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    持續(xù)封閉負壓引流材料在會陰部創(chuàng)面治療中的應用及機制研究

    2015-10-18 12:37:44柏霞劉建強陳宇
    生物醫(yī)學工程研究 2015年2期
    關鍵詞:皮片會陰部褥瘡

    柏霞,劉建強△,陳宇

    (1.山東省泰山醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院,濟南市第四人民醫(yī)院外科,濟南 25033;2.濟南市婦幼保健院,濟南 250001)

    1 引 言

    外科疾病中,涉及會陰部的手術較多。并且腰骶部壓瘡發(fā)生率也較多。常見的疾病包括:肛周膿腫、深部皮膚感染、粉瘤伴感染等,是外科的常見病、多發(fā)病,因會陰部局部的解剖特點等因素,使得此處手術的術后護理難度較大。近年來,我科采用會陰部應用持續(xù)負壓引流材料(vacuum sealing drainage,VSD)[1]的病例逐漸增多,在總結(jié)既往常規(guī)手術治療的基礎上,根據(jù)臨床需要,開展了持續(xù)負壓吸引手術治療,本文就是通過應用持續(xù)負壓引流的回顧性總結(jié)。并且進一步檢測了組織中C-ski[2]的表達變化,從基因水平探討了VSD機制。

    2 資料與方法

    2.1 研究對象

    選取我科自2007~2013年間336例會陰部手術患者(肛周膿腫、骶尾部褥瘡等)患者中,男272例,女64例;年齡19~81歲,平均55歲;肛周膿腫246例,骶尾部褥瘡90例;其中膿腫伴肛瘺44例,褥瘡伴感染52例;伴有習慣性便秘、慢性支氣管炎或哮喘、糖尿病、高血壓、冠心病或前列腺增生106例。用隨機數(shù)字表法將在規(guī)定時間 段內(nèi)住院的336例患者設 為研究對象,隨機分為干預組(VSD引流組)168例,對照組 168例。

    2.2 材料

    采用威高生產(chǎn)第一代持續(xù)負壓VSD引流系統(tǒng),連接中心負壓吸引,外敷進口半透膜覆蓋。

    2.3 方法

    分別觀察兩組患者的創(chuàng)面,按照時間提取創(chuàng)面組織,比較兩組患者的愈合時間、疼痛評分、皮片成活率以及C-ski表達情況。并進行統(tǒng)計學計算。

    干預組:將手術部位徹底清創(chuàng),修剪VSD后間斷縫合VSD與創(chuàng)周皮膚,外覆半透膜。引流管一端連接引流瓶,另一端連接中心負壓吸引,調(diào)節(jié)負壓維持在0.04~0.06 Mpa,并進行嚴密護理觀察。對照組:僅應用常規(guī)換藥方法促進創(chuàng)面愈合,不采用VSD引流材料。

    2.4 免疫組化檢測

    兩組患者治療4 d和7 d后,分別提取局部組織,進行免疫組化檢測C-ski表達。C-ski一抗和二抗均購自SIGMA公司。

    (1)組織切片常規(guī)脫蠟;(2)滴加3%過氧化氫溶液,避光37℃孵育30 min,去除內(nèi)源性過氧化物酶;(3)蒸餾水沖洗5 min×3次;(4)抗原修復;(5)PBS沖洗;(6)滴加血清封閉液,37℃孵育30 min;(7)吸干封閉血清,滴加抗人C-ski多克隆抗體,濕盒內(nèi)4℃過夜。PBS溶液代替一抗作為空白對照;(8)取出過夜切片,37℃孵育30 min;(9)PBS洗后滴加二抗;(10)滴加HRP標記鏈霉素親和素;(11)DAB顯色:DAB工作液按說明書配制,滴加在切片上。顯微鏡下觀察,至細胞出現(xiàn)棕黃色顆粒而周圍組織無非特異性顯色時,蒸餾水終止;(12)復染、脫水、透明,自然晾干后中性樹膠封片。

    2.4.1結(jié)果判定 使用Leica DM 4000B系統(tǒng)拍照。在400倍視野下,隨機計數(shù)兩百個細胞中陽性細胞個數(shù)。隨機選取5個高倍視野,計算陽性細胞率后求平均值。

    3 結(jié)果

    分別對兩組患者的創(chuàng)面愈合時間、痛苦評分、皮片成活情況進行了比較,并對兩組治療后組織的C-ski表達進行了比較,見表1、表2。

    3.1 創(chuàng)面愈合時間

    168例會陰部手術后VSD引流患者,肛周膿腫患者123例,持續(xù)負壓引流12~17 d,傷口創(chuàng)面愈合良好,病人疼痛減輕。在45例骶尾部褥瘡患者中有42例在持續(xù)負壓吸引后9~13 d,創(chuàng)面面積開始逐漸縮小,并有新鮮肉芽生長。3例患者因自動出院終止治療。治療組平均治愈時間是16.3±2.1 d。

