廣州市1596例產(chǎn)篩夫婦β-地中海貧血基因流行分布

余志衡 李萍 黃革

廣州市1596例產(chǎn)篩夫婦β-地中海貧血基因流行分布

余志衡 李萍 黃革

目的 通過調(diào)查廣州地區(qū)產(chǎn)檢夫妻中的β-地中海貧血 ( 簡稱β地貧)攜帶率及基因突變類型, 分析本地區(qū)β地貧流行規(guī)律。方法 采用血常規(guī)、紅細(xì)胞脆性及血紅蛋白電泳對婚前檢查、產(chǎn)前檢查的798對夫妻(總計(jì)1596人)進(jìn)行地中海貧血(簡稱地貧)篩查, PCR-RDB法對β-地貧進(jìn)行基因診斷。結(jié)果 在798對篩查夫妻中, 地貧陽性有505例, 檢出率為31.6%。通過PCR分析, 發(fā)現(xiàn)6種常見類型 ：βCD41-42/βN(193例)、βIVS-Ⅱ-654/βN(124例)、β-28/βN(107例)、βCD17/βN(44例)、βE/βN(14例)、βCD71-72/βN(10例)。結(jié)論 廣州地區(qū)是β-地貧的高發(fā)區(qū), 篩查陽性的標(biāo)本檢出率很高且類型相對集中, 明確該地區(qū)β地貧分布規(guī)律, 為更好開展產(chǎn)前診斷預(yù)防β重型地貧患兒出生提供了理論依據(jù)。

β-地中海貧血；產(chǎn)前診斷；基因突變

地貧是一種單基因遺傳性血紅蛋白病, 主要分為α地貧和β地貧兩種。其中, β地貧在我國南方特別是廣東、廣西、海南為高發(fā)區(qū)［1］, 其中β地貧在廣東地區(qū)的發(fā)病率約為3.36%［2］。其發(fā)生的分子基礎(chǔ)是位于11號染色體短臂末端15.3位點(diǎn)上的人β珠蛋白基因突變, 基因突變導(dǎo)致β珠蛋白肽鏈合成障礙、失衡。通常, 重型β地貧患兒會在出生后1年內(nèi)發(fā)病, 隨著年齡增長而逐漸加重。如果無法進(jìn)行有效的骨髓移植, 就只能靠輸血和合理的除鐵方法來維持生命。因此, 該疾病給患兒家庭和社會造成嚴(yán)重的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此, 為了阻止重癥β地貧胎兒的出生, 對高危孕婦進(jìn)行產(chǎn)前診斷是十分必要的。由于β地貧患兒發(fā)病的情況和嚴(yán)重程度與基因突變類型和基因型密切相關(guān), 并因此分為輕型β地貧、中型β地貧和重型β地貧。所以, 了解本地區(qū)的β地貧基因的攜帶情況以及β地貧基因的突變分布, 是對同為攜帶者的夫婦雙方進(jìn)行產(chǎn)前診斷的必要基礎(chǔ),從而積極預(yù)防重型β地貧患兒的出生。本文對798對夫妻(總計(jì)1596人)進(jìn)行地貧篩查, 具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年1月～2015年4月在廣州市各區(qū)、縣進(jìn)行產(chǎn)前檢查的夫婦, 其中一方或雙方地貧篩查(運(yùn)用血常規(guī)和血紅蛋白分析)陽性［血紅蛋白A2(HbA2)＞3.5%以及平均紅細(xì)胞體積(MCV)＜82 fl篩查初定為β地貧陽性］。經(jīng)咨詢后, 其自愿進(jìn)行地貧產(chǎn)前基因分析, 共798對夫婦, 總計(jì)1596人。

1.2 方法

1.2.1 提取DNA 抽取靜脈血2 ml注入EDTA-K2抗凝管,采用凱普生物化學(xué)有限公司的血液DNA提取試劑盒提取。

1.2.2 地貧的基因診斷 β地貧試劑盒是凱普生物化學(xué)有限公司提供的地貧基因診斷試劑盒。本所使用的PCR 擴(kuò)增儀為美國API-PCR儀。β地貧基因診斷采用PCR+膜雜交法技術(shù), 可檢測中國人群11個(gè)常見的β地貧基因突變位點(diǎn)。

2 結(jié)果

β地貧基因檢測結(jié)果：共檢出β地貧基因攜帶者505例(見表1)。本研究中共檢出13種地貧基因型, 其中攜帶率最高的為CD41-42/N, 達(dá)38.2%。

表1 β地貧基因型及構(gòu)成比例(n, %)

