TPPA和TRUST聯(lián)合檢測在梅毒診斷中的應(yīng)用

王文忠

【摘要】目的：評價TRUST與TPPA兩種聯(lián)合檢測方法在梅毒診斷中的應(yīng)用。方法：用TPPA和TRUST兩種方法同時檢測我院2013年1——12月958例門診及住院患者血清標(biāo)本中的梅毒螺旋體抗體，同時進(jìn)行TRUST滴度測定，并對比檢測結(jié)果。結(jié)果：對所有例數(shù)進(jìn)行檢測后，TPPA特異性為99.99%，TRUST特異性為98.85%，TPPA檢測陽性率明顯優(yōu)于TRUST，差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義p<0.05。結(jié)論：TPPA法優(yōu)于TRUST法，可以作為梅毒的確證實驗，TRUST可作為療效觀察，判定復(fù)發(fā)或再感染指征。兩種方法聯(lián)合使用在檢測梅毒診斷中具有重要的臨床意義。

【關(guān)鍵詞】TPPA；TRUST；梅毒診斷

【中圖分類號】R759.1【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1005-0019（2015）01-0098-01

梅毒是由蒼白（梅毒）螺旋體感染引起的一種傳播疾病。梅毒在感染人體后會產(chǎn)生特異性抗體、非特異性抗體，這些都是梅毒螺旋體在宿主細(xì)胞的類脂質(zhì)和表面脂質(zhì)產(chǎn)生的抗體，相關(guān)報告如下。

1.資料和方法

1.1一般資料

本組選擇我院于2014年1—12月958例疑似梅毒患者，其中男504例，年齡18～59歲，女454例，年齡17～60歲。將其隨機分為對照組、觀察組，每組各479例，兩組患者病程、年齡等比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義P>0.05。

1.2主要試劑

我們采用上海榮盛生物藥業(yè)有限公司提供的梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗診斷試劑（TRUST）和日本富士株式會社生產(chǎn)的TPPA試劑。所有血清樣本均按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》與試劑說明書操作。

1.3方法

TRUST實驗檢測梅毒非特異性抗體時，在實驗卡漆圈內(nèi)加入待檢血清50ul，在圈中均勻涂開，并且用生理鹽水50ul將50ul血清作倍比稀釋作滴度試驗（為避免前帶反應(yīng)，滴度至少作到1：8），在每個漆圈內(nèi)加入TRUST試劑17ul，置于水平旋轉(zhuǎn)儀上以100R/Min頻率水平混勻8分鐘，判讀實驗結(jié)果[2]。

做TPPA實驗檢測特異性抗體時，在U型反應(yīng)板的第1—4孔中分別加入100、25、25、25ul血清稀釋液，取待檢血清25ul加入第1孔中，充分混勻后吸取25ul加入第2孔，再混勻，倍比稀釋直至第4孔，最后吸取25ul棄去，用專用滴管在第3孔中加入未致敏粒子1滴，在第4孔中致敏粒子1滴，微涼振蕩器震蕩均勻后，室溫加蓋水平靜置兩小時，觀察結(jié)果。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)軟件對上述治療進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析，計量資料用卡方檢驗，確定P<0.05差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2、結(jié)果

2.1對958份樣品用TPPA和TRUST聯(lián)合檢測結(jié)果見表1，其中TPPA檢測法特異性為99.99%；TRUST檢測法特異性為98.85%。敏感度均為100%，TPPA檢測陽性率明顯優(yōu)于TRUST，差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義p<0.05。

3、討論

人體感染梅毒螺旋體后約6周可以檢測出某些非特異性抗體，反應(yīng)素，如卵脂質(zhì)、心脂質(zhì)等抗梅毒螺旋體破壞患者組織后釋放出的某些物質(zhì)抗體[3]。另外一種抗梅毒螺旋體產(chǎn)生的特異性抗體感染2周即可復(fù)查出。TRUST主要檢測的是非特異性抗體，操作較簡單，反應(yīng)時間短，結(jié)果容易判讀，但該實驗方法的假陽性率較高，如肝炎、妊娠、及某些自身免疫性疾病均可引起該實驗假陽性，很容易出現(xiàn)漏診和誤診[4]。TPPA敏感性高，且患者一旦患有梅毒即使經(jīng)過正規(guī)的治療，往往終身陽性，TPPA不適合于對梅毒的療效評估、復(fù)發(fā)和再感染的診斷。而TRUST檢測可以作為療效觀察以及復(fù)發(fā)和再感染的指標(biāo)，當(dāng)血清滴度升高4倍或者高滴度（≥1：8）者，結(jié)合臨床檢測結(jié)果應(yīng)當(dāng)給予及時的治療[5]。

