奶牛的人工授精技術及其應用前景

楊婷

摘要：通過介紹人工授精技術的發(fā)展，簡述人工授精技術的操作程序，并指出人工授精技術存在的問題，并對該技術的應用前景進行了展望。旨在為實際的奶牛人工授精操作提供部分技術指導和參考。

關鍵詞：奶牛；人工授精；應用前景

中圖分類號：S823.3+4 文獻標識碼：B 文章編號：1007-273X（2015）08-0050-02

采用人工授精技術，可以使優(yōu)秀種公牛冷凍精液大面積推廣，迅速提高后代的生產水平，避免牛群繁殖疾病的交叉?zhèn)魅?，可防止各種疾病，提高供配種效率，降低牛群管理成本。

1 人工授精技術的發(fā)展歷程

1938年至1942年間， 精子冷貯技術取得了第一次突破。將人類精液用快速冷凍法貯存于液態(tài)氮中（-196 ℃）， 復溫后存活率為20%～40%， 改進技術后可達更高。但精子在冷貯過程中不可避免地受到了損傷。1949年，波爾用甘油稀釋雞的精液， 在酒精干冰（-79 ℃）下冷凍， 使部分精子保持存活， 可稱為精子冷貯技術的第二次突破。此后， 由于精液冷凍保存技術的逐步成熟， 使家畜人工授精技術的發(fā)展和應用又進入了一個新階段。20世紀70年代以來， 牛的人工授精中用冷凍精液幾乎完全取代了用新鮮精液， 甚至用冷凍保存20多年的精液給母牛輸精也成功生下了小牛。1980年， 中國采用冷凍精液授精的奶牛已占90%以上[1]。

2 人工授精技術要點

2.1 發(fā)情鑒定、適時配種

2.1.1 發(fā)情鑒定 母牛的發(fā)情鑒定是適時配種和提高人工授精率的重要前提。凡是接受其他牛（包括母牛）爬跨和陰部流出透明分泌物有15 cm以上的，就可以判定為發(fā)情牛。出現(xiàn)外陰紅腫、頻頻叫喚、弓腰舉背、排尿、追趕其他牛只時就要留意和識別發(fā)情奶牛，通?？赏ㄟ^外部行為進行觀察，可總結為“五看”：一看外部表現(xiàn)。發(fā)情初期的母牛興奮不安、反應敏感、哞叫，不接受其他牛爬跨；發(fā)情盛期則接受爬跨，被爬跨時舉尾，四肢站立不動。二看外陰的變化。母牛發(fā)情時，陰戶由微腫而逐漸腫大飽滿，柔軟而松弛，繼而陰戶由腫脹慢慢消退，縮小而顯出皺褶。三看陰道黏膜和子宮頸口的變化。發(fā)情初期陰道壁因充血而潮紅有光澤；發(fā)情盛期子宮頸紅潤，頸口開張，約能容納一個手指；末期陰道黏膜充血、潮紅現(xiàn)象逐漸消退，子宮頸口慢慢閉合。四看陰戶流出黏液的變化。發(fā)情初期排出的黏液清亮，像蛋清；發(fā)情盛期母牛陰戶排出如玻璃棒樣，具有高度的黏性，易粘于尾根、臀端或后肢飛節(jié)處的被毛上；排卵前排出的黏液逐漸變白而濃厚黏稠，量也減少；黏性又變差，可用拇指和食指沾取少量黏液，若牽拉5～7次不斷，此時母牛已接近排卵，應在3～4 h內輸精，若牽拉8次以上不斷者為時尚早，3～5次即斷則為時已晚。五看產奶量。大多數(shù)母牛在發(fā)情時，產奶量均有所下降[2]。

2.1.2 適時配種 對鑒定發(fā)情的牛要進行適時配種。研究表明，在發(fā)情期的前期進行配種，所產母牛比例高，繁殖率不受影響；而在發(fā)情期的后期進行授精，所產公牛的比例高，并且對繁殖率有不良影響。通常9時以前發(fā)現(xiàn)發(fā)情，當日午后配種；9～14時發(fā)現(xiàn)發(fā)情，當日晚配種；下午或晚上發(fā)現(xiàn)發(fā)情，次日早晨配種。配種時還應注意個體差異，如體弱、老齡、肢蹄有毛病等不好確定發(fā)情時間的牛，提早排卵或排卵延遲的牛，應進行直腸檢查來確定宜時的配種時間。當發(fā)情母牛陰戶紅腫、黏液透明、流出呈棒狀，直腸檢查時，卵泡發(fā)育成熟，泡壁變薄，即為最佳輸精時間[3]。