    對照組168例,其中肛周膿腫100例,骶尾部褥瘡患者68例,給予常規(guī)換藥,根據(jù)創(chuàng)面愈合情況,2~4 d換藥一次,換藥后局部包扎。24~28 d后創(chuàng)面愈合。對照組治愈時間是24.7±3.1d。治療組與對照組比較,t=4.65,P=0.043,兩組比較有統(tǒng)計學差異。

    3.2 疼痛評分

    采用患者自我描述評價疼痛程度,范圍在0~10之間,0代表無痛,10代表疼痛難忍。治療組疼痛評分3.5±0.5分,對照組評分6.1±1.6分。兩組進行統(tǒng)計學比較,t=6.5,P=0.023,兩組比較有統(tǒng)計學差異。

    3.3 治療組的皮片成活療效

    優(yōu):皮片成活大于95%,血腫面積小于2 cm2,無感染;良:皮片成活大于85%,血腫面積2~5 cm2,無感染;差:皮片成活小于85%,血腫面積大于5 cm2,有感染。優(yōu)100例,良57例,差11例,總有效率為93.4%,而相對應對照組為67例、58例、43例,總有效率為74.4%,兩組總有效率差異顯著(χ2=5.28,P=0.021)。見表1。

    3.4 C-ski表達

    有研究表明,原癌基因C-ski能夠通過調(diào)節(jié)細胞增殖和凋亡的平衡而促進創(chuàng)傷愈合,本研究選取了治療4 d以及7 d后兩組患者的組織,進行免疫組化分析,結(jié)果顯示,治療組C-ski表達陽性率分別為45±3.72和58±4.36,對照組陽性率分別為30±7.86和34±6.38,而對照組3周治療后才檢測到C-ski表達陽性率升高(數(shù)據(jù)未顯示)。見表2。

    表1 兩組皮片成活療效對比

    表2 治療前后2組C-ski陽性率比較

    ★P<0.01,與對照組比較

    4 討論

    慢性創(chuàng)面修復是一個包括細胞、細胞外基質(zhì)及細胞因子等各種因素之間的相互作用和影響的動態(tài)應答過程。而會陰部創(chuàng)面處于特定的部位,導致創(chuàng)面愈合延遲、瘢痕組織形成。目前研究表明,慢性創(chuàng)面之所以難以愈合,與創(chuàng)面的微環(huán)境抑制成纖維細胞的增殖有關[3],但具體機制不詳。因而,對創(chuàng)面修復尤其是慢性創(chuàng)面修復的更加深入的研究,探討參與創(chuàng)面愈合的機制,將對創(chuàng)面愈合有著十分重要的意義。

    持續(xù)負壓引流材料(VSD)由Fleisehmann等[4]于1992年首創(chuàng),并逐漸被人們認識和掌握,現(xiàn)已廣泛應用于臨床治療,尤其適用于各種傳統(tǒng)的外科方法治療無效的慢性難愈性創(chuàng)面[5]。近年來已經(jīng)證實VSD可以清除創(chuàng)面壞死組織和滲出液,促進創(chuàng)面血管的生長,增加局部血流量,從而促進肉芽組織的生長,加速慢性創(chuàng)面的愈合[6~8]。本研究對比了兩組患者的創(chuàng)面愈合時間、皮片存活率、疼痛評分,統(tǒng)計學比較證實,VSD治療能夠明顯縮短愈合時間,降低疼痛評分。

    我們進一步對這一治療的機制進行了探討。眾所周知,在創(chuàng)面愈合的各個階段都有相關基因的調(diào)控,因此,通過研究VSD對慢性創(chuàng)面組織中與創(chuàng)面愈合相關的調(diào)控基因表達的影響,將對于深入了解VSD的治療原理具有重要的意義。研究表明,原癌基因在組織修復過程中發(fā)揮重要的作用。C-ski(cellular Sloan Kettering Institute,C-ski)是一種原癌基因[9],目前發(fā)現(xiàn)它廣泛存在于各類組織和細胞中,并且參與了體內(nèi)多種生理及病理過程。C-ski是成纖維細胞增殖的調(diào)節(jié)因子,它具有促進成纖維細胞增殖的作用,而成纖維細胞是創(chuàng)面愈合主要的修復細胞之一,其增殖的快慢與創(chuàng)面愈合的進程有著密切聯(lián)系[10]。通過免疫組化實驗,我們證實VSD組患者C-ski表達明顯升高。

    綜上所述,VSD可減少患者痛苦程度,加快創(chuàng)面愈合,提高安全可靠性,值得臨床更廣泛地應用與推廣,同時可能會為將來臨床治療難愈性慢性創(chuàng)面提供新的靶點。

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