• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    TDZ和暗培養(yǎng)對蝴蝶蘭葉片不定芽發(fā)生的影響

    2015-08-11 04:37陸順教等
    熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年7期
    關(guān)鍵詞:蝴蝶蘭葉片

    陸順教等

    摘 要 以蝴蝶蘭幼嫩花梗誘導(dǎo)的無菌苗葉片為外植體,以MS為基本培養(yǎng)基,研究不同暗培養(yǎng)時間和TDZ濃度對蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽的影響。結(jié)果表明:暗培養(yǎng)和TDZ對接種的蝴蝶蘭葉片的成活率均具有顯著影響,暗培養(yǎng)60 d時,葉片的存活率在90%以上,而在同一暗培養(yǎng)時間條件下,葉片的存活率隨著TDZ濃度的增加而上升;在TDZ濃度為3.0 mg/L,暗培養(yǎng)60 d時,蝴蝶蘭存活葉片不定芽的誘導(dǎo)率最高,達(dá)到93.45%;誘導(dǎo)的不定芽數(shù)最多,平均每個外植體誘導(dǎo)的不定芽數(shù)為13.22個。綜合考慮外植體的成活率、不定芽誘導(dǎo)率和誘導(dǎo)的不定芽數(shù),蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽的最佳條件為:MS+TDZ 3.0 mg/L,暗培養(yǎng)60 d。

    關(guān)鍵詞 蝴蝶蘭 ;葉片 ;不定芽 ;TDZ ;暗培養(yǎng)

    分類號 S682.31

    Abstract Used leaves of in vitro plantlets which induced from young pedicels of Phalaenopsis as explants and the MS as basal medium, the effect of dark culture phase and TDZ on adventitious shoot induction from leaves of Phalaenopsis were investigated. The result showed that: dark culture and TDZ had a significant impact on survival rate of inoculated leaves, and the survival rate was more than 90% when the dark culture phase was 60 d, the survival rate increased with the increase of TDZ concentrations under same dark culture phase; The highest inductivity of 93.45% and maximum average number of adventitious shoots were obtained on the MS medium supplemented with 3.0 mg/L TDZ and under 60 d dark culture. Considering of survival rate, regeneration rate and adventitious shoot number, the optimum culture condition for adventitious shoots induction from leaf explants of Phalaenopsis was MS appended with 3.0 mg/L TDZ and 60 d dark culture treatment.

    Keywords Phalaenopsis ; leaf ; adventitious bud ; TDZ ; dark culture

    蝴蝶蘭為蘭科蝴蝶蘭屬植物,是蘭科中最具觀賞價值的花卉之一,因其花型奇特、色彩豐富、花期持久,在熱帶蘭中具有“蘭花皇后”的美稱,在國內(nèi)外花卉市場極受歡迎[1]。蝴蝶蘭在商業(yè)生產(chǎn)中需要大量的種苗,但蝴蝶蘭是單莖性氣生蘭,植株極少發(fā)育側(cè)芽,較難進(jìn)行分株繁殖。因此,組織培養(yǎng)是蝴蝶蘭種苗高效繁育的重要手段[2]。蝴蝶蘭通過組織培養(yǎng)獲得大量種苗的方式主要有2種:一是通過無菌播種獲得;二是通過外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生原球莖或叢生芽,再通過原球莖或叢生芽增殖培養(yǎng)從而獲得大量幼苗。商業(yè)生產(chǎn)中的蝴蝶蘭大多是雜交品系,因此前者雖然簡單易行,可短期內(nèi)獲得大量幼苗,但其后代變異率高,難以獲得品質(zhì)整齊的大規(guī)模種苗;后者變異率低,原球莖或叢生芽增殖系數(shù)高,幼苗品質(zhì)較一致,適合商業(yè)生產(chǎn)種苗的大規(guī)模繁育。近年來,蝴蝶蘭在莖尖[3-4]、花梗腋芽[4-5]、花梗節(jié)間段[6-7]、根尖[8-9]及根段[10]的組織培養(yǎng)上已經(jīng)取得了很大進(jìn)展。但以莖尖為外植體,不僅外植體材料少,還會因切取莖尖而損傷母株;以花梗作為外植體在取材時間上受到限制;以根尖和根段作為外植體誘導(dǎo)原球莖困難,誘導(dǎo)率低。葉片雖是蝴蝶蘭組培快繁最好的外植體材料,但葉片誘導(dǎo)原球莖較為困難。目前,蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽的組培快繁雖有少量研究[11-12],但缺少針對某一特定條件深入系統(tǒng)的研究。本研究以蝴蝶蘭葉片為外植體,對影響蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽的關(guān)鍵因素TDZ(Thidazuron,噻二唑苯基脲)濃度和暗培養(yǎng)時間進(jìn)行研究,為蝴蝶蘭的高效組培快繁和種質(zhì)創(chuàng)新奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    外植體取自中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所熱帶蘭花種質(zhì)資源圃保存的黃花紅唇金邊蝴蝶蘭品種,取其幼嫩花梗進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得該品種的無菌苗,誘導(dǎo)方法參照卜朝陽等[5]的方法。待無菌幼苗長到3片全展葉時,取其葉片作為試驗材料。

