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      黃岡市豬瘟流行病學(xué)調(diào)查與分析

      2015-10-21 07:43:45余亮彬石浪濤
      關(guān)鍵詞:黃岡市全血感染率

      余亮彬,石浪濤

      (黃岡職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生物與制藥工程學(xué)院,湖北 黃岡 438002)

      黃岡市豬瘟流行病學(xué)調(diào)查與分析

      余亮彬,石浪濤

      (黃岡職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生物與制藥工程學(xué)院,湖北 黃岡 438002)

      為全面客觀了解湖北省黃岡市豬瘟(CSF)流行現(xiàn)狀,通過實(shí)地調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室ELISA方法檢測,對黃岡市432家豬場進(jìn)行豬瘟(CSF)感染兩年跟蹤檢測,其結(jié)果為:豬場感染率為25.48% (2014年)和23.51%(2015年);豬群CSFV陽性率為2.42%(2014年)和1.93%(2015年);不同豬群CSFV抗原陽性率順序?yàn)橛韶i>保育豬>育肥豬>哺乳仔豬>母豬>種公豬。

      豬瘟;流行病學(xué)調(diào)查;黃岡市

      豬瘟(CSF)是由黃病毒科瘟病毒屬的豬瘟病毒(CSFV)引起的高度接觸性、出血性豬傳染病,是豬群中最嚴(yán)重的傳染病之一,每年對全球養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE) 將其列為A類16種法定傳染病之一,中國將其列為一類動(dòng)物傳染病。CSF在世界上養(yǎng)豬國家都有不同程度的流行,近年來一些原本宣布消滅豬瘟的國家(英國、比利時(shí)、荷蘭、德國等)又相繼暴發(fā)豬瘟[1][5]。我國于1956年提出消滅CSF規(guī)劃,雖然有效地控制了CSF的急性發(fā)生和大流行,但因病毒毒株變異、野毒的無規(guī)律性的存在和水平間傳播以及豬場環(huán)境和生產(chǎn)管理技術(shù)的不規(guī)范,CSF仍在我國不間斷地流行[2]。當(dāng)前,我國豬瘟的流行和發(fā)病特點(diǎn)與以前相比已發(fā)生了較大的變化:臨床上出現(xiàn)典型的豬瘟較少取而代之的是非典型及溫和型、亞臨床或無癥狀持續(xù)感染型及免疫失敗現(xiàn)象,原來大面積的爆發(fā)與流行也不多見,如今多呈散發(fā)及小范圍流行,發(fā)病日齡由原來的育成豬轉(zhuǎn)向保育豬和仔豬[3][6]。

      為全面客觀了解湖北省黃岡市豬瘟(CSF)流行現(xiàn)狀,從2014年1月起至2015年12月止,本試驗(yàn)對黃岡市11個(gè)縣市區(qū)432家豬場進(jìn)行跟蹤實(shí)地調(diào)查,并運(yùn)用ELISA方法進(jìn)行豬瘟血清流行病學(xué)調(diào)查,通過實(shí)地調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果,全面分析了黃岡市CSF的流行規(guī)律,為當(dāng)?shù)刂贫–SF綜合防控措施提供科學(xué)依據(jù)和理論參考。

      1 豬場抽樣

      為保障樣品來源的代表性,按照統(tǒng)計(jì)抽樣要求對黃岡市所轄11個(gè)縣市存欄200頭以上規(guī)模豬場進(jìn)行隨機(jī)抽樣。每月在各縣市隨機(jī)選取3個(gè)豬場作為調(diào)查豬場,為保障調(diào)查豬場在各縣分布相對均勻,要求每豬場之間距離30公里以上,并盡量呈三角形分布。

      調(diào)查時(shí)間: 2014年1月-2015年12月

      2 主要調(diào)查內(nèi)容

      一是對豬場基本情況進(jìn)行調(diào)查,以實(shí)地調(diào)查為主,主要內(nèi)容有:

      (1)豬場環(huán)境狀況調(diào)查:調(diào)查豬場的地理位置、周邊環(huán)境、糞污處理、欄舍設(shè)備及衛(wèi)生狀況等。

      (2)豬場飼養(yǎng)管理情況調(diào)查:調(diào)查飼養(yǎng)規(guī)模、豬群結(jié)構(gòu)、管理水平(精細(xì)化管理還是粗放式管理)、管理制度及執(zhí)行情況、飼料及飲水品質(zhì)等。

