柳州九萬山野生茶樹春季鮮葉生化成分分析

劉 彤，葛智文，冉立群，楊雪梅，陳濤林，羅軍武

（1. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝園林學(xué)院，湖南 長沙410128；2. 柳州市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，廣西 柳州545002；3. 柳州市融水縣農(nóng)業(yè)局，廣西 融水545300）

九萬山自然保護(hù)區(qū)位于廣西北部的融水、環(huán)江與羅城三縣交界處，總面積252.43 km2。山峰海拔多在1 000 m 以上，谷底250～300 m 之間。表現(xiàn)出冬寒夏涼、相對濕度大的山地氣候特點(diǎn)[1]。其獨(dú)特的地理位置和氣候環(huán)境適宜茶樹生長。

柳州九萬山具有豐富的野生茶樹資源，但目前針對當(dāng)?shù)氐囊吧Y源的研究并不多。筆者對柳州九萬山野生茶樹資源春季茶樣進(jìn)行生化成分分析，旨在全面了解其春茶的品質(zhì)特點(diǎn)，為優(yōu)質(zhì)茶樹資源的篩選提供一定的依據(jù)，使其發(fā)揮在生產(chǎn)和育種中的應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 材料來源

試驗(yàn)以柳州市林業(yè)科學(xué)研究所種質(zhì)資源圃保存的150 份九萬山野生茶樹資源為研究對象，分別進(jìn)行編號（1～150 號）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品制備 采用蒸汽殺青法制備干茶茶樣，采用1.5∶250 的茶水比例制備茶湯樣品。

1.2.2 測定方法 參考茶樹種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)[2]的方法，在春季采摘第一輪新梢的1 芽2 葉固樣，粉碎后用于生化成分測定水浸出物，茶多酚和氨基酸含量的測定采用國標(biāo)法（GB/T 8305、GB/T 8313、GB/T 8314），咖啡堿和兒茶素的組分及含量的測定參考王慶等[3]的HPLC 方法。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

基本統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 17.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 野生茶樹主要生化成分的檢測

從表1 可以看出，柳州九萬山野生茶樹群體品種春茶在生化成分上差異明顯，除水浸出物外各生化成分均存在較大的變異系數(shù)，說明柳州九萬山野生茶樹資源變異類型豐富，在育種方面有著廣闊的開發(fā)利用前景。

在影響茶葉品質(zhì)的4 項(xiàng)常規(guī)生化成分（水浸出物、茶多酚、氨基酸、咖啡堿）中，變異系數(shù)最大的是氨基酸，達(dá)到21.55%；最小的是水浸出物為10.35%，說明在這4種成分上，氨基酸的開發(fā)利用潛力最大，而水浸出物的最小。47%的資源水浸出物含量在35%～45%，最高為45.08%，最低為0.32%；64%的資源茶多酚含量在20%～34%，最高為34.59%，最低為11.10%；68%的資源氨基酸含量在3.0%～5.0%，最高為5.06%，最低為1.14%；89%的資源咖啡堿含量在3.0%～6.0%，最高的為6.31%，最低的為2.35%。

兒茶素屬于黃烷醇類化合物，在茶葉中的含量為12%～24%，是茶葉中多酚類物質(zhì)的主體成分，具有抗氧化、抗菌、抗腫瘤、抗病毒、除臭、抑制低密度脂蛋白與血糖上升等功效，是茶葉中利用程度最高的功能性成分，其中EGCG 屬酯型兒茶素，含量最高，約占總量的50%左右[4,5]。從表1 可以看出，在總的兒茶素含量上，柳州九萬山野生茶樹群體品種資源間的差別較大，最高的為189.81 mg/g，最低的為49.23 mg/g，相差近4 倍，其中76%的資源含量在100～190 mg/g。兒茶素類物質(zhì)各組分中抗氧化作用最強(qiáng)的是EGCG，其含量最高的為82.77 mg/g，最低的為14.59 mg/g，其中46%的資源含量在50～83 mg/g，這說明柳州九萬山野生茶樹春茶的兒茶素類含量相對較高，且有著較高的EGCG 含量，可以考慮作為開發(fā)高EGCG 茶的鮮葉原料。在兒茶素的組成上柳州九萬山野生茶樹春茶資源也存在較大的差異。從表1 可以看出，非酯型兒茶素的變異系數(shù)高于酯型兒茶素，變異系數(shù)最大的是EC 含量，達(dá)到73.85%，其次是EGC 和D,L-C，而且在體現(xiàn)茶樹進(jìn)化程度的EC 和D,L-C 占整個(gè)兒茶素的絕大部分比例，柳州九萬山野生茶樹春茶資源類型也非常豐富，兒茶素含量的變異也校明顯（CV=41.03%），說明柳州九萬山野生茶樹在進(jìn)化程度上存在豐富的多樣性，既具有比較原始的類型，也有進(jìn)化程度較高的類型。