    1.2 方法

    1.2.1 實(shí)驗設(shè)計

    采用單因素設(shè)計,分別進(jìn)行以下試驗:(1)不同濃度TDZ對葉片不定芽再生的影響:以MS為基本培養(yǎng)基,分別添加0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mg/L的TDZ,以不添加TDZ為對照;(2)不同暗培養(yǎng)時間對葉片不定芽再生的影響:葉片分別接種到各個TDZ濃度處理的培養(yǎng)基中,分別在暗培養(yǎng)箱中培養(yǎng)0(對照)、10、20、30、40、50、60 d,然后移至光照培養(yǎng)。

    所有培養(yǎng)基均添加30 g/L的蔗糖、6.5 g/L卡拉膠,pH值調(diào)至6.0,分裝至培養(yǎng)瓶中,每瓶分裝30 mL,120 ℃高溫高壓滅菌后備用。取生長較一致的無菌苗,剪取頂部葉片,在正面輕輕的橫劃幾刀,正面朝上置于培養(yǎng)基上,蓋好瓶蓋,置于(25±1)℃的暗培養(yǎng)室培養(yǎng),然后根據(jù)暗培養(yǎng)試驗設(shè)計的暗培養(yǎng)時間分別轉(zhuǎn)至光照培養(yǎng)。每個處理做3個重復(fù),每個重復(fù)接種10瓶,每瓶接種4個外植體。

    1.2.2 項目測定

    接種70 d后統(tǒng)計外植體的存活率、存活外植體不定芽誘導(dǎo)率、平均不定芽誘導(dǎo)數(shù)。

    外植體存活率=存活外植體數(shù)/接種外植體數(shù)×100%

    存活外植體不定芽誘導(dǎo)率=誘導(dǎo)不定芽外植體數(shù)/存活外植體數(shù)×100%

    平均不定芽誘導(dǎo)數(shù)=誘導(dǎo)的不定芽總數(shù)/誘導(dǎo)不定芽外植體數(shù)

    1.2.3 數(shù)據(jù)分析

    試驗所得數(shù)據(jù)采用SAS9.0軟件進(jìn)行處理與分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 TDZ和暗培養(yǎng)對蝴蝶蘭葉片成活率的影響

    由表1可知,暗培養(yǎng)對蝴蝶蘭葉片在組織培養(yǎng)中的成活率具有顯著影響,在相同TDZ濃度條件下,隨著暗培養(yǎng)時間的延長,葉片的成活率呈逐漸上升的趨勢。暗培養(yǎng)60 d時,葉片的成活率最高;而未進(jìn)行暗培養(yǎng)的葉片成活率不到30%,最高僅為26.85%。除了暗培養(yǎng),TDZ對提高組培過程中蝴蝶蘭葉片的成活率也具有顯著的作用,在相同暗培養(yǎng)時間下,葉片的成活率隨著TDZ濃度的增加而相應(yīng)提高;在暗培養(yǎng)60 d,TDZ濃度為2.50 mg/L時,葉片的成活率達(dá)到最高98.92%。但當(dāng)暗培養(yǎng)時間在50 d或以上時,葉片的成活率隨TDZ濃度的增加雖略有提高,但不同濃度之間無顯著性差異。因此,有利于蝴蝶蘭葉片組培中外植體成活率的最佳條件為:MS+TDZ 2.50 mg/L+暗培養(yǎng)60 d。

