副溶血性弧菌食物中毒的檢驗(yàn)及分析

胡瑞利等

【摘 要】2012年5月12日，重慶市榮昌縣食品藥品分局接報(bào)一宗發(fā)生在榮昌縣金昌大酒店食物中毒的案件。重慶市榮昌縣疾控中心根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，并結(jié)合臨床癥狀，確認(rèn)本次食物中毒是由副溶血弧菌引起。本文就檢驗(yàn)角度就有關(guān)問題進(jìn)行討論。

【關(guān)鍵詞】副溶血性弧菌；食物中毒；檢驗(yàn)

1 流行病學(xué)調(diào)查

經(jīng)調(diào)查，本次事件先后有24人因惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉等癥狀到醫(yī)院急診科就診。發(fā)病患者首先是惡心、嘔吐，緊接著腹痛、腹瀉（4-12次，主要以水樣便為主）。發(fā)病潛伏期最短為6小時(shí)，最長(zhǎng)為36小時(shí)。

2 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

2.1 樣品來源

采取酒店可疑食物5份（為第二天食物，當(dāng)天食物未留樣），酒店廚師肛拭2份，患者肛拭1份，嘔吐物2份，大便4份。

2.2 檢驗(yàn)方法

（1）取所采食物樣品25g，加入到裝有225ml滅菌生理鹽水的無菌袋中，于均質(zhì)器上均質(zhì)2分鐘，制成樣液。將樣液及所采的肛拭子、大便、嘔吐物，分別加入到SC增菌液、GN增菌液、7.5%氯化鈉肉湯、堿性蛋白胨水、3%氯化鈉堿性蛋白胨水置于37℃增菌，同時(shí)劃線SS、血平板、TCBS、4號(hào)瓊脂，置37℃24h，做沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌的直接分離。

（2）各直接分離平板經(jīng)24h培養(yǎng)后取出，除TCBS上有可疑綠色光滑圓形菌落生長(zhǎng)外，其余平板均無可疑菌落生長(zhǎng)。

（3）各增菌液經(jīng)培養(yǎng)后取出分別劃線接種SS、血平板、TCBS、弧菌科顯色培養(yǎng)基、4號(hào)瓊脂，經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后除TCBS上有可疑綠色光滑圓形菌落、弧菌科顯色培養(yǎng)基上紫色光滑圓形菌落生長(zhǎng)外，其余平板均無可疑菌落生長(zhǎng)，并且增菌后平板上菌落生長(zhǎng)情況和直接分離平板上菌落生長(zhǎng)情況相同。

（4）14份標(biāo)本中有5份標(biāo)本在增菌后平板分離和直接分離均有可疑綠色菌落、弧菌科顯色培養(yǎng)基上紫色光滑圓形菌落生長(zhǎng)，革蘭氏染色陰性，短棒狀，卵圓狀等不規(guī)則形。

（5）將可疑菌落分別接種3%氯化鈉三糖鐵和3%氯化鈉TSA培養(yǎng)基于37℃培養(yǎng)24h后取出，做嗜鹽性試驗(yàn)及相關(guān)生化試驗(yàn)，經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后結(jié)果如表1。

2.3 檢驗(yàn)結(jié)果

14份樣品中共檢出副溶血弧菌5株，檢出率35.7%。未檢出沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、霍亂弧菌。

3 討論

（1）副溶血弧菌（又稱嗜鹽菌 Vibrio Parahaemolyticus）是革蘭氏陰性多形態(tài)桿菌或稍彎曲弧菌。該菌嗜鹽畏酸，在無鹽培養(yǎng)基上，不能生長(zhǎng)，3%～7%食鹽水繁殖迅速，每8～9分鐘為1周期，低于0.5%或高于8%鹽水中停止生長(zhǎng)。在食醋中1～3分鐘即死亡，加熱56℃5～10分鐘滅活，在1%鹽酸中5分鐘死亡。副溶血性弧菌分布極廣，主要分布在海水和水產(chǎn)品中，我國華東地區(qū)沿岸的海水的副溶血性弧菌檢出率為47.5%～66.5%，海產(chǎn)魚蝦的平均帶菌率為45.6%～48.7%，夏季可高達(dá)90%以上。

（2）副溶血弧菌對(duì)營養(yǎng)要求不高，在普通瓊脂中加入適量氯化鈉即可生長(zhǎng)，從本文所介紹的檢驗(yàn)方法即可看出：對(duì)副溶血弧菌的檢驗(yàn)及鑒定過程并不復(fù)雜，關(guān)鍵是樣品的采集和及時(shí)送檢，若不能及時(shí)送檢，不能放冰箱保存，因其不耐低溫，最好將樣本放堿性蛋白胨水中。

（3）從本次食物中毒來看，食品安全問題應(yīng)該受到越來越高的重視。為此，建議：一、加大對(duì)食品原材料的監(jiān)督力度，從源頭把住食品衛(wèi)生第一關(guān)。二、加強(qiáng)對(duì)餐飲企業(yè)執(zhí)行衛(wèi)生制度和操作規(guī)程的檢查督促，用嚴(yán)格的制度規(guī)范食品從業(yè)人員自覺遵守有關(guān)制度和操作規(guī)程。三、衛(wèi)生監(jiān)督人員應(yīng)該嚴(yán)格要求餐飲企業(yè)每天對(duì)菜品進(jìn)行留樣。

參考文獻(xiàn)

[1]食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)副溶血性弧菌檢驗(yàn)[Z].GB/T4789.7-2008.