TRUST檢測實驗中，常常會出現(xiàn)TRUST1：1陰性或弱陽性，而隨著血清稀釋倍數(shù)的增加，反應(yīng)強度卻隨著升高，即“前帶反應(yīng)”。試驗中出現(xiàn)帶現(xiàn)象是因為抗原或抗體過量的關(guān)系，通常抗原過量易于發(fā)生后帶反應(yīng)，抗體過量易于發(fā)生前帶反應(yīng)。所以，在日常的TRUST及滴度檢測實驗中，為避免前帶反應(yīng)對實驗結(jié)果判讀造成誤導(dǎo)，滴度實驗至少要做到1：8。在試驗中我們發(fā)現(xiàn)TPPA檢測出陽性率高于TRUST檢測法，說明部分患者經(jīng)過治療已經(jīng)痊愈，尤其在老年人之中尤為明顯。因此，運用TPPA和TRUST聯(lián)合檢測梅毒抗體，并結(jié)合臨床進(jìn)行具體分析能夠取得很大的臨床應(yīng)用價值。

TRUST法主要用于檢測血清中的反應(yīng)素，約感染6周后可查出，對早期梅毒輔助診斷能力差，但是TRUST滴度變化和梅毒治療情況成正相關(guān)，隨著梅毒的治療，抗體滴度下降，因此，適合用于梅毒治療的療效觀察、隨訪和復(fù)發(fā)等有效診斷，對病情的評估有著重要的作用[6]。此法操作簡單，容易判讀結(jié)果，它的滴度實驗可以作為療效觀察的指標(biāo)。但影響因素多，多種疾病科出現(xiàn)反應(yīng)素導(dǎo)致假陽性結(jié)果，又由于感染梅毒后反應(yīng)素的出現(xiàn)晚于梅毒特異性抗體，晚期梅毒時反應(yīng)素又可能轉(zhuǎn)陰。TRUST法不適用于一期梅毒早期、三期梅毒，對潛伏梅毒和神經(jīng)梅毒也不敏感而導(dǎo)致假陰性結(jié)果，TRUST法不能單獨用為梅毒的臨床診斷。

梅毒特異性抗體從本質(zhì)上又可以分為IgM和IgG兩種，而以IgG形式存在的抗體是可以通過胎盤屏障進(jìn)入胎兒體內(nèi)的，所以，在診斷先天梅毒時，尤其要注意結(jié)合兩種檢測方法，同時結(jié)合患兒母親的血清學(xué)檢測結(jié)果綜合判斷，必要時要進(jìn)行病原學(xué)檢測或進(jìn)行梅毒的IgM特異性抗體檢測，只有這樣，才能對患者做出最正確的診斷。

參考文獻(xiàn)

[1]胥國強，康清秀，蒲澤宴等.四種方法檢測梅毒螺旋體抗體結(jié)果的比較及應(yīng)用評價[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，32（16）：1869—1870

[2]于春東，宋金蓮，李偉.不同檢測方法在孕婦梅毒篩選中的應(yīng)用價值和監(jiān)測意義[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2013，23（1）：140—141

[3]潘小平，洪曉綠，賴金國等.梅毒抗體不同血清學(xué)診斷方法的臨床評估[J].實驗與監(jiān)測醫(yī)學(xué)，2013，31（2）：175—177

[4]王濤，李旭等.兩種梅毒血清學(xué)檢測方法的聯(lián)合運用分析[J].中國艾滋病性病，2012，18（7）：477—477

[5]何細(xì)德，代國知，陳虹亮.應(yīng)用TPPA和TRUST試驗檢測梅毒螺旋體抗體及其臨床意義[J].實用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2011，17（6）：1199—1200

[6]曾朱君，彭瑟.TPPA和TRUST檢測梅毒螺旋體抗體的臨床意義[J].中國醫(yī)藥指南，2013，33（11）：458—459