    2.2 TDZ和暗培養(yǎng)對蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽的影響

    由表2可知,TDZ對蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽的影響顯著,在相同暗培養(yǎng)時間條件下,蝴蝶蘭葉片不定芽誘導(dǎo)率隨著TDZ濃度的增加呈逐漸上升的趨勢,在TDZ濃度為3.0 mg/L時達(dá)到最大值,之后隨著TDZ濃度的增加而逐漸下降;其中在暗培養(yǎng)60 d,TDZ濃度為3.0 mg/L時,誘導(dǎo)率達(dá)到最大值,為93.45%。而暗培養(yǎng)同樣對蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽具有促進(jìn)作用,在相同的TDZ濃度條件下,隨著暗培養(yǎng)時間的延長。蝴蝶蘭葉片不定芽的誘導(dǎo)率逐漸上升,在暗培養(yǎng)60 d時誘導(dǎo)率達(dá)到最高。綜合TDZ濃度與暗培養(yǎng)時間對蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽的作用,在MS+TDZ 3.0 mg/L+暗培養(yǎng)60 d時,蝴蝶蘭葉片可獲得最高的不定芽誘導(dǎo)率。

    2.3 TDZ和暗培養(yǎng)對蝴蝶蘭葉片不定芽分化的影響

    由表3可知,TDZ和暗培養(yǎng)均可促進(jìn)蝴蝶蘭葉片不定芽的分化,蝴蝶蘭葉片分化的不定芽數(shù)量隨著TDZ濃度的增加和暗培養(yǎng)時間的延長而增多,其中在TDZ為3.0 mg/L,暗培養(yǎng)60 d時,分化的不定芽數(shù)量達(dá)到最高,每片葉平均分化的不定芽數(shù)量達(dá)到13.22個。之后則隨著TDZ濃度的增加不定芽數(shù)的數(shù)量逐漸減少。因此,蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽過程中,在MS+TDZ 3.0 mg/L+暗培養(yǎng)60 d條件下,單個外植體可獲得最多的不定芽。

    3 討論與結(jié)論

    近年來,關(guān)于蝴蝶蘭的組培快繁研究已經(jīng)做了大量的研究,但大多數(shù)集中在原球莖發(fā)生途徑,然而原球莖發(fā)生途徑的組培再生過程周期長,且發(fā)生細(xì)胞變異的可能性比較高[13]。而由葉片直接誘導(dǎo)不定芽的再生方式是通過直接器官發(fā)生途徑實(shí)現(xiàn)的。一般認(rèn)為,直接再生具有以下優(yōu)勢:一是分化時間短,在一定程度上縮短種苗繁育周期;二是通過直接出芽的方式可減少變異率,保持親本的優(yōu)良特性;三是外植體材料不受限制,可常年進(jìn)行。但葉片分化不定芽發(fā)育成植株是一個非常復(fù)雜的脫分化、再分化的過程,在整個過程中受到多個因素的影響,本研究針對影響因素中的暗培養(yǎng)時間和外源激素TDZ的濃度進(jìn)行了研究。

