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    苧麻混菌脫膠工藝研究

    2015-10-09 22:34:16陳其國等
    湖北農(nóng)業(yè)科學 2015年17期
    關鍵詞:混菌脫膠苧麻

    陳其國等

    摘要:將培養(yǎng)36 h后的B3、B5種子液和培養(yǎng)48 h后的M1種子液,按照順序間隔12 h接種10 mL于裝有3 g苧麻[Boehmeria nivea (L.) Gaudich.]原樣、100 mL原始脫膠液的250 mL三角瓶中,通過單因素和正交試驗,得到苧麻最佳混菌脫膠工藝為按照B3B5M1接種順序,原始脫膠液pH 6,培養(yǎng)溫度35 ℃,轉速為150 r/min,脫膠時間60 h,在此條件下,苧麻脫膠率最高可以達到29.9%。

    關鍵詞:苧麻[Boehmeria nivea (L.) Gaudich.];混菌;脫膠

    中圖分類號:TS123+.2 文獻標識碼:A 文章編號:0439-8114(2015)17-4253-03

    苧麻[Boehmeria nivea (L.) Gaudich.]是蕁麻科(Urticaceae)多年生宿根性草本植物,有“中國草”之稱,是重要的紡織纖維作物。中國苧麻栽培面積和產(chǎn)量均居世界首位,占世界總產(chǎn)量的90%以上,是世界上苧麻最大生產(chǎn)國和原料及加工織物的輸出國[1]。

    苧麻纖維脫膠是影響苧麻纖維紡織加工的重要環(huán)節(jié),傳統(tǒng)的化學脫膠方法存在著工藝流程長、工序多、勞動強度高、能耗大、成本高、廢水中有害化學成分不易回收、廢水色度深、堿性強、有機成分復雜等缺點[2]。另外纖維上或多或少會附著一部分化學物質(zhì),殘留的化學物質(zhì)影響人體健康[3]。微生物脫膠則是利用微生物或微生物產(chǎn)生的酶將膠質(zhì)分解,其實質(zhì)就是“膠養(yǎng)菌,菌產(chǎn)酶,酶脫膠”循環(huán)的結果[4]。微生物脫膠作用條件溫和,對纖維損傷小,還能提高苧麻纖維的光澤度,可以滿足高質(zhì)量混紡產(chǎn)品的要求,處理后的麻纖維柔軟、蓬松,且具有良好的絲光感,極大地提高了苧麻纖維的紡紗支數(shù)、可紡性和染色性能,而且微生物法脫膠能耗少,對環(huán)境的污染小,更有利于環(huán)境保護[5]。本研究采用M1、B5、B3三株脫膠菌株對苧麻纖維進行脫膠處理,考察混合菌處理苧麻的脫膠效果,以期為苧麻高效脫膠提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    菌種:M1、B5、B3三株脫膠菌株,由武漢職業(yè)技術學院應用生物技術研究所提供。

    苧麻:苧麻原麻。

    培養(yǎng)基:①細菌斜面培養(yǎng)基。胰蛋白胨10 g,氯化鈉10 g,酵母提取物5 g,瓊脂15 g,水1 000 mL,pH 7.0 ,0.1 MPa高壓蒸氣滅菌20 min。②霉菌斜面培養(yǎng)基。葡萄糖10 g,蛋白胨5 g,KH2PO4·3H2O 1.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,孟加拉紅0.03 g,瓊脂15 g,水1 000 mL,pH 自然,0.1 MPa高壓蒸氣滅菌20 min。③細菌液體種子培養(yǎng)基。胰蛋白胨1 g,氯化鈉1 g,酵母提取物0.5 g,水100 mL,pH 7.0 ,0.1 MPa高壓蒸氣滅菌20 min。④霉菌液體種子培養(yǎng)基。麩皮1.0 g,酵母膏0.6 g,KH2PO4·3H2O 0.1 g,MgSO4·7H2O 0.05 g,氯化鈉0.5 g,水100 mL,pH 6.0,0.1 MPa高壓蒸氣滅菌20 min。⑤原始脫膠液培養(yǎng)基。Na2HPO4·12H2O 1 g,NH4Cl 2 g, MgSO4·7H2O 0.2 g,KCl 0.2 g,蛋白胨0.1 g,牛肉膏 0.2 g,水100 mL,pH 自然,0.1 MPa高壓蒸氣滅菌20 min。