咖啡堿（CAF）是茶葉品質(zhì)的特征成分之一，茶葉中的含量大多在2%～4%左右[6]。咖啡堿具有興奮中樞神經(jīng)，可起到提神、利尿等多種作用和療效[7]。咖啡堿與茶葉品質(zhì)關(guān)系密切，咖啡堿含量可以較好地反映茶樹品種鮮葉形成茶黃素以及紅茶品質(zhì)的潛力[8]。從表1 可以看出，柳州九萬山野生茶樹春茶資源咖啡堿含量的變化幅度較大（2.35%～6.31%,CV=18.97%），在150 份春茶樣品中咖啡堿含量在5%以上的有9 份。在以后的實(shí)際應(yīng)用中可以從中篩選出高咖啡堿的春茶品種，為茶樹資源多用途開發(fā)提供新的途徑，增加柳州九萬山野生茶樹資源的利用率和產(chǎn)值。

2.2 野生茶樹春茶酚氨比的分析

酚氨比小于8 適制綠茶，8～15 紅綠兼制，大于15 適制紅茶[9]。對于綠茶品質(zhì)，茶多酚具有雙重效應(yīng)：他是決定茶湯濃度的主要物質(zhì)，含量高茶湯濃度大，同時(shí)苦澀味也濃，含量超出一定的范圍會(huì)對滋味形成帶來消極影響[10]。150個(gè)茶樣的酚氨比為2.53～21.32，平均為7.10，其中有109個(gè)茶樣酚氨比在2.5～8.0 之間，有38個(gè)茶樣酚氨比在8～15 之間，有3個(gè)茶樣酚氨比大于15。其中氨基酸的絕對含量在4%以上的有21個(gè)茶樣，說明他們適宜加工名優(yōu)綠茶。

2.3 野生茶樹優(yōu)質(zhì)資源的篩選

通過綜合對比和分析各項(xiàng)生化成分的數(shù)據(jù)，從150 株柳州九萬山野生茶樹春茶資源中發(fā)現(xiàn)有7 株植株在生化成分方面綜合表現(xiàn)較為優(yōu)秀，其主要特點(diǎn)為水浸出物含量較高，茶多酚含量適中，氨基酸>3%，酚氨比<20，咖啡堿含量>5%，兒茶素及EGCG 含量適中。這些優(yōu)質(zhì)資源分別為30 號、42 號、56 號、58 號、71 號、99 號，130 號?？稍谝院蟮牧挤N選育中直接利用，也可作為母本保存。具體的生化成分表現(xiàn)如表2。

2.4 野生茶樹特異資源的篩選

隨著研發(fā)和創(chuàng)制健康功能性茶葉研究的不斷深入，茶氨酸、茶多酚、咖啡堿等含量特異的茶樹種質(zhì)資源具有廣闊應(yīng)用前景。茶樹種質(zhì)資源篩選研究表明[10]：茶多酚含量高于34%，氨基酸含量高于3%，咖啡堿含量高于5%、水浸出物高于48%者，視為超常規(guī)水平的品種株系或單株。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，從柳州九萬山野生茶樹群體品種春茶資源中篩選出一批在生化成分上比較特異的資源，其中42 號高茶多酚（>34%），131號、96 號、62 號、59 號、111 號、45 號、35 號、18 號、112號、103 號高氨基酸（>4%），129 號、68 號、67 號、58號、20 號、19 號、4 號、54 號、17 號高咖啡堿（>5%），12號、24 號、67 號、99 號、5 號、17 號高兒茶素（>180 mg/g），99 號、12 號、93 號高EGCG（>80 mg/g）。

表2 柳州九萬山野生茶樹優(yōu)質(zhì)資源樣品主要生化成分含量

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)柳州九萬山野生茶樹資源的種質(zhì)具有豐富的變異，在很多成分上變異系數(shù)較大，在育種方面有很大的潛力。結(jié)果表明，柳州九萬山野生茶樹資源既有進(jìn)化上比較原始的類型（非酯型兒茶素比例較高），也有進(jìn)化程度較高的類型（酯型兒茶素比例高），反映了柳州九萬山野生茶樹資源的多樣性。柳州九萬山野生茶樹的酚氨比總體較小，平均為7.10，個(gè)別大于15。因此，柳州九萬山野生茶樹各品種的春茶在適制性方面整體表現(xiàn)為綠茶，部分紅綠茶兼制。通過對數(shù)據(jù)的分析和比對，從150 份春茶資源中篩選出一批生化成分綜合表現(xiàn)優(yōu)秀的資源，這些資源整體表現(xiàn)良好，其中氨基酸作為影響茶湯鮮爽度較大的因子表現(xiàn)較為優(yōu)秀（如30 號，42 號，130 號等），可以作為高氨基酸資源發(fā)揮在育種上的作用；同時(shí)篩選出一批生化成分具有特異性的資源，這些資源在某一成分或幾個(gè)成分上具有較高的含量（如99 號，42 號，129 號等）。

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