    已有研究結(jié)果表明,暗培養(yǎng)可降低組培外植體材料的褐化,進(jìn)而提高成活率,這已在春蘭[14]、蝴蝶蘭[15]、春石斛[16]、寒蘭[17]等蘭花組織培養(yǎng)中得到證實(shí),本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),暗培養(yǎng)可提高蝴蝶蘭葉片外植體的成活率,與上述研究結(jié)果一致。暗培養(yǎng)對梨葉片不定芽再生具有顯著的影響[18-19]。邢文等[20]在研究玫瑰葉片的直接再生中發(fā)現(xiàn)暗培養(yǎng)對不定芽的分化具有一定的促進(jìn)作用。另外,在黑莓和黃瓜的葉片再生研究中,暗培養(yǎng)均對不定芽的再生具有明顯的促進(jìn)作用[21-22]。本研究結(jié)果表明,暗培養(yǎng)可提高蝴蝶蘭葉片不定芽誘導(dǎo)率及分化的不定芽數(shù),這與上述研究結(jié)果相似。在蝴蝶蘭研究方面,程強(qiáng)強(qiáng)等[11]研究認(rèn)為,短時間的暗處理有利于蝴蝶蘭葉片不定芽的誘導(dǎo),但其研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn),15 d的暗處理時間誘導(dǎo)率達(dá)到最高,且隨著暗處理時間的延長,誘導(dǎo)率逐漸下降。而楊海蕓等[8]的研究結(jié)果表明適當(dāng)時間的暗培養(yǎng)有利于不定芽的發(fā)生,其中以暗培養(yǎng)21 d誘導(dǎo)效果最佳。以上2個蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽的暗培養(yǎng)時間與本研究存在差異,這可能是由于所選材料的基因型不同造成的,而程強(qiáng)強(qiáng)等[11]的研究結(jié)果表明相同條件下不同基因型的蝴蝶蘭葉片不定芽誘導(dǎo)率存在顯著差異。綜上所訴,不同基因型的蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽需要的暗培養(yǎng)時間存在差異。

    TDZ是人工合成的不同于腺嘌呤類細(xì)胞分裂素的苯基脲衍生物的一種,作為一種有效的植物生長調(diào)節(jié)劑廣泛應(yīng)用于植物組織培養(yǎng)中直接誘導(dǎo)葉片不定芽的形成研究中[23]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),TDZ濃度為3.0 mg/L時,對蝴蝶蘭葉片不定芽的誘導(dǎo)效果最好。而程強(qiáng)強(qiáng)等[11]在蝴蝶蘭葉片誘導(dǎo)不定芽的研究中,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在TDZ 3.0 mg/L條件下,‘紅天使的不定芽誘導(dǎo)率和誘導(dǎo)的平均不定芽數(shù)均達(dá)到最高,與本研究結(jié)果一致。楊海蕓等[8]研究認(rèn)為TDZ 1.5 mg/L為蝴蝶蘭葉片不定芽的最佳誘導(dǎo)濃度。Latip等[24]的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)TDZ濃度在0.1~0.3 mg/L時,葉片不定芽誘導(dǎo)率最高,而且這兩者的研究結(jié)果在誘導(dǎo)率和不定芽的分化數(shù)量上均低于本研究,其可能的原因是外植體材料基因型不同造成的,另外,這2個研究所設(shè)置的TDZ濃度最高值均較?。ㄇ罢咦罡邽?.0 mg/L,后者為1.0 mg/L),未能全面體現(xiàn)TDZ的濃度梯度。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 盧思聰. 中國蘭與洋蘭[M]. 北京:金盾出版社,1994.

    [2] 胡松華. 熱帶蘭花[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2003.

    [3] Tokuhara K, Mii M. Induction of embryogenic callus and cell suspension culture from shoot tips excised from flower stalk buds of Phalaenopsis(Orchidaceae)[J]. In Vitro Cell Dev Biol Plant, 2001, 37(3): 457-461.

    [4] 張元國,刁家連,劉玉娥,等. 蝴蝶蘭花梗腋芽組培再生技術(shù)體系的研究[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,6(1):3-5.

    [5] 卜朝陽,蔣慧萍,滿若君. 蝴蝶蘭花梗離體培養(yǎng)及葉片誘導(dǎo)類原球莖研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,3(1):147-150.

    [6] 魯雪華,郭文杰,徐立暉,等. 蝴蝶蘭花梗節(jié)間段培養(yǎng)繁殖的初步研究[J]. 園藝學(xué)報,2002,29 (5) :491-492.

    [7] 蘇家樂,陳尚平,湯久順,等. 蝴蝶蘭花梗節(jié)間切段的類原球莖誘導(dǎo)與增殖[J]. 植物生理學(xué)通訊,2007,43(5):876-878.

    [8] 楊海蕓,黃珊珊,鮑忠贊,等. 蝴蝶蘭根尖組織培養(yǎng)[J]. 林業(yè)科技開發(fā),2009,23(3):120-123.

    [9] Park S Y, Murthy H N, Paek K Y. Protocorm-like body induction and subsequent plant regeneration from root tip cultures of Doritaenopsis[J]. Plant Science, 2003, 164(5): 919-923.