      (3)豬場獸醫(yī)保障情況調(diào)查:主要調(diào)查豬場免疫計(jì)劃及執(zhí)行情況、發(fā)病及治療情況、獸醫(yī)場所及人員配備與技術(shù)力量等。

      二是CSF流行病學(xué)調(diào)查,主要內(nèi)容有:

      (1)豬場感染率調(diào)查;(2)CSFV抗原檢測

      3 材料與方法

      3.1 材料

      3.1.1 全血及血清樣品

      2014年1月-2015年12月期間,每月不間斷從各調(diào)查豬場采集不同階段無臨床癥狀豬群的全血血清樣品,并收集疑似病料組織,記錄相關(guān)信息并編號(hào)后置于4℃保存?zhèn)溆谩?014年全年,從361家調(diào)研豬場采集全血樣品7642份,血清樣品4236份;2015年全年,從336家調(diào)研豬場采集全血樣品7468份,血清樣品4803份。

      3.1.2 病料組織

      2014年收集疑似CSF病料447份,2015年收集疑似CSF病料397份,無菌采集上述調(diào)研豬場疑似感染CSF病豬腎臟、脾臟、淋巴節(jié)、扁桃體等組織,觀察病理變化,記錄相關(guān)信息并編號(hào)4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

      3.1.3 診斷試劑

      豬瘟抗原檢測試劑盒(北京世紀(jì)元亨公司),包括:豬瘟抗原包被的酶標(biāo)板,辣根過氧化物酶標(biāo)記的豬瘟病毒單克隆抗體、濃縮的清洗液(10)、樣品稀釋液、標(biāo)準(zhǔn)陰性對照、標(biāo)準(zhǔn)陽性對照、終止液、底物溶液。

      Trizol Reagent、 Rnase Inhibitor、 dNTP、Taq酶、M-MLV (自大連寶生物工程公司);瓊脂糖( Sigma 公司);其他常規(guī)試劑均為分析純。

      3.1.4主要儀器:

      Labsystems Wellscan Mk3酶標(biāo)儀(法國梅里埃公司);

      TGL-16高速冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器公司);

      HH-4 數(shù)顯恒溫水浴鍋(國華電器有限公司);ECP3000 三恒多用電泳儀(美國 Bio-raid 公司);

      DY C3113型電泳槽(美國Bio-raid公司);

      PCR 儀(美國Bio-raid公司);

      ZS-2200 型凝膠成像系統(tǒng)(美國Bio-raid公司)。

      3.2 方法

      3.2.1 實(shí)地調(diào)查法

      實(shí)地調(diào)查目的是為了全面、準(zhǔn)確了解調(diào)查對象(豬場)的基本情況,依據(jù)事先制定的調(diào)查設(shè)計(jì)方案確定好調(diào)查工作計(jì)劃,然后通過“實(shí)地察看、填表記錄、血樣及病料采集”等方式完成調(diào)查。

      3.2.2 CSFV抗原檢測

      CSFV抗原檢測用豬瘟ELISA抗原檢測試劑盒(北京世紀(jì)元亨公司),操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。

      使用前,現(xiàn)將所有試劑解凍至室溫20℃左右,將試劑輕輕搖旋混合均勻。

      結(jié)果判定[4][7]:

      被檢樣品的矯正吸光值≥0.3,則為陽性;

      被檢樣品的矯正吸光值<0.2,則為陰性;

      被檢樣品的矯正吸光值介于0.2-0.3,則為可疑。

      4 結(jié)果與分析

      4.1 實(shí)地調(diào)查結(jié)果

      2014-2015兩年間,調(diào)查范圍覆蓋黃岡市管轄11個(gè)縣市(黃州、武穴、麻城、紅安、羅田、英山、浠水、蘄春、黃梅、團(tuán)風(fēng)、龍感湖)共計(jì)432家豬場(2014年361家,2015年336家,有重復(fù))。對這些豬場的豬群品種、養(yǎng)殖規(guī)模、生產(chǎn)性能、日常管理、免疫計(jì)劃、疾病死亡、用藥治療等情況進(jìn)行實(shí)地調(diào)查。

      2014-2015兩年間,發(fā)放《豬場流行病學(xué)調(diào)查表》778份,收回713份,無效調(diào)查表16份,有效調(diào)查表697份。通過統(tǒng)計(jì)697份《豬場流行病學(xué)調(diào)查表》,得知如下信息:697家豬場中,外三元雜交品種豬場452家(占64.85%),內(nèi)三元雜交品種豬場207家(占29.70%),二元雜交豬品種豬場17家(占2.44%),長白豬品種豬場13家(占1.86%),本地太湖豬品種豬場8家(占1.15%)。

