丁香苦苷不同給藥途徑的藥物動力學(xué)研究

曲清彬　趙玉

【摘 要】本文對丁香苦苷不同給藥途徑的藥物動力學(xué)進行研究。方法：采用YMCC18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），水-甲醇-四氫呋喃（62∶34∶4），檢測波長為226nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。丁香苦苷在0.3～19.2μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。丁香苦苷平均回收率分別為96.32%。結(jié)論：家兔口服丁香苦苷單體后吸收和消除均較快，消除半衰期為0.5小時。家兔靜脈注射丁香苦苷單體在體內(nèi)吸收快，AUC隨劑量的增加而成比例的增加，靜脈給藥的絕對生物利用度為35.1%。

【關(guān)鍵詞】丁香苦苷；給藥途徑；研究

丁香葉具有祛風(fēng)除濕、止痛的功效[1-6]。丁香葉具有抗病毒作用、增強機體的體液免疫功能、抗菌、耐缺氧能力、抗氧化和抗衰老等作用。丁香葉含有酪醇、3，4-二羥基苯乙醇、對羥基肉桂酸和3，4-二羥基苯甲酸、丁香苦苷、黃柏內(nèi)酷（obaculactone）、芒柄花素（formonoraetin）、丁香酯素 （syrinaresiol）、咲喃甲酸（2-furancarboxylic acid）、D-甘露醇（D_ mannitol）等成分[7-12]。丁香苦苷有較強的利膽作用[13-15]。丁香苦苷對金黃色葡萄球菌、痢疾桿菌、大腸桿菌及綠膿桿菌均有不同程度的抑菌作用。本文對丁香苦苷不同給藥途徑的藥物動力學(xué)進行研究。

1.儀器與試藥

（1）儀器：AT-830制冷、加熱兩用色譜柱溫箱（杭州瑞析科技有限公司）、KQ2200E超聲波清洗器（上海昨非實驗室設(shè)備有限公司）、瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中國公司）、TΜ-1901 雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）、722s分光光度計（上海精科有限公司）、德國優(yōu)萊博TW20通用水浴槽（上海沃瓏儀器有限公司）、RC-3藥物溶出儀（天津大學(xué)無線電廠）。甲醇（濟南新世紀(jì)石化有限公司）、磷酸（深圳三原化工有限公司）、冰醋酸（深圳三原化工有限公司）、四氫呋喃（河南省新鄉(xiāng)市中原有機化工有限責(zé)任公司）、磷酸二氫鈉（河南省新鄉(xiāng)市中原有機化工有限責(zé)任公司）、乙腈（濟南新世紀(jì)石化有限公司）。

（2）色譜柱：YMCC18色譜柱（250 mm×4.6mm，5μm）。

（3）對照品：丁香苦苷 購自中國藥品生物制品檢定所。

（4）試劑：甲醇、乙腈為色譜純；水為純化水，其它試劑均為分析純。

（5）試藥：丁香苦苷。

（6）實驗動物 新西蘭純種大白兔，雄性。

2.測定方法確定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下。流動相：水-甲醇-四氫呋喃（62∶34∶4），檢測波長：226nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按丁香苦苷峰計算應(yīng)不得低于3000。

2.2對照品溶液的制備

丁香苦苷對照品溶液：精密稱取丁香苦苷對照品3mg，置100毫升容量瓶中，加適量甲醇超聲溶解，放置室溫，用甲醇定容后，取10毫升置于100毫升容量瓶內(nèi)，用甲醇定容，即得。

2.3給藥

家兔禁食過夜，丁香苦苷單體按100毫克每公斤灌胃給予丁香苦苷單體溶液，分別于給藥后0.1小時、0.3小時、0.5小時、0.7小時、0.9小時、1.2小時、1.5小時、1.9小時、2.3小時、2.7小時、3.1小時、3.5小時由耳緣靜取血0.5毫升，離心分離出血漿。分別按4毫克每公斤、8毫克每公斤、12毫克每公斤g、16毫克每公斤、20毫克每公斤的劑量給家兔耳緣靜脈注射給予丁香苦苷單體溶液，分別于給藥后0.1小時、0.3小時、0.5小時、0.7小時、0.9小時、1.2小時、1.5小時、1.7小時由耳緣靜取血0.5毫升，離心分離出血漿。

