動(dòng)物檢疫過程中材料的采集與方法應(yīng)用

任 凱

(寧夏青銅峽市農(nóng)牧和科學(xué)技術(shù)局751600)

1 動(dòng)物檢疫材料的采集原則

動(dòng)物檢疫材料的采集一般要遵循以下幾個(gè)原則標(biāo)準(zhǔn)，分別為典型原則、合理原則、適實(shí)原則、無菌采樣和安全采樣。樣本的選擇要具有代表性，如果是活體采樣要挑選典型動(dòng)物，具體為具有典型癥狀并且沒有接受任何藥物治療的動(dòng)物。確定動(dòng)物個(gè)體后，對于材料的選擇也要求典型，如應(yīng)該選擇病原體含量比較高的部位進(jìn)行采樣。采樣是還要選擇合理的個(gè)體數(shù)目，一般而言對于群體發(fā)病類的疾病，需要選取至少5個(gè)動(dòng)物個(gè)體作為原始樣本。同時(shí)一定要保證樣本的數(shù)量可以滿足實(shí)驗(yàn)需求，還要考慮到備樣的可能性。采集樣本時(shí)要根據(jù)具體情況進(jìn)行分析，比如應(yīng)該注意采樣的節(jié)令性，對于病死的動(dòng)物要求立刻進(jìn)行采樣，尤其在氣溫比較高的夏季，為了避免動(dòng)物尸體進(jìn)一步腐爛，采樣時(shí)間一般不能超過死亡時(shí)間后4小時(shí)。采樣過程應(yīng)該為無菌的過程，因?yàn)樵S多樣本需要進(jìn)一步進(jìn)行微生物學(xué)、血液學(xué)的相關(guān)檢測，所以必須符合相關(guān)的實(shí)驗(yàn)要求。采樣過程中的采樣人員的安全性也十分重要，相關(guān)采樣人員要嚴(yán)格按照規(guī)范采樣流程進(jìn)行操作，避免可能的感染事故發(fā)生，一旦發(fā)現(xiàn)疫情也要及時(shí)匯報(bào)并隔離病源，防止進(jìn)一步的環(huán)境污染和疫情擴(kuò)散。

2 動(dòng)物檢疫的方法

常見的動(dòng)物檢疫方法根據(jù)工作地點(diǎn)和內(nèi)容的不同可以分為臨場、隔離檢疫、抽樣檢疫和實(shí)驗(yàn)室檢疫。具體的檢疫技術(shù)又涉及到以下幾個(gè)方面。

2.1 個(gè)體檢測

個(gè)體檢查主要針對具有可疑病態(tài)的動(dòng)物，檢驗(yàn)的目的是初步判斷動(dòng)物個(gè)體是否有病，然后再進(jìn)一步進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室檢測的步驟。個(gè)體檢測的方法多樣，比較常見的包括體溫檢測、觀察動(dòng)物精神狀態(tài)、可視粘膜的檢查、觀察動(dòng)物排泄物、脈搏檢查、呼吸檢測等項(xiàng)目。通過個(gè)體檢查基本可以滿足臨床檢驗(yàn)的目的，并得出臨床檢驗(yàn)結(jié)論。一旦發(fā)現(xiàn)可疑的檢測對象，要全面扣押整個(gè)動(dòng)物群，根據(jù)檢測結(jié)果對患病動(dòng)物做進(jìn)一步的調(diào)查分析。

2.2 病理組織學(xué)檢驗(yàn)

人體肉眼無法準(zhǔn)確觀測到樣品組織的許多病變過程，如腫瘤的發(fā)生、腦組織病變等。所以需要借助組織切片和染色技術(shù)，如石蠟切片、蘇木素染色法等技術(shù)。

2.3 病理解剖檢驗(yàn)技術(shù)