    [10] 李進(jìn)進(jìn),廖俊杰,柯麗婉,等. 蝴蝶蘭根段的組織培養(yǎng)[J]. 植物生理學(xué)通訊,2000,36(1):37.

    [11] 程強(qiáng)強(qiáng),莊東紅,許大熊,等. TDZ高效誘導(dǎo)蝴蝶蘭葉片不定芽及植株再生[J]. 植物科學(xué)學(xué)報,2011,29(4):524-530.

    [12] 楊海蕓,吳 震,王廣東,等. 不同培養(yǎng)條件對蝴蝶蘭離體葉片不定芽發(fā)生的影響[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2007,30(1):44-49.

    [13] Chen W H, Chen T M, Fu Y M, et al. Studies on somaclonal variation in Phalaenopsis[J]. Plant Cell Reports, 1998, 18(1): 7-13.

    [14] 王寶寧,張 顯,宋軍陽. 秦嶺野生春蘭組織培養(yǎng)過程中的褐化控制研究[J]. 北方園藝,2011,35(5):169-172.

    [15] 崔廣榮,張子學(xué),胡能兵,等. 蝴蝶蘭原球莖液體增殖培養(yǎng)的研究[J]. 激光生物學(xué)報,2009,18(2):189-194.

    [16] 張新平. 春石斛蘭組培增殖及蘭花試管開花研究[D]. 楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2008.

    [17] 雷文瑾. 寒蘭組織培養(yǎng)中酚污染控制研究初探[J]. 南方園藝,2009,20(3):17-18.

    [18] 蘇艷麗,田 鵬,魏聞東. 紅星梨葉片不定梢誘導(dǎo)及增殖培養(yǎng)[J]. 經(jīng)濟(jì)林研究,2015,33(1):103-106.

    [19] 陶愛群,尹 婷,謝深喜. 黃金梨葉片再生體系建立研究[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,5(1):108-111.

    (下轉(zhuǎn)第35頁)