    主要儀器:HQ45Z型恒溫搖床;101-2AB型電熱鼓風干燥箱;DH5000AB型電熱恒溫培養(yǎng)箱;YXQ-LS-75SII型立式壓力蒸氣滅菌器。

    1.2 試驗方法

    1.2.1 菌種活化 將菌株B5、B3、M1分別接種到細菌、霉菌斜面培養(yǎng)基上,在30 ℃下培養(yǎng)48 h。

    1.2.2 種子液的制備 用接種環(huán)分別挑取一環(huán)斜面培養(yǎng)基上的細菌和霉菌,接種到裝有100 mL細菌和霉菌液體種子培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中,于30 ℃恒溫,150 r/min振蕩培養(yǎng),細菌培養(yǎng)36 h,霉菌培養(yǎng)48 h。

    1.2.3 脫膠率的測定 脫膠率根據(jù)下式計算:

    GL=■×100%

    式中,GL為脫膠率,%;G0為脫膠前苧麻的質(zhì)量(即自然晾曬干的苧麻質(zhì)量減去含水量),g; Gr為脫膠后苧麻的質(zhì)量(即苧麻烘干至恒重后的質(zhì)量),g[6]。

    1.2.4 混菌脫膠條件的優(yōu)化 將細菌B5、B3種子液和霉菌M1種子液按一定比例加入定量的苧麻和水中,在振蕩培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng),進行苧麻混菌脫膠試驗。脫膠完成后取出麻樣,充分洗滌,85 ℃烘至恒重,稱量計算苧麻脫膠后的脫膠率。利用單因素試驗考察3種菌株種子液的接種順序、轉速、溫度和時間對苧麻脫膠率的影響,并在單因素試驗的基礎上設計正交試驗。

    2 結果與分析

    2.1 菌種添加順序對苧麻脫膠效果的影響

    將培養(yǎng)36 h后的 B5、B3種子液和培養(yǎng)48 h后的M1種子液,按不同順序間隔12 h接種10 mL于裝有3 g 苧麻原樣、100 mL原始脫膠液的250 mL三角瓶中,30 ℃恒溫培養(yǎng),100 r/min 搖瓶脫膠60 h,考察不同菌種添加順序對苧麻脫膠效果的影響,結果如表1所示。由表1可以看出,3個菌株混合脫膠的苧麻脫膠率最低為19.8%,其中接種順序為B3B5M1的脫膠效果最佳,脫膠率達到24.4%,表現(xiàn)出較強的協(xié)同作用,因此后續(xù)試驗中采用B3B5M1的混合接種順序。

    2.2 溫度對苧麻脫膠效果的影響

    將培養(yǎng)36 h后的 B5、B3種子液和培養(yǎng)48 h后的M1種子液,采用B3B5M1的混合接種順序,間隔12 h接種10 mL于裝有3 g 苧麻原樣、100 mL原始脫膠液的250 mL三角瓶中,28、35、37、40 ℃恒溫培養(yǎng),100 r/min 搖瓶脫膠60 h,考察不同溫度對苧麻脫膠效果的影響,其結果如表2所示。由表2可以看出,隨著脫膠溫度的不斷升高,苧麻脫膠率先升高后下降,溫度為35 ℃時,混合菌株對苧麻脫膠的效果最好,苧麻脫膠率達到25.1%。主要原因是溫度過低時,脫膠菌株生長緩慢甚至停止生長,酶活力降低,脫膠效果差。根據(jù)微生物的生長規(guī)律,在一定溫度范圍內(nèi),微生物的生長繁殖和代謝活動隨著溫度的上升而增加,但是當溫度上升到一定的程度時,則開始對微生物生長繁殖和代謝活動產(chǎn)生不利的影響[7],溫度高于35 ℃時,菌株的繁殖和酶的活性受到抑制,尤其是菌株M1的代謝活力下降,混合菌株的協(xié)同脫膠作用降低,從而導致脫膠率降低。

    2.3 轉速對苧麻脫膠效果的影響

    將培養(yǎng)36 h后的 B5、B3種子液和培養(yǎng)48 h后的M1種子液,采用B3B5M1的混合接種順序,間隔12 h接種10 mL于裝有3 g 苧麻原樣、100 mL原始脫膠液的250 mL三角瓶中, 35 ℃恒溫培養(yǎng),100、120、150、180 r/min 搖瓶脫膠 60 h,考察不同轉速對苧麻脫膠效果的影響,結果如表3所示。由表3可知,轉速對混菌脫膠效果的影響并不是很大,其中轉速在150 r/min時的脫膠效果最好,苧麻脫膠率為25.7%。之后再增加轉速,脫膠率反而有所下降。