這種方法在對動(dòng)物尸體的檢驗(yàn)中十分常見，對于樣本需要先檢查其體表特征以排除一些可能的惡性傳染病，如炭疽等疾病。同時(shí)仔細(xì)觀察動(dòng)物尸體的體表狀況，如皮膚、毛發(fā)、毛孔等細(xì)節(jié)。記錄體表特征后可以進(jìn)一步檢查動(dòng)物尸體的皮下、臟器、口腔、鼻腔、頸部等部位，一旦發(fā)現(xiàn)樣本可能攜帶惡性傳染病則禁止解剖。

2.4 細(xì)菌性傳染病和病毒性傳染病的檢驗(yàn)

常見的細(xì)菌性傳染病的檢測方法包括顯微鏡檢驗(yàn)法、細(xì)菌培養(yǎng)檢測法、動(dòng)物試驗(yàn)和生化試驗(yàn)等方法。對于樣品要進(jìn)行病毒性傳染病的檢驗(yàn)，這種檢驗(yàn)工作主要包括個(gè)體檢查、病毒培養(yǎng)性狀觀察、病毒形態(tài)學(xué)觀察和病毒核酸檢測等步驟。具體適用于狂犬病、雞痘病毒等病原體的檢測，同時(shí)也應(yīng)用了電鏡檢測、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)等檢測技術(shù)。

2.5 寄生蟲的病原檢查

寄生蟲的病原檢驗(yàn)主要包括蟲卵檢測法，比如用蟲卵直接涂片鏡檢，蟲體檢測法兩種。蟲體檢測法常見的檢驗(yàn)又可以根據(jù)昆蟲種類分為蠕蟲、蜘蛛類、原蟲類檢測法。

2.6 PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

此法常用于個(gè)體微小、殘缺的病毒檢驗(yàn)。其工作原理是根據(jù)雙鏈DNA在酶和適當(dāng)?shù)臏囟认驴梢越怄湷蔀閱捂湥瑔捂淒NA在聚合酶和其他輔助蛋白的作用下，遵循堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制為兩份相同的拷貝子。這個(gè)過程被不斷循環(huán)，可以使得目的基因大量擴(kuò)增。將擴(kuò)增產(chǎn)物和參照物進(jìn)行對比就可以得知目的基因片段的一些信息。該技術(shù)用時(shí)短，彌補(bǔ)了常規(guī)檢測技術(shù)周期長的缺陷。此外該技術(shù)不需要活體病毒，有效避免了工作人員和病毒的接觸，減少感染幾率，同時(shí)降低了對環(huán)境的污染。

2.7 免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)

此法的特點(diǎn)是操作簡便、耗時(shí)較短，并且結(jié)果可靠性高。多種傳染性疾病的抗體、陽性血清都廣泛地被開發(fā)為診斷試劑等商品，所以大大簡化了檢測過程，檢測時(shí)首先要獲取樣本組織、血清等作為實(shí)驗(yàn)材料，選取適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作就可以完成檢測工作。對于血清檢測技術(shù)而言，常見的反應(yīng)包括凝聚反應(yīng)（直接、間接凝聚反應(yīng)等）、沉淀反應(yīng)（瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)等）、標(biāo)記抗體技術(shù)（ELISA等）。

2.8 變態(tài)反應(yīng)檢測技術(shù)

變態(tài)反應(yīng)（allergy）是指接觸過抗原的機(jī)體再次接觸同一抗原時(shí)，會產(chǎn)生免疫損傷反應(yīng)，有可能引起疾病，屬于特異性免疫應(yīng)答反應(yīng)。日常生活中的皮膚過敏、紅腫等就屬于這種反應(yīng)。變態(tài)反應(yīng)的特異性和敏感度較高，常被用于結(jié)核病、副結(jié)核、鼻疽疾病的檢驗(yàn)。

[1]王柏學(xué).動(dòng)物檢疫樣品的采集和檢疫方法初探.吉林畜牧獸醫(yī)，2009.

[2]何國榮.動(dòng)物檢疫材料的采集和檢疫方法.畜牧與飼料科學(xué)，2012.

[3]尚淑芬.動(dòng)物檢疫工作存在的問題及其對策.山西農(nóng)業(yè)（畜牧獸醫(yī)）2013.