    猜你喜歡
    蝴蝶蘭葉片
    我在蘇州種蝴蝶蘭
    蝴蝶蘭
    我的植物朋友
    葉片雨水痕跡大不同
    蝴蝶蘭比美
    我家的蝴蝶蘭
    設(shè)計一個用參數(shù)控制的風(fēng)扇模型
    葉片緣何各不同?
    美麗的蝴蝶蘭
    亚洲精品粉嫩美女一区| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | av电影中文网址| 国产精品98久久久久久宅男小说| 日韩精品免费视频一区二区三区| 最近最新免费中文字幕在线| 中文字幕最新亚洲高清| 熟女电影av网| 午夜福利欧美成人| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 久久久久九九精品影院| 精品一区二区三区av网在线观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲中文字幕日韩| 波多野结衣高清作品| 桃红色精品国产亚洲av| 一本精品99久久精品77| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 99热只有精品国产| 久久香蕉激情| 人人澡人人妻人| 久久香蕉精品热| 国产av一区二区精品久久| 制服丝袜大香蕉在线| 老司机午夜十八禁免费视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产午夜精品久久久久久| 后天国语完整版免费观看| 欧美大码av| 麻豆成人av在线观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲成人精品中文字幕电影| 1024香蕉在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲男人天堂网一区| 深夜精品福利| 久久精品影院6| 午夜福利免费观看在线| 天堂√8在线中文| 精品久久久久久久毛片微露脸| 亚洲人成77777在线视频| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 男人操女人黄网站| 欧美色欧美亚洲另类二区| 色av中文字幕| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 久久精品国产亚洲av高清一级| 免费在线观看成人毛片| 亚洲一区中文字幕在线| 国产av一区二区精品久久| 最近最新免费中文字幕在线| 怎么达到女性高潮| 久久精品人妻少妇| 日本a在线网址| 老司机午夜福利在线观看视频| 一本大道久久a久久精品| 波多野结衣av一区二区av| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲avbb在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久亚洲真实| 高潮久久久久久久久久久不卡| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 午夜福利免费观看在线| 成人亚洲精品av一区二区| 成年版毛片免费区| 色综合亚洲欧美另类图片| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 欧美中文日本在线观看视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产精品久久久人人做人人爽| 日韩大码丰满熟妇| 中文字幕av电影在线播放| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 欧美激情极品国产一区二区三区| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲一区二区三区不卡视频| 黄色女人牲交| 在线观看免费午夜福利视频| 搡老熟女国产l中国老女人| 最好的美女福利视频网| 性色av乱码一区二区三区2| 99久久综合精品五月天人人| 日本成人三级电影网站| 国产av不卡久久| 后天国语完整版免费观看| 国产精品野战在线观看| 国产一区在线观看成人免费| 黄片大片在线免费观看| 精品国产国语对白av| 国产亚洲精品第一综合不卡| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 国产人伦9x9x在线观看| 美女免费视频网站| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 校园春色视频在线观看| 999久久久精品免费观看国产| 免费高清视频大片| 亚洲免费av在线视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 一区福利在线观看| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 中文字幕高清在线视频| www日本黄色视频网| 夜夜爽天天搞| 成人欧美大片| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲五月天丁香| 伦理电影免费视频| 嫩草影视91久久| 黄色视频,在线免费观看| 免费看日本二区| 国产黄片美女视频| 波多野结衣高清作品| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 色老头精品视频在线观看| av在线播放免费不卡| 午夜福利在线观看吧| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 91字幕亚洲| 国产黄色小视频在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲成人久久性| 亚洲av电影在线进入| 十分钟在线观看高清视频www| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 三级毛片av免费| 欧美性长视频在线观看| 十八禁网站免费在线| 国产成人av教育| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 俺也久久电影网| 免费一级毛片在线播放高清视频| 草草在线视频免费看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 草草在线视频免费看| 好男人在线观看高清免费视频 | 日本 欧美在线| 久久久久久久久免费视频了| 无遮挡黄片免费观看| 视频在线观看一区二区三区| 中文字幕高清在线视频| 婷婷六月久久综合丁香| 久久这里只有精品19| 欧美国产精品va在线观看不卡| 午夜免费观看网址| 一进一出抽搐动态| 国产精品99久久99久久久不卡| 天堂√8在线中文| 首页视频小说图片口味搜索| 国产精品亚洲一级av第二区| 免费高清在线观看日韩| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 91字幕亚洲| 国产成人精品无人区| 久久热在线av| 国产一区在线观看成人免费| 女警被强在线播放| 一边摸一边做爽爽视频免费| 搡老妇女老女人老熟妇| 一级毛片精品| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 又黄又爽又免费观看的视频| 久久久国产精品麻豆| 婷婷丁香在线五月| 久久欧美精品欧美久久欧美| 中国美女看黄片| 免费一级毛片在线播放高清视频| 精品国产美女av久久久久小说| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 女性被躁到高潮视频| 88av欧美| 欧美中文综合在线视频| 日本五十路高清| 麻豆av在线久日| 成人精品一区二区免费| 亚洲精品色激情综合| xxxwww97欧美| 亚洲精品中文字幕在线视频| 色播亚洲综合网| 脱女人内裤的视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 中文字幕人妻熟女乱码| 又紧又爽又黄一区二区| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 午夜免费成人在线视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 