    2.4 原始脫膠液pH對苧麻脫膠效果的影響

    將培養(yǎng)36 h后的B5、B3種子液和培養(yǎng)48 h后的M1種子液,采用B3B5M1的混合接種順序,間隔12 h接種10 mL于裝有3 g苧麻原樣、100 mL原始脫膠液的250 mL三角瓶中,35 ℃恒溫培養(yǎng),150 r/min搖瓶脫膠60 h,分別調(diào)節(jié)原始脫膠液的pH至5、6、7、8,考察不同pH對苧麻脫膠效果的影響,結果如表4所示。由表4可知,隨著原始脫膠液pH的升高,苧麻脫膠率先升高后降低,pH 6時,混合菌株對苧麻的脫膠效果最好,其脫膠率達到29.1%。pH是影響微生物生長的重要環(huán)境因素之一,且每種微生物都有其最適生長的pH,過高或者過低的pH都會影響微生物的生長和代謝,而且影響其分泌酶的數(shù)量和酶活性[7],從而導致脫膠效果差,脫膠率較低。

    2.5 脫膠時間對苧麻脫膠效果的影響

    將培養(yǎng)36 h后的 B5、B3種子液和培養(yǎng)48 h后的M1種子液,采用B3B5M1的混合接種順序,間隔12 h接種10 mL于裝有3 g 苧麻原樣、100 mL原始脫膠液(pH 6)的 250 mL 三角瓶中, 35 ℃恒溫培養(yǎng),150 r/min搖瓶脫膠36、48、60、72 h,考察不同脫膠時間對苧麻脫膠效果的影響,結果如表5所示。由表5可知,隨著時間的延長,脫膠菌的數(shù)量進一步增加,分泌脫膠酶的數(shù)量和活力逐步上升,苧麻脫膠率獲得較快的提升;脫膠60 h時,苧麻脫膠率最高,之后隨著脫膠時間的延長,營養(yǎng)成分過多消耗,導致脫膠菌的產(chǎn)酶能力逐步下降,脫膠率處于穩(wěn)定狀態(tài),說明混合菌株的脫膠過程已經(jīng)趨于完成。從生產(chǎn)角度考慮,苧麻脫膠時間以60 h較為合適。

    2.6 混菌脫膠條件的正交優(yōu)化結果

    在前期單因素試驗的基礎上,選取脫膠溫度、轉速、脫膠液原始pH、脫膠時間,按照L9(34)正交表進行4因素3水平正交試驗,試驗因素與水平見表6。

    以苧麻脫膠率為指標確定混菌最佳脫膠條件,正交試驗結果見表7。由表7可以看出,影響苧麻混菌脫效果的順序為A>C>D>B,即脫膠溫度的影響最大,其次是脫膠液原始pH,影響因素較弱的是脫膠時間,最弱的是轉速。苧麻混菌脫膠條件的最佳組合是A2B3C1D2,即脫膠溫度35 ℃、轉速150 r/min、pH 6、脫膠時間60 h的條件下苧麻混菌脫膠效果最好,在此條件下,脫膠率達29.9%。

    3 結論

    B5、B3、M1三種菌株進行混菌脫膠過程中,接種順序對脫膠效果的影響較大,按B3B5M1順序接種脫膠,脫膠效果最佳。將培養(yǎng)36 h后的 B5、B3種子液和培養(yǎng)48 h后的M1種子液,采用B3B5M1的混合接種順序,間隔12 h接種10 mL于裝有3 g苧麻原樣、100 mL原始脫膠液(pH 6)的250 mL三角瓶中, 35 ℃恒溫培養(yǎng),150 r/min搖瓶脫膠60 h,苧麻脫膠率最高可以達到29.9%。

    參考文獻:

    [1] 姜繁昌,邵 寬,周 巖.苧麻紡紗學[M].北京:紡織工業(yè)出版社,1986.1-2.

    [2] 管映亭.苧麻酶法脫膠的研究[J].上海紡織科技,1998,27(4):4-6.

    [3] 金 鋼.大麻脫膠方法的研究進展[J].南京林業(yè)大學學報(自然科學版),2009,33(4):140-144.

    [4] 彭源德,楊喜愛,嚴 理,等.亞麻脫膠過程中常用酶類的動態(tài)變化[J].紡織學報,2006,27(4):11-14.

    [5] 鐘安華,譚遠友,王成國.苧麻嗜堿細菌工藝研究[J].印染助劑,2004,21(3):24-26.

    [6] ZHENG L S, DU Y M, ZHANG J Y. Degumming of ramie fibers by alkalophilic bacteria and their polysaccharide-degrading enzymes[J]. Bloresource Technology, 2001(8):89-94.

    [7] 沈 萍.微生物學[M].北京:高等教育出版社,2001.143-145.

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