3 討論

地貧是我國長江以南各省發(fā)病率最高、影響最大的一類血紅蛋白病。全球受累人口超過 2 億, 是最大的單基因遺傳病。目前全世界發(fā)現(xiàn)的β地貧基因突變已有200多種。在中國, β地貧基因突變類型有34種, 上述方法檢測有13種,不同地區(qū)的人群有各自的常見基因突變類型［3］。如上所述,廣州地區(qū)常見6種類型已占95%以上。重型α地貧大多數(shù)在孕中晚期出現(xiàn)胎兒宮內(nèi)死亡, 少數(shù)出生后很快死亡。但是,重型β地貧患兒只能依靠規(guī)范長期輸血和應(yīng)用鐵螯合劑除鐵治療, 除非能夠找到合適的骨髓供體進(jìn)行造血干細(xì)胞移植。由于目前找到合適的供體非常難, 無法成為常規(guī)治療手段, 所以應(yīng)用 DNA 分析技術(shù)對該病進(jìn)行早期產(chǎn)前診斷并選擇性終止妊娠是防止重型地貧患兒出生國際上公認(rèn)的首選辦法［4］。在患兒未出生時(shí), 由于該基因基本處于關(guān)閉狀態(tài), 所以只有低水平表達(dá), 導(dǎo)致β地貧的突變對基因表達(dá)的抑制作用在胎兒剛出生時(shí)并不明顯。胎兒出生后, β基因表達(dá)水平日益提高, 癥狀因而也日益明顯, 呈慢性溶血性貧血、黃疸、肝脾腫大。因此, 重型β地貧患兒出生時(shí)并無臨床癥狀。出生后, 隨著β基因的逐漸開放, 由突變引起的β基因明顯受到抑制, 不能表達(dá)或很低水平的表達(dá), 受累的純合子患兒出現(xiàn)上述貧血病癥。β珠蛋白基因上不同位點(diǎn)的突變對β珠蛋白肽鏈合成量減少的影響不盡相同。其中, 分為β+-地貧和β0-地貧。β+-地貧僅導(dǎo)致β珠蛋白鏈合成減少；而β0-地貧導(dǎo)致β珠蛋白基因功能出現(xiàn)完全喪失, 體內(nèi)β珠蛋白鏈完全不能合成。

為了有效地減少重型β地貧患兒的出生, 臨床采用血常規(guī)和血紅蛋白分析進(jìn)行產(chǎn)前篩查, 對于篩查陽性患者則進(jìn)行基因診斷。對于雙方均是β地貧的夫婦, 給予積極的孕前指導(dǎo), 避免重型β地貧患兒出生。這樣對優(yōu)生優(yōu)育, 減少病殘兒出生具有重要意義。因?yàn)樵诘刎毟甙l(fā)區(qū)的該項(xiàng)篩查存在漏診風(fēng)險(xiǎn), 為了減少漏診的發(fā)生, 常建議多做地貧基因檢查以明確診斷。對于有地貧基因攜帶者, 最好改變婚戀觀念,與非地貧高發(fā)區(qū)聯(lián)姻, 這可明顯減少地貧發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。不僅可減輕醫(yī)療機(jī)構(gòu)、家庭及全社會的負(fù)擔(dān)和壓力, 并且有利于優(yōu)生優(yōu)育, 提高我國人口素質(zhì)。目前, 在婚前、孕前做好地貧篩查, 刻不容緩, 工作意義重大, 能夠有效地避免重型β地貧患兒的出生, 提高本地區(qū)的人口質(zhì)量。

［1］ 樂杰.婦產(chǎn)科學(xué).第7版.北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2008:92-99.

［2］ 全國血紅蛋白病研究協(xié)作組.20省、市、自治區(qū)60萬人血紅蛋白病調(diào)查.中華醫(yī)學(xué)雜志, 1983, 63(6):382-385.

［3］ Hardison RC, Chui DH, Giardi B, et al.HbVar:a relational database of human hemoglobin variants and thalassemia mutations at the globin gene server.Hum Mutat, 2002, 19(3):225-233.

［4］ Cao A, Kan YW.The prevention of thalassemia.Cold Spring Harb Perspect Med, 2013, 3(2):a011775.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.33.029

廣東省人口和計(jì)劃生育委員會科研項(xiàng)目(項(xiàng)目編號：2012311)

510410 廣州市人口和計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)指導(dǎo)所(余志衡 梁麗姬)；廣東省人民醫(yī)院(李萍 黃革)

李萍

2015-05-25］