男男h啪啪无遮挡| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产国语露脸激情在线看| 99国产精品一区二区三区| 亚洲av美国av| 国产激情久久老熟女| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 99热只有精品国产| 日本三级黄在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 桃红色精品国产亚洲av| 又黄又粗又硬又大视频| 欧美性猛交黑人性爽| √禁漫天堂资源中文www| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲黑人精品在线| 香蕉久久夜色| 黄色视频不卡| av免费在线观看网站| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 成人国产一区最新在线观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲精品色激情综合| 中出人妻视频一区二区| 精品人妻1区二区| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲av第一区精品v没综合| 精品国内亚洲2022精品成人| 美女午夜性视频免费| 日韩有码中文字幕| 日本黄色视频三级网站网址| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 亚洲在线自拍视频| 制服丝袜大香蕉在线| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 91在线观看av| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 深夜精品福利| 国产精品 国内视频| 国产亚洲av嫩草精品影院| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产伦在线观看视频一区| 男人舔奶头视频| 久久久久久久午夜电影| 给我免费播放毛片高清在线观看| 黄色丝袜av网址大全| 色婷婷久久久亚洲欧美| 久久久国产欧美日韩av| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产日本99.免费观看| 99国产精品99久久久久| 好男人电影高清在线观看| 国产三级黄色录像| 国产极品粉嫩免费观看在线| 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲黑人精品在线| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲精品色激情综合| 亚洲男人的天堂狠狠| 男人舔女人的私密视频| 日韩视频一区二区在线观看| 国产激情久久老熟女| 国产av在哪里看| 精品欧美国产一区二区三| 欧美不卡视频在线免费观看 | 中文字幕人妻熟女乱码| 国产成人欧美| 青草久久国产| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产精品野战在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 日本在线视频免费播放| av在线播放免费不卡| xxxwww97欧美| 日本五十路高清| 欧美日韩一级在线毛片| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲精华国产精华精| 一本综合久久免费| 听说在线观看完整版免费高清| 制服人妻中文乱码| 黄色女人牲交| 成人18禁在线播放| 欧美黑人精品巨大| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久久国产成人精品二区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| a级毛片在线看网站| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲九九香蕉| 在线观看舔阴道视频| 免费在线观看完整版高清| 校园春色视频在线观看| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产成人av教育| 国产成人欧美| 国产熟女午夜一区二区三区| 身体一侧抽搐| 后天国语完整版免费观看| 国产视频一区二区在线看| 大型av网站在线播放| 无限看片的www在线观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 久久久久久久久中文| 黄色视频不卡| 麻豆一二三区av精品| www.999成人在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 啦啦啦免费观看视频1| aaaaa片日本免费| 久久久久久九九精品二区国产 | 日日夜夜操网爽| 日韩欧美三级三区| 精品第一国产精品| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产成人av激情在线播放| 国产91精品成人一区二区三区| 国产久久久一区二区三区| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 精品久久久久久成人av| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 淫妇啪啪啪对白视频| 香蕉av资源在线| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 一二三四社区在线视频社区8| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 人人澡人人妻人| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 午夜福利免费观看在线| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲电影在线观看av| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 曰老女人黄片| 在线永久观看黄色视频| 午夜福利视频1000在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲精品国产区一区二| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲第一电影网av| 色哟哟哟哟哟哟| 一个人免费在线观看的高清视频| 亚洲人成电影免费在线| 国产亚洲精品一区二区www| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲av成人一区二区三| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久中文字幕人妻熟女| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲最大成人中文| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 18禁国产床啪视频网站| 最近最新中文字幕大全电影3 | 国产激情久久老熟女| 在线观看一区二区三区| 色尼玛亚洲综合影院| 草草在线视频免费看| 色尼玛亚洲综合影院| 国产精品久久久人人做人人爽| 高清在线国产一区| 亚洲精品色激情综合| 欧美一级a爱片免费观看看 | 国产麻豆成人av免费视频| 好男人电影高清在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 此物有八面人人有两片| 亚洲免费av在线视频| 日韩成人在线观看一区二区三区| 老司机福利观看| av欧美777| 日韩欧美在线二视频| 国产主播在线观看一区二区| 中文在线观看免费www的网站 | 好男人在线观看高清免费视频 | 国产v大片淫在线免费观看| 啦啦啦免费观看视频1| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产不卡一卡二| 国产久久久一区二区三区| 他把我摸到了高潮在线观看| 精品国产乱子伦一区二区三区| 波多野结衣高清作品| 国产激情欧美一区二区| av在线天堂中文字幕| 