      697家豬場中存欄規(guī)模200-20000頭不等,其中,存欄500頭以下93家,500-1000頭215家,1000-2000頭286家,2000頭以上103家。

      各豬場均有自己的免疫計(jì)劃,并嚴(yán)格執(zhí)行。生產(chǎn)管理秩序相對規(guī)范,少數(shù)廠家門禁、消毒措施不嚴(yán)。病毒性疾病主要依賴疫苗,細(xì)菌性疾病用藥物控制。

      疾病發(fā)生及死亡情況各豬場表現(xiàn)不一,由于調(diào)研目的的需要,對平時(shí)收集CSF疑似病料,作現(xiàn)場剖檢觀察并記錄病理變化。典型病例的病理變化見圖3-1、圖3-2、圖3-3、圖3-4。

      圖1 耳根出血點(diǎn)

      圖2 腎臟、膀胱針點(diǎn)狀出血點(diǎn)

      圖3 回盲瓣紐扣狀潰瘍

      圖4 頜下淋巴結(jié)腫脹出血

      通過對疑似CSF病豬的體表觀察和剖檢,其主要病癥表現(xiàn)為:體溫升高、犬坐式呼吸、嘔吐拉稀,初期皮膚出血,后期四肢內(nèi)側(cè)、腹下、耳根、鼻端出現(xiàn)紫紺;剖檢其病理變化為:喉頭、腸粘膜、胃底膜、腎臟、膀胱針尖狀出血,腸系膜淋巴結(jié)、頜下淋巴結(jié)水脹、出血、大理石樣變,回盲瓣紐扣狀潰瘍,脾臟邊緣出血梗死。

      4.2 豬場感染CSFV檢測結(jié)果

      2014年,調(diào)查全市11個(gè)縣市361家豬場,其中檢測到CSFV陽性豬場92家,全市豬場平均陽性率為25.48%;2015年,在全市范圍內(nèi)共計(jì)調(diào)查336家豬場,其中檢測到CSFV陽性豬場79家,全市豬場平均陽性率為23.51%,兩年間黃岡境內(nèi)的11個(gè)縣市均有陽性豬場存在(表1)。

      表1 2014-2015年黃岡市不同縣市中豬場感染CSFV情況

      2014-2015年間,按調(diào)查進(jìn)度每月統(tǒng)計(jì)全市陽性豬場數(shù)量情況,其結(jié)果如下(見下頁表2)。

      表2 2014-2015年黃岡市不同月份中豬場感染CSFV情況

      由表1、表2數(shù)據(jù)分析可知:2014、2015年間CSFV已經(jīng)在黃岡市境內(nèi)11各縣市都有感染,感染的陽性豬場占調(diào)查豬場總數(shù)的1/4左右,其中,2015年豬場感染為23.51%,2014年豬場感染25.48%,說明黃岡CSF的防控不容忽視;比較兩年的陽性豬場感染率,2015年較2014年略有下降,但不明顯,說明CSFV持續(xù)感染趨勢依然存在,但不排除CSF防控措施的作用效果。

      4.3 CSFV抗原檢測結(jié)果

      2014全年間,對來自全市11個(gè)縣市361家豬場的7642份全血樣品,進(jìn)行豬瘟ELISA抗原檢測,其中,檢測出CSFV抗原陽性全血樣品185份,CSF陽性率為2.42%;2015全年間,對來自全市11個(gè)縣市336家豬場的7468份全血樣品,進(jìn)行豬瘟ELISA抗原檢測,其中,檢測出CSFV陽性全血144份,CSF陽性率為1.93%(表3)。

      表3 2014-2015年黃岡市不同月份中CSFV抗原檢測結(jié)果

      2014年、2015年全血樣品均采集于無臨床癥狀豬群,通過表3數(shù)據(jù)分析可知, 說明:2014-2015兩年間CSFV對全市2%左右豬群造成隱形感染(或帶毒);2015年豬場感染率為1.93%,2014年豬場感染率2.42%,2015年較2014年感染率略有下降,降幅明顯,說明黃岡市CSF防控措施有效。從2014-2015兩年間每月檢測的結(jié)果看,說明CSF一年四季均可感染,但以2月份和3月份CSF感染率最低,分別為1.95%和1.70%;以11月份和12月份CSF感染率最高,分別為3.16%和 2.42%;其他各月份間感染率差異不明顯。