2.2 精液準備

凍精品質檢查方法：取凍精液前，先將1～2 mL稀釋液倒入已消毒的小瓶內，置水浴鍋中加溫至40 ℃。經消毒后的玻棒蘸取少許解凍精液，置顯微鏡載玻片上進行鏡檢。冷凍精液解凍后精子活力不低于0.35，精子復蘇率不低于50%。精子畸形率不高于20%。精子頂體完整率不低于40%，無病原微生物[4]。

2.3 凍精解凍和輸精技術

2.3.1 精液解凍 精液解凍時要做到快取、快投、快融解。用鑷子從液氮罐中迅速取出1支細管凍精，立即投入到38～40 ℃的溫水中，擺動10 s左右使其融化，擦干細管上的水珠，用細管剪剪掉細管封口端1 cm左右，裝入輸精槍外套中，細管凍精封口端在前，棉塞端朝后。細管凍精直接放入（38±2） ℃水中解凍。精液解凍后必須保持所要求的溫度，嚴防在操作過程中溫度出現(xiàn)回升或回降，冷凍精液解凍后應在1 h 內輸精[5]。

2.3.2 輸精消毒 人工授精人員操作前必須剪平指甲、洗凈消毒，并戴上乳膠手套、涂上潤滑劑。人工授精器械使用前后必須嚴格消毒。玻璃器械先用溫肥皂水洗刷后，用清水沖洗，然后蒸氣消毒10～15 min。金屬器械先用肥皂水洗凈后，清水沖洗；使用前再用清水沖洗，然后經酒精火焰消毒。為防止疾病傳播，必須做到每頭牛用1支輸精管，嚴禁使用未經消毒處理的輸精器。

2.3.3 輸精技術 配種時左手戴好長臂手套，用肥皂水沾濕后插入母牛直腸，握住子宮頸的入口處，同時胳膊向下用力開陰門，右手持輸精槍由陰門插入陰道，先向上斜插一段，避開尿道口，而后平插，一直插到子宮頸口。此后要雙手配合把輸精槍前端引入子宮頸管內，接著再往里插，穿過2～4道皺褶樣的螺旋狀組織就進入了子宮體，即可將精液注入子宮體基部。注入精液時，要把輸精槍稍微往后拉一下，避免輸精槍口被阻。如果發(fā)現(xiàn)大量精液殘留在輸精槍內，要重新輸精。輸精時推射速度不宜過快，應一邊推進，一邊緩緩活動輸精槍。輸精完畢后，應用左手捏住陰唇下部有節(jié)奏地按摩幾下，這樣可以刺激陰蒂，提高母牛的興奮性，從而提高受胎率。授精結束后應及時填寫授精記錄[4]。

2.4 解凍后精液的保存

一般常溫情況下放置1 h，精液活力無明顯變化，但在氣溫低于8 ℃時應注意保溫；高于30 ℃時，將精液放置在涼水中降溫，延長精子的保存時間。

2.5 重視早期妊娠檢查，注意復配

母牛配種后及時進行妊娠檢查。采用直腸檢查，觸摸子宮角的形狀、大小、質地變化和卵巢、孕動脈的變化，可以診斷出妊娠時間超過30 d以上的奶牛。對已妊娠的母牛加強飼養(yǎng)管理，防流保胎，對未妊娠的母牛要查出原因，采用相應措施及時補救。

3 人工授精技術存在的問題及展望

3.1 發(fā)情鑒定中存在的問題

牛發(fā)情鑒定的目的是為了把發(fā)情母牛找出來，以及時配種、提高受胎率。但要注意以下情況。

3.1.1 安靜發(fā)情 安靜發(fā)情又稱安靜排卵，即母牛無發(fā)情征狀，但卵泡能發(fā)育成熟并排卵。母牛分娩后第一個發(fā)情周期以及帶仔的母?；蛘呙咳諗D奶次數(shù)多的母牛，年輕或體弱的母牛均易發(fā)生安靜發(fā)情。

