng)液中加入濃度為10 μg/L的白細(xì)胞介素-1β（IL-1β），持續(xù)培養(yǎng)，分別于1 d、2 d及3 d后收集標(biāo)本上清及細(xì)胞液，行常規(guī)檢測(cè)處理。采取組織和細(xì)胞總RNA提取法（TRIzol）將細(xì)胞總RNA提取出，并實(shí)施擴(kuò)增處理，采用內(nèi)參條帶光密度與特異擴(kuò)增條帶為參數(shù)實(shí)施半定量分析處理。同時(shí)采用酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法測(cè)定標(biāo)本上清中RANTES表達(dá)水平。采用小室實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)標(biāo)本間質(zhì)細(xì)胞上清液對(duì)其單核細(xì)胞的趨化活性水平。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析，計(jì)量資料選用（）表示，組間對(duì)比進(jìn)行t檢驗(yàn)，以P＜0.05時(shí)為有顯著性差異和統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié) 果

2.1兩組患者病理標(biāo)本中RANTES蛋白表達(dá)水平對(duì)比：經(jīng)IL-1β刺激1 d后，觀察組與對(duì)照組細(xì)胞內(nèi)RANTES蛋白表達(dá)水平并無顯著差異（P＞0.05）；2 d、3 d后觀察組患者病理標(biāo)本細(xì)胞中RANTES蛋白表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，組間對(duì)比差異顯著（P＜0.05），見表1。

表1　兩組患者病理標(biāo)本中RANTES蛋白表達(dá)水平對(duì)比［（），ng/L］

表1　兩組患者病理標(biāo)本中RANTES蛋白表達(dá)水平對(duì)比［（），ng/L］

組別　　例數(shù)　RANTES蛋白水平1 d　2 d　3 d觀察組　40　50.89±7.25　133.61±9.42266.88±8.39對(duì)照組　20　45.71±8.62　47.45±9.95　51.76±8.61 t -0.987　29.527　42.986 P -　　＞0.05　?。?.05　?。?.05

2.2兩組標(biāo)本單核細(xì)胞趨化活性檢測(cè)結(jié)果對(duì)比：在經(jīng)受IL-1β刺激3 d后，觀察組患者病理標(biāo)本細(xì)胞上清液對(duì)單核細(xì)胞的趨化指數(shù)呈明顯上升趨勢(shì)，與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），見表2。

表2　兩組患者病理標(biāo)本單核細(xì)胞趨化活性檢測(cè)結(jié)果對(duì)比（）

表2　兩組患者病理標(biāo)本單核細(xì)胞趨化活性檢測(cè)結(jié)果對(duì)比（）

組別　　例數(shù)　　透膜細(xì)胞數(shù)　　趨化指數(shù)觀察組　40　63.62±2.61　12.73±0.62對(duì)照組　20　10.91±3.10　2.17±0.64 t -15.677　9.649 P -＜0.05　?。?.05

3　討 論

近年來有大量研究文獻(xiàn)證實(shí)，子宮內(nèi)膜異位癥患者其異位子宮內(nèi)膜的黏附、侵襲伴隨著人體激素的變化而產(chǎn)生相關(guān)的炎性反應(yīng)，同時(shí)也是患者子宮內(nèi)膜異位病灶形成的重要原因［3］。但臨床上對(duì)逆流經(jīng)血在人體子宮內(nèi)膜碎片中發(fā)揮的作用尚且存在一定的爭(zhēng)議。有部分觀點(diǎn)認(rèn)為，子宮內(nèi)膜異位癥患者其在位內(nèi)膜可能發(fā)生形態(tài)及基因表達(dá)方面的變化，但在子宮內(nèi)膜逆流于人體腹腔后，可能導(dǎo)致大量細(xì)胞因子的表達(dá)異常，導(dǎo)致子宮內(nèi)膜避開人體的免疫監(jiān)視反應(yīng)，進(jìn)而促使其種植、繁衍，引起子宮內(nèi)膜異位癥的產(chǎn)生［4］。

調(diào)節(jié)活化T細(xì)胞與分泌趨化因子是趨化因子CC亞家族中的代表因子之一，主要由人體巨噬細(xì)胞、活性T細(xì)胞及子宮內(nèi)膜細(xì)胞分泌而出，表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、T細(xì)胞及嗜酸粒細(xì)胞中。并通過與相關(guān)受體結(jié)合，參與到免疫細(xì)胞的活化反應(yīng)，并在機(jī)體的炎性反應(yīng)中起到關(guān)鍵的作用。有部分研究表示，子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔液中嗜酸粒及巨噬細(xì)胞的數(shù)量、RANTES蛋白表達(dá)水平顯著高于正常對(duì)照組，與本組實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果基本一致［5］。RANTES蛋白因子是人體巨噬細(xì)胞中特異性較高的激活因子之一，并經(jīng)由輸卵管逆流至人體腹腔，與活化細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，分泌出炎性介質(zhì)，促使人體內(nèi)異位子宮內(nèi)膜的生成，導(dǎo)致病灶的形成。本組研究中通過對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥與正常子宮內(nèi)膜患者進(jìn)行對(duì)照分析，結(jié)果提示，經(jīng)受IL-1β刺激2 d、3 d后觀察組患者病理標(biāo)本細(xì)胞中RANTES蛋白表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，同時(shí)觀察組患者病理標(biāo)本細(xì)胞上清液對(duì)單核細(xì)胞的趨化指數(shù)呈明顯上升趨勢(shì)，與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），同時(shí)也進(jìn)一步證實(shí)子宮內(nèi)膜異位癥患者RANTES蛋白表達(dá)水平的差異是導(dǎo)致子宮內(nèi)膜異位病灶形成的重要原因，需在臨床上引起廣泛重視。

［1］范小斌，曹引麗，藺小賢，等.RANTES在子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜的表達(dá)及其意義［J］.實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2012，28（12）：1035-1038.

［2］吳亞玲，郝敏.趨化因子在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制中的作用［J］.國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志，2009，36（5）：352-355.

［3］黃紅藝，張鳳蘭，張團(tuán)英，等.CXCL10在子宮內(nèi)膜異位癥患者血清及腹腔液的表達(dá)及意義［J］.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2011，27（8）：1394-1395.

［4］林敏，王溢，董克，等.子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔液中NF-κB和趨化因子MCP-1、RANTES的表達(dá)［J］.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2014，11（4）：577-579.

［5］高桂芹，林琬君，李寶森，等.子宮內(nèi)膜異位癥患者血清與腹腔液中RANTES水平及其臨床意義［J］.天津醫(yī)藥，2013，21（7）：654-657.

R711.71

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1671-8194（2015）26-0057-02