2.4供試品溶液的制備

精密吸取0.4毫升血漿，加人2毫升甲醇，高速離心20分鐘，吸取上清液0.2毫升，過濾，既得。

2.5專屬性試驗

取空白血樣，制備制成陰性液，依上述方法測定，結(jié)果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.6精密度試驗

照上述色譜條件，精密吸取丁香苦苷對照品溶液10μl，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。

2.7對照品的線性考察

精密稱取丁香苦苷對照品3.0mg，置100ml容量瓶中，加入甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4mL，置于10mL量瓶中，加空白血漿至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對照品進樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程。結(jié)果表明，丁香苦苷在0.3～19.2μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.8重現(xiàn)性試驗

稱取同一批的丁香苦苷樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.62%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.9準(zhǔn)確度試驗

取空白血漿及對照品溶液，制備丁香苦苷低、中、高三濃度的標(biāo)準(zhǔn)血漿樣品，代入線性方程計算濃度，以測得值與加入值的比值，計算回收率，平均回收率分別為96.32%，RSD為0.89%。

3.討論

分別考察水-甲醇-磷酸（50：50：0.01），水-甲醇-冰醋酸（90∶30∶0.12），水-甲醇-四氫呋喃（62∶34∶4），0.1mol/L磷酸二氫鈉：乙腈（90∶10）（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）， 甲醇-乙腈-冰醋酸（60∶40：0.1）不同比例的流動相，結(jié)果以甲醇-乙腈-水 （10：15：75）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用水-甲醇-四氫呋喃（62∶34∶4）為流動相。家兔口服丁香苦苷單體后吸收和消除均較快，消除半衰期為0.5小時.家兔靜脈注射丁香苦苷單體在體內(nèi)吸收快，AUC隨劑量的增加而成比例的增加，靜脈給藥的絕對生物利用度為35.1%。 [科]

【參考文獻】

[1]李全，許瓊明，郝麗莉，陸冰芬，楊世林，李笑然.紫丁香葉化學(xué)成分研究[J].中草藥，2009（03）.

[2]李博，朱俊訪.丁香葉中所含有效成分的種類及藥理作用研究進展[J].黑龍江醫(yī)藥，2009（04）.

[3]王進，王春妍，王保義.丁香葉的藥用研究[J].吉林中醫(yī)藥，1992（05）.

[4]張德山.丁香葉的藥用研究[J].中醫(yī)藥信息，1984（01）.

[5]李博，朱俊訪.丁香葉中所含有效成分的種類及藥理作用研究進展[J].黑龍江醫(yī)藥，2009（04）.

[6]張蓮秀.丁香葉的研究進展[J].海峽藥學(xué)，2009（06）.

[7]張軍鋒，張樹軍.丁香屬植物的化學(xué)成分及其藥理作用的研究進展[J].海南大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2007（02）.

[8]王錄娜，李永吉，管慶霞，王銳.丁香葉的研究現(xiàn)狀及展望[J].時珍國醫(yī)國藥，2009（04）.

[9]喬世榮.丁香葉中多糖的含量測定[J].海峽藥學(xué)，2009（06）.

[10]回瑞華，侯冬巖，李鐵純，劉曉媛，李學(xué)成.紫丁香葉揮發(fā)性化學(xué)成分季節(jié)性變化的GC/MS研究[J].質(zhì)譜學(xué)報，2008（01）.

[11]張蓮秀.丁香葉的研究進展[J].海峽藥學(xué)，2009（06）.

[12]張繼業(yè)，楊范莉，童華.丁香葉的提取工藝研究[J].西北藥學(xué)雜志，2014（04）.

[13]臧亞茹.丁香及其有效成分藥理作用的實驗研究[J].承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2007（01）.

[14]李永吉，呂邵娃，王艷宏，安豐堂，劉玠，王艷芝.丁香葉藥用研究進展[J].中醫(yī)藥信息，2003（01）.

[15]唐守勇，張蕓蘭，何芳.均勻設(shè)計法優(yōu)選丁香葉提取工藝[J].中國藥業(yè)，2009（08）.