加味去傷片主藥的薄層色譜研究

趙嚴(yán)麗，張火旺

(廣東省河源市食品藥品檢驗(yàn)所，廣東 河源 517000)

加味去傷片是由重樓、九節(jié)茶、延胡索、三七、毛冬青5味藥材[1]運(yùn)用現(xiàn)代中醫(yī)藥提取工藝制成的復(fù)方制劑，具有活血化瘀、消腫止痛功效，用于骨折、軟組織扭傷、挫傷早期。加味去傷片是河源市中醫(yī)院制劑，原標(biāo)準(zhǔn)為廣東省食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)，在該標(biāo)準(zhǔn)中僅有加味去傷片性狀描述和簡(jiǎn)單的理化鑒別，無(wú)法控制該藥品的有效性和均一性。本試驗(yàn)中對(duì)處方中重樓、延胡索進(jìn)行了定性研究，建立了其薄層色譜(TLC)鑒別方法。

1 儀器與試藥

SartoriusCPA225D型電子分析天平(精確度0.01 mg，賽多利斯科學(xué)儀器＜北京＞有限公司);KQ－250DA型超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。硅膠G薄層板(自制);硅膠G薄層板(青島海洋化工廠);硅膠G薄層板(MERK公司)。重樓對(duì)照藥材(供鑒別用，批號(hào)為121157－201003)，延胡索對(duì)照藥材(供鑒別用，批號(hào)為120928－201208)，延胡索乙素對(duì)照品(供含量測(cè)定用，批號(hào)為110726－201213)，均由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供;加味去傷片(河源市中醫(yī)院，批號(hào)分別為 20140125，20140126，20140127，規(guī)格為每片0.3 g);乙醇、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯、乙醚、甲苯、丙酮等試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 重樓的鑒別[2－4]

取本品10片，研成細(xì)粉，加乙醇10 mL，超聲處理30 min(功率250 W，頻率100 kHz)，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。取重樓對(duì)照藥材0.5 g，加乙醇10 mL，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。再取缺重樓的陰性對(duì)照樣品，同供試品溶液制備法制得陰性對(duì)照品溶液。照2010年版《中國(guó)藥典(一部)》附錄ⅥB中TLC法試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇－乙酸乙酯－水(20∶0.1∶20)的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光燈和紫外燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾(圖1)。

圖1 重樓鑒別薄層色譜圖

2.2 延胡索的鑒別[2，5]

取本品20片，研細(xì)，加甲醇50 mL，超聲30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，加濃氨試液調(diào)pH至9～10，用乙醚提取2次，每次10 mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取延胡索對(duì)照藥材1 g，同法制備對(duì)照藥材溶液。另取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。再取缺延胡索的陰性對(duì)照品，同供試品溶液制備法制得陰性對(duì)照品溶液。照2010年版《中國(guó)藥典(一部)》附錄ⅥB中TLC法試驗(yàn)，吸取上述4種溶液各2 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－丙酮(5∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置碘缸中約3 min后取出，揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材溶液色譜和對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾(圖2)。

圖2 延胡索鑒別薄層色譜圖

3 討論

不同薄層板比較，取手鋪硅膠G薄層板，預(yù)制硅膠G板和默克板;不同溫度比較，取點(diǎn)樣后的薄層板，分別在6℃和20℃中展開(kāi);不同濕度比較，取點(diǎn)樣后的薄層板，分別在用硫酸調(diào)節(jié)相對(duì)濕度20%和80%的層析缸中展開(kāi)。試驗(yàn)結(jié)果表明，不同條件對(duì)鑒別無(wú)明顯影響。對(duì)于重樓鑒別的展開(kāi)劑，經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)，以正丁醇－乙酸乙酯－水(20∶0.1∶20)的上層溶液為展開(kāi)劑展開(kāi)，取得了很好的效果，能有效排除陰性對(duì)照的干擾現(xiàn)象，其主斑點(diǎn)分離清晰。本方法重復(fù)性好，專屬性強(qiáng)，陰性對(duì)照無(wú)干擾，可作為制訂其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)參考。

[1]Z20070983，醫(yī)療制劑注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)[S].

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:243.

[3]童湘?zhèn)?三七血傷寧膠囊中主藥的薄層色譜研究[J].中國(guó)藥業(yè)，2010，19(14):45.

[4]孟 芹，郭永利，馬克堅(jiān).云南紅藥片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)藥業(yè)，2001，6(1):27 －28.

[5]肖滿民，劉燦輝，葉玉華.天元膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010(5):106－108.