国产免费男女视频| 欧美黑人巨大hd| 一边摸一边做爽爽视频免费| 最近在线观看免费完整版| 日韩免费av在线播放| 免费在线观看亚洲国产| 国产真人三级小视频在线观看| 国产激情久久老熟女| 亚洲三区欧美一区| 日韩有码中文字幕| 91成人精品电影| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产高清激情床上av| 天堂影院成人在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 十八禁人妻一区二区| 老汉色∧v一级毛片| 在线观看免费午夜福利视频| 久久久国产欧美日韩av| 色尼玛亚洲综合影院| 久久久久久久久久黄片| 99国产精品99久久久久| 精品免费久久久久久久清纯| 麻豆成人av在线观看| 国产色视频综合| 日本免费一区二区三区高清不卡| 性欧美人与动物交配| 一区福利在线观看| 国产成人av激情在线播放| 国产三级黄色录像| 99国产精品一区二区三区| 日本 欧美在线| 国产午夜福利久久久久久| 在线观看免费午夜福利视频| 日韩成人在线观看一区二区三区| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 欧美一级a爱片免费观看看 | 很黄的视频免费| 亚洲成人精品中文字幕电影| 日本在线视频免费播放| 国产av不卡久久| 久久精品国产综合久久久| 性色av乱码一区二区三区2| 婷婷精品国产亚洲av| 给我免费播放毛片高清在线观看| 日韩欧美国产一区二区入口| 特大巨黑吊av在线直播 | 国产精品野战在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 精品不卡国产一区二区三区| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产精品影院久久| 午夜福利成人在线免费观看| 精品乱码久久久久久99久播| 麻豆一二三区av精品| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国语自产精品视频在线第100页| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 在线av久久热| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久 成人 亚洲| 免费观看人在逋| 在线观看66精品国产| 久9热在线精品视频| 最好的美女福利视频网| 在线播放国产精品三级| 国产亚洲欧美在线一区二区| 不卡av一区二区三区| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产真实乱freesex| 午夜免费成人在线视频| 欧美国产日韩亚洲一区| 啦啦啦 在线观看视频| 国产亚洲精品一区二区www| 国产精品 国内视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产成人av激情在线播放| 黑丝袜美女国产一区| 国产精品国产高清国产av| 禁无遮挡网站| 国产亚洲精品第一综合不卡| 中文字幕最新亚洲高清| 露出奶头的视频| 曰老女人黄片| av福利片在线| 国产又色又爽无遮挡免费看| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 少妇 在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 国产成人系列免费观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲三区欧美一区| 桃色一区二区三区在线观看| 久久精品国产清高在天天线| 在线国产一区二区在线| 久久精品91无色码中文字幕| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 成人免费观看视频高清| 午夜激情av网站| av福利片在线| 男女下面进入的视频免费午夜 | 日本 av在线| 中文字幕久久专区| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 中文亚洲av片在线观看爽| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 两个人免费观看高清视频| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 免费在线观看完整版高清| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 久久精品人妻少妇| 欧美一级毛片孕妇| 一二三四社区在线视频社区8| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久| a级毛片a级免费在线| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 免费在线观看成人毛片| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美日本视频| a在线观看视频网站| 国产亚洲精品第一综合不卡| 两个人看的免费小视频| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 在线av久久热| 十八禁网站免费在线| 日本熟妇午夜| 国产真实乱freesex| avwww免费| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲全国av大片| 欧美国产日韩亚洲一区| 天天添夜夜摸| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 欧美黑人欧美精品刺激| 女性被躁到高潮视频| 久99久视频精品免费| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 色播在线永久视频| 男人的好看免费观看在线视频 | 国产高清有码在线观看视频 | 中文字幕人成人乱码亚洲影| 黄色毛片三级朝国网站| 日本 欧美在线| 日本五十路高清| 男女那种视频在线观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产爱豆传媒在线观看 | 午夜两性在线视频| www国产在线视频色| 亚洲精品美女久久av网站| 手机成人av网站| 久久这里只有精品19| 1024香蕉在线观看| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 黄片小视频在线播放| 无限看片的www在线观看| 久9热在线精品视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产激情偷乱视频一区二区| 人成视频在线观看免费观看| 91字幕亚洲| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 欧美激情高清一区二区三区| 身体一侧抽搐| 日本在线视频免费播放| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 不卡一级毛片| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产精品一区二区三区四区久久 | 免费观看人在逋| 午夜视频精品福利| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产精品九九99| 欧美精品亚洲一区二区| 欧美丝袜亚洲另类 | 波多野结衣av一区二区av| 精品国产乱子伦一区二区三区| 久久亚洲真实| 午夜福利18| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 美女 人体艺术 gogo| 国产私拍福利视频在线观看| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 一进一出抽搐动态| 久久久久久久久久黄片| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 变态另类丝袜制服| 国产精品亚洲一级av第二区| 色综合欧美亚洲国产小说| videosex国产| 国产午夜福利久久久久久| 国产精品 欧美亚洲| 制服丝袜大香蕉在线|