3.1.2 假發(fā)情 母牛只有外部發(fā)情表現(xiàn)而不排卵，但突然有性欲表現(xiàn)，如接受其他牛的爬跨，但陰道無黏液，子宮頸口閉鎖。多數(shù)是患有子宮炎、陰道炎和卵巢機能不全的牛常有此表現(xiàn)。

3.1.3 持續(xù)發(fā)情 母牛連續(xù)發(fā)情不止，有的持續(xù)一周以上，其原因是卵巢囊腫，即卵泡不斷發(fā)育，使母牛發(fā)情而不排卵，所以表現(xiàn)持續(xù)發(fā)情和卵泡交替發(fā)育，即兩側卵巢交替有卵泡發(fā)育會使母牛發(fā)情而不排卵。

3.1.4 孕期發(fā)情 直腸檢查時能摸到胎兒，但有性欲表現(xiàn)，接受其他牛的爬跨，但陰道無黏液。其原因不清，但千萬不能配種。

3.2 人工授精過程中存在的問題

3.2.1 消毒不嚴 授精之前如果疏忽了消毒這一環(huán)節(jié)就容易出現(xiàn)生殖道的疾病，子宮炎等疾病，影響了受胎率：①器材使用前后都要洗液刷洗，利用高壓蒸汽或煮沸；②外陰消毒，配種前母牛外陰部清水沖洗，再用0.1%的高錳酸鉀溶液清洗；③洗手消毒，最好使用消毒皂和流水洗手[4]。

3.2.2 解凍精液注意事項 提取細管放入解凍液時，一定要快、準。細管精液剪口放入輸精槍后槍頭略高放置，以避免精液流出，否則影響精子活力和受胎率。

3.2.3 適時輸精 絕大多數(shù)的配種員都是通過觀察母牛發(fā)情后確定輸精時間，早上發(fā)情下午配，下午發(fā)情次日早上配，這樣的方法有一定的道理，但不夠準確，還需結合以下幾點來準確把握輸精時間：①母牛神態(tài)由不安轉為安定，即發(fā)情表現(xiàn)開始轉弱；②外陰部腫脹開始消失，子宮頸稍有收縮，黏膜由潮紅變?yōu)榉奂t或紫青色；③黏液量由多到少且成渾濁狀；④卵泡體積不再增大，皮變薄有彈力，泡液波動明顯，有一觸即破之感。

3.2.4 防治母牛生殖器官的各種疾病 應及早治療母牛的子宮炎、乳房炎、各種不孕癥等。母牛的不孕癥除了輸精液部位不正確外，還有母牛自身的生殖器官發(fā)育不正常，子宮頸狹窄、位置不正、陰道狹窄等原因。是因為輸精操作失誤的應加強學習、及早改正；是母牛自身疾病的應找出原因、及早治療。母牛受胎率除了自身的不孕癥以外，許多輸精員在牛人工授精技術的操作上不規(guī)范，造成母牛生殖道損傷不僅降低了受胎率、擴大了胎間距，還大大降低了奶牛的產奶量，影響了經濟效益。

4 小結

當前，中國奶牛人工受精技術已經很普及了，這對我國奶牛改良起到了很重要的作用，良種覆蓋率不斷提升，奶牛的單產量也有很大程度的提高，為我國的國民經濟發(fā)展起到了推動作用。但是，必須清醒地看到，許多輸精員在奶牛人工授精的操作上存在問題，給畜牧生產帶來很大的損失。具體說來，不規(guī)范的牛人工授精方法會造成生殖道疾病，同時也會傳播生殖道疾病，降低受胎率，降低奶牛的產奶量，影響奶牛場的經濟效益。定時人工授精技術可以獲得較高的受胎率。

參考文獻：

[1] 孫長青.動物人工授精的意義與程序[J].養(yǎng)殖技術顧問，2014（5）：55.

[2] 顧桂華.顧國慶.奶牛的人工授精技術[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2015（2）：66.

[3] 王玉亮 奶牛的人工授精技術要點[J].中國奶牛，2012（3）：53-55.

[4] 胡益源，王俊良.奶牛人工授精的關鍵技術[J].河南畜牧獸醫(yī)：綜合版，2012（10）：11-13.

[5] 巴特爾，孫 偉，蘇 和，等. 用荷斯坦奶牛性控精液生產體內性控胚胎[J].動物醫(yī)學進展，2012，33（4）：68-74.