硝碘酚腈注射液的初步安全性評(píng)價(jià)

林永樂　福建省漳州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心　363000

硝碘酚腈注射液的初步安全性評(píng)價(jià)

林永樂福建省漳州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心363000

為評(píng)價(jià)硝碘酚腈注射液的安全性，對(duì)硝碘酚腈注射液進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)和蓄積毒性試驗(yàn)，結(jié)果顯示硝碘酚腈注射液的LD50為68.37mg/kg，硝碘酚靜注射液為中等毒性并有明顯的蓄積毒性。

硝碘酚腈肝片吸蟲安全性

肝片吸蟲是一種能夠危害人和動(dòng)物的寄生蟲，其中以牛、羊等反芻動(dòng)物最為普遍，每年均引起重大的經(jīng)濟(jì)損失。硝碘酚腈是由法國(guó)羅納梅里厄研究所研制開發(fā)的一種有效的、新型的驅(qū)除肝片吸蟲的合成藥物，其市場(chǎng)銷售類型為硝碘酚腈與甲基或乙基葡萄糖氨的滅菌水針劑。硝碘酚腈對(duì)牛羊肝片吸蟲、大盤吸蟲成蟲有100%驅(qū)殺效果，對(duì)牛羊捻轉(zhuǎn)血矛蟲、豬肝片吸蟲和犬鉤蟲也有一定的驅(qū)除作用，但對(duì)未成熟蟲體效果較差。硝碘酚腈與左旋咪唑聯(lián)合用藥對(duì)山羊肝片吸蟲和線蟲的驅(qū)除有理想效果。對(duì)牛羊皮下注射硝碘酚睛，30 min后可以達(dá)到血漿高峰濃度，藥物被迅速吸收。硝碘酚腈對(duì)大鼠肝細(xì)胞線粒體功能的影響研究中表明，硝碘酚腈是一種氧化磷酸化作用的解偶聯(lián)劑，它能夠阻斷蟲體的氧化碳酸化作用，降低ATP濃度，減少細(xì)胞分裂所需能量而導(dǎo)致蟲體死亡。本試驗(yàn)通過(guò)急性毒性試驗(yàn)和蓄積毒性試驗(yàn)對(duì)硝碘酚腈注射液的安全性做一個(gè)初步評(píng)價(jià)。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物昆明系小白鼠：雄性、體重20±2 g。

1.2試驗(yàn)制劑硝碘酚腈注射液：暗黃色透明液體，濃度為340mg/mL，生產(chǎn)批號(hào)為130408，重慶方通動(dòng)物藥業(yè)有限公司。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.2急性毒性試驗(yàn)

1.3.2.1預(yù)試驗(yàn)按1.3.1方法將硝碘酚腈注射液用純化水稀釋成 50 mg/kg、60 mg/kg、70 mg/kg、80mg/kg、90mg/kg 5個(gè)濃度梯度的溶液。取10只小鼠，隨機(jī)分成5組，按0.2 mL/10 g一次性腹腔注射給藥，給藥后連續(xù)飼養(yǎng)觀察7 d。觀察小白鼠中毒現(xiàn)象及時(shí)間順序，記錄每組小鼠死亡只數(shù)。并解剖死亡小白鼠，觀察內(nèi)臟病變情況，并記錄其結(jié)果。

1.3.3蓄積毒性試驗(yàn)采用20 d劑量遞增蓄積系數(shù)法，取20只雄性小白鼠，稱量，標(biāo)記。同時(shí)腹腔注射給藥：一期按每只每天0.l*LD50的量給藥，連續(xù)給藥4 d。二、三、四期按順序遞增50%至動(dòng)物死亡一半 （10只），或繼續(xù)給藥至累計(jì)劑量達(dá) 5.0*LD50（20 d）為止。觀察小鼠中毒現(xiàn)象，記錄小鼠死亡情況并解剖死亡小白鼠。

2　試驗(yàn)結(jié)果

2.1預(yù)試驗(yàn)預(yù)試驗(yàn)分組與試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1　預(yù)試驗(yàn)分組與試驗(yàn)結(jié)果

最小致死劑量a=50 mg/kg，最大致死劑量b= 80mg/kg。

2.2急性毒性試驗(yàn)試驗(yàn)組小白鼠在注射硝碘酚腈幾分鐘后活動(dòng)量明顯減少，均出現(xiàn)呼吸次數(shù)增加，呼吸困難，出現(xiàn)不同程度的精神萎靡，反應(yīng)遲鈍現(xiàn)象，注射濃度越高，反應(yīng)越明顯。低濃度受試組在3 h后恢復(fù)正常。小白鼠開始死亡時(shí)間是給藥后5min，集中死亡時(shí)間是給藥后20～30min，最后死亡時(shí)間是給藥后4 h。小白鼠死亡前現(xiàn)象是亢奮并不斷游走，喜歡扎堆，出現(xiàn)抽搐后幾秒鐘內(nèi)死亡，四肢拉直。解剖死亡的小鼠，腹腔被硝碘酚腈染成黃色，小鼠肝臟有淤血，呈暗黑色。見表2。