      為進(jìn)一步分析不同豬群感染CSFV情況,按豬群分類,分別統(tǒng)計(jì)全市2014年、2015年全血樣品中CSFV抗原檢測結(jié)果,其結(jié)果如下(見表4)。

      表4 2014-2015年黃岡市不同豬群中CSFV抗原檢測結(jié)果

      由表4可知,CSFV對所有豬群都有感染,但其感染率在不同豬群中間有差異表現(xiàn),本調(diào)查結(jié)果顯示:2014-2015兩年間黃岡市不同豬群CSFV抗原陽性率順序?yàn)橛韶i>保育豬>育肥豬>哺乳仔豬>母豬>種公豬。2014年CSFV在不同豬群中的感染率分別為育成豬(4.23%)、保育豬(3.10%)、育肥豬(2.45%)、哺乳仔豬(1.92%)、母豬(1.74%)、種公豬(1.56%);2015年CSFV在不同豬群中的感染率分別為育成豬(3.74%)、育肥豬(2.49%)、保育豬(2.06%)、哺乳仔豬(1.51%)、母豬(1.08%)、種公豬(0.98%)。通過比較可知,總體來說育成豬和育肥豬CSFV陽性率最高,帶毒現(xiàn)象比其他豬群嚴(yán)重,種公豬和母豬CSFV陽性率最低,哺乳仔豬和保育豬CSFV陽性率居中。由于所有血樣均來自無臨床癥狀的豬只,但通過檢測發(fā)現(xiàn)CSFV仍然存在于各階段豬群,說明:黃岡市CSFV主要成隱形感染,因此密切關(guān)注和加強(qiáng)CSF的檢測工作不容忽視。5 綜合分析上述結(jié)果,形成討論觀點(diǎn):

      (1)通過兩年的CSF流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn):CSFV已經(jīng)在黃岡市境內(nèi)11各縣市都有感染,其中,受到CSFV陽性豬場比例占調(diào)查豬場的1/4,主要以隱性感染為主,偶見溫和型發(fā)病,主要集中在斷乳后的保育豬階段;兩年的豬場陽性率數(shù)據(jù)變化相對平穩(wěn),未見大面積大規(guī)模爆發(fā)。說明黃岡市CSFV感染范圍較大,并且有持續(xù)帶毒現(xiàn)象,CSF防控不容忽視。

      (2)本檢測的血樣均來自于調(diào)查豬場的無臨床癥狀豬群,說明黃岡市CSF主要以無臨床征狀感染為主,這對于凈化CSF的難度將增大,同時(shí),一旦由于環(huán)境或其他疾病因素造成豬群免疫力下降,CSF爆發(fā)的可能增大。

      [1]甘孟侯,楊漢春.中國豬病學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2005.

      [2]孟文學(xué),淺談近年豬瘟流行態(tài)勢和防制對策[J].中國獸醫(yī)科技,2009(9):29一30.

      [3]B.E斯特勞,5.D.阿萊爾,w.L蒙加林,等.著,豬病學(xué)(第八版)[M].趙德明,張仲秋,沈建忠,等,譯.北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2010,157一171.11.

      [4]王在時(shí).豬瘟防制研究的回顧和展望[C].畜禽重大疫病免疫防制研究進(jìn)展.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2011:64一105.

      [5]于立權(quán),崔玉東,樸范澤等.豬瘟疫苗研究進(jìn)展[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2010,23(2):10-13.

      [6]顏水泉.最新豬病學(xué)[M].臺(tái)北:德龍出版社. 2011.11-12.

      [7]王在時(shí).王瑋琳.我國豬瘟長期持續(xù)存在的根源及綜合防制對策.[J].豬病防控2012(11):30-32.

      [責(zé)任編輯:秦春娥]

      S858.28

      A

      1672-1047(2015)06-0134-04

      10.3969/j.issn.1672-1047.2015.06.38

      2015-11-30

      黃岡職業(yè)技術(shù)學(xué)院科研項(xiàng)目“黃岡市豬瘟流行病學(xué)本底調(diào)查及防控技術(shù)規(guī)范研究(2015C2022107)”。作者簡介:余亮彬,男,湖北浠水人,總支書記,副教授。研究方向:獸醫(yī)流行病學(xué)及農(nóng)業(yè)高等職業(yè)教育研究。

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