表2　急性毒性試驗(yàn)小鼠死亡結(jié)果

計(jì)算：

LD5095%可信區(qū)間為61.94～75.47mg/kg。

2.3蓄積毒性試驗(yàn)第一期試驗(yàn)四次給藥都未出現(xiàn)小鼠死亡。第二期試驗(yàn)第四次給藥后3號(hào)小鼠死亡。第三期試驗(yàn)第一次給藥后4號(hào)小鼠死亡，第二次給藥后6、7號(hào)小鼠死亡，第三次給藥后8、9號(hào)小鼠死亡，第四次給藥后2、15、16號(hào)小鼠死亡。第四期第一次給藥后1、10、11號(hào)小鼠死亡。此時(shí)小鼠死亡超過(guò)一半（10只）。每次給藥前后稱量小白鼠重量，發(fā)現(xiàn)小鼠重量變化不明顯。每次給藥時(shí)小鼠都會(huì)出現(xiàn)呼吸困難、呼吸次數(shù)增加、精神萎靡等現(xiàn)象。但在一段時(shí)間后會(huì)恢復(fù)正常，隨著給藥次數(shù)的增加，每次恢復(fù)的時(shí)間也隨之增加。解剖死亡的小白鼠，發(fā)現(xiàn)腹腔黃染，肝臟呈暗黃色。結(jié)果見表3。

表3　蓄積毒性試驗(yàn)小鼠死亡結(jié)果

計(jì)算蓄積系數(shù)：

K=LD50（n）/LD50（1）=2.6875。1＜K＜3，表明硝碘酚腈注射液有明顯蓄積毒性。

3　分析與討論

硝碘酚腈是目前臨床上有效的抗肝片吸蟲藥之一，具有作用劑量?。?0～20 mg/kg）、使用方便、高效且安全等優(yōu)點(diǎn)。硝碘酚腈注射液為硝碘酚腈與甲基或乙基葡萄糖氨的滅菌水溶液針劑，在試驗(yàn)前應(yīng)該排除其溶劑對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。影響硝碘酚腈注射液的毒理作用的外界因素有氣候、光照、溫度和濕度。預(yù)試驗(yàn)旨在確定硝碘酚腈注射液對(duì)小鼠的最小與最大致死量范圍，為后期準(zhǔn)確測(cè)定硝碘酚腈注射液對(duì)小鼠的半數(shù)致死量提供數(shù)據(jù)。解剖死亡的小白鼠發(fā)現(xiàn)有些小鼠內(nèi)臟無(wú)明顯病變現(xiàn)象，也有死亡小白鼠肝臟淤血，呈暗紅色，表明硝碘酚腈的主要作用靶器官是肝臟。有研究表明硝碘酚腈在血液中與血漿蛋白高度結(jié)合（結(jié)合率97%），具有緩釋作用，能在宿主體內(nèi)存留很長(zhǎng)時(shí)間，這使得硝碘酚腈具有很強(qiáng)的驅(qū)蟲效果，但也因此有較明顯的蓄積毒性，蓄積毒性強(qiáng)，藥物殘留在動(dòng)物體內(nèi)供給每組小鼠腹腔注射用的硝碘酚腈應(yīng)按劑量比例稀釋成一系列濃度的溶液，小鼠腹腔注射給藥標(biāo)準(zhǔn)為0.2 mL/10 g，這樣給藥毫升數(shù)與按體重一致，避免給藥毫升數(shù)過(guò)大而導(dǎo)致小鼠非藥物致死性死亡，影響試驗(yàn)結(jié)果。

4　結(jié)　論

硝碘酚腈注射液的急性毒性試驗(yàn)測(cè)定的LD50為 68.37 mg/kg，LD5095%可 信 區(qū) 間 為 61.94～75.47mg/kg。按我國(guó)急性毒性分級(jí)硝碘酚腈毒性為中等毒性。其蓄積毒性試驗(yàn)表明硝碘酚腈注射液有明顯蓄積毒性。

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A primary evaluation for the safety of nitroxynil injection

Lin Yongle
（Zhangzhou animal disease prevention and control center，Zhangzhou Fujian 363000）

To assess the safety of nitroxynil injection，test the acute toxicity and cumulation toxicity of nitroxynil injection，The results showed that the LD50is 68.37mg/kg，the Conclusion showed that the nitroxynil injection possessmoderate toxicity and obvious cumulation toxicity.

nitroxynil fasciola hepatica safety

A

1003-4331（2015）02-0032-03