抗核抗體滴度水平與肝功能損害的相關性探討

金妍　張?zhí)K偉

[摘要] 目的 探討不同滴度的抗核抗體（ANA）與抗核抗體譜的相關性及其與肝功能異常檢出率的臨床意義。 方法 將78例ANA陽性患者根據(jù)結果滴度分為A組1∶100、B組1∶320和C組1∶1000。ANA定性檢測采用免疫熒光法；抗核抗體譜檢測采用免疫印跡法；ALT、AST、GGT采用速率法檢測；TP采用雙縮脲法檢測。 結果 各滴度ANA陽性患者中ENA陽性檢出率分別為A組63.33%、B組74.07%、C組80.95%。肝功能異常檢出率分別為20.00%、29.60%、47.60%。 結論 ANA陽性患者肝功能損害檢出率高，隨著ANA滴度的升高肝功能損害檢出率也升高；ANA陽性與肝功能損傷有相關性。

[關鍵詞] 抗核抗體；抗核抗體譜；肝功能檢查；自身免疫性疾病

[中圖分類號] R392.11 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2015）21-0094-03

[Abstract] Objective To investigate correlation of the ANA and antinuclear antibody spectrum， and clinical significance of the abnormal liver function rate. Methods A total of 78 cases of ANA positive were divided into group A（1∶100）， group B（1∶320） and group C（1∶1000）. ANA qualitative detection by immunofluorescence method； Antinuclear antibody spectrum detection using western blot method； ALT， AST， GGT were detected by the rate method； Biuret method was used to test TP. Results ENA positive detection rate were group A（63.33%）， group B（74.07%）， group C（80.95%）. The abnormal liver function rate was 20.00%， 29.60%， 47.60%. Conclusion Liver function abnormalities in patients with ANA positive rate is increased， abnormal liver function rate is also increased， so ANA is associated with the abnormal liver function.

[Key words] Anti nuclear antibodies； Antinuclear antibody； Liver function tests； Autoimmune diseases

自身免疫疾病（AID）是由多種自身抗體作用導致的機體多器官損傷性疾病，臨床表現(xiàn)多樣化，常見疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、干燥綜合征（SS）、混合性結締組織病（MCTD）、類風濕性關節(jié)炎（RA）、自身免疫性肝炎（AIH）、原發(fā)性肝硬化（PBC）、系統(tǒng)性硬皮?。≒SS）、特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）等[1]。AID幾乎可累及人體的各系統(tǒng)、組織和器官，造成組織和器官的損傷，是主要的致殘性疾病之一。免疫性疾病中有許多自身抗體，抗核抗體ANA就是自身抗體的一種[2]。很多AID是以臨床癥狀出現(xiàn)前數(shù)月或數(shù)年即呈現(xiàn)自身抗體為特征的慢性疾病，自身抗體也可以預示疾病特異性、嚴重程度和進展，通過研究抗核抗體和抗核抗體譜的關系，對其聯(lián)合檢查進行疾病的輔助診斷、判斷疾病活動程度、觀察治療效果、指導臨床用藥等方面有重要意義[3]。在自身免疫疾病中，伴隨著ANA陽性，?？沙霈F(xiàn)肝功能損害，抗核抗體與肝功能損害的聯(lián)系的探討對于臨床的及時保肝治療具有重大意義。但關于ANA與抗核抗體譜及肝功能異常的關系還少見報道。本文回顧性分析78例ANA陽性并進行抗核抗體譜和肝功能檢查的患者數(shù)據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源

收集2014年9～12月汕頭中心醫(yī)院檢測ANA陽性的患者88例，對其進行篩選，排除10例沒有在同一次抽血進行抗核抗體譜和肝功能檢查的患者，對剩余的78例進行分組；根據(jù)結果滴度分為A組1∶100（n=30）、B組1∶320（n=27）和C組1∶1000（n=21），各例均有在同一次抽血檢查進行抗核抗體、抗核抗體譜和肝功能檢查。

1.2 主要試劑與儀器

抗核抗體檢測試劑盒和抗核抗體譜檢測試劑盒購自歐蒙醫(yī)學實驗診斷有限公司。肝功能檢查試劑盒購自美國貝克曼庫爾特公司，采用美國貝克曼庫爾特AU5821-1全自動分析儀進行檢測。

1.3 方法

1.3.1 ANA定性檢測 免疫熒光法：將稀釋的血清標本與生物載玻片一起孵育，若IgG、IgA、IgM抗體結合相應核抗原，則為陽性。二次孵育時，由于熒光素標記的抗體與抗原結合，可在熒光顯微鏡先觀察到特異性熒光。結果判斷：抗體的滴度可根據(jù)不同稀釋度血清所產(chǎn)生的熒光強度進行判斷，見表1。

1.3.2 抗核抗體譜 免疫印跡法：第一次孵育時，稀釋血清與檢測膜反應，陽性標本的特異性抗體與對應的抗原反應，再加入酶標抗體孵育，加入底物，便可產(chǎn)生顏色反應。結果判斷：肉眼觀察，如果結果為陽性反應條膜上出現(xiàn)相應的結合印跡，沒有出現(xiàn)條形印跡的項目即為陰性。

1.3.3 肝功能檢測 丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、r-谷氨酰轉移酶（GGT）、總蛋白（TP）均用Beckman DXC800全自動生化儀上機檢測。

1.4 統(tǒng)計學處理

使用SPSS11.5統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料多組間比較用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 ANA陽性患者抗核抗體譜各項目檢出率

78例ANA陽性患者中檢出抗核抗體譜陽性有56例，占71.79%；56例ENA陽性患者抗SSA抗體檢出40例，占陽性結果的86.95%；A組抗核抗體譜檢出陽性19例，陽性率63.33%；B 組抗核抗體譜檢出20例，陽性率74.07%；C組抗核抗體譜檢出陽性17例，陽性率80.95%；檢出率C組高滴度組大于B組中滴度組，B組大于A組低滴度組；抗SSA抗體的檢出率最高，達37.18%。見表2。

2.2 ANA陽性各組患肝功能異常指標檢出率

78例ANA陽性患者中肝功能異常者為46例，占58.97%（46/78）； 其中，肝酶增高異常24例，占52.17%（24/46）；有4例所有肝酶全部升高?？偟鞍譚P增高共32例，清蛋白/球蛋白A/G倒置的共有30例，總蛋白增高且清蛋白/球蛋白A/G降低的患者共有35例，占76.09%（35/46），肝功能異?；颊叩臋z出率C組大于B組，B組大于A組，組間兩兩比較，差異有統(tǒng)計學意義。見表3。

3 討論

自身免疫疾病AID是指機體產(chǎn)生針對自身成分的抗體或細胞性免疫效應的現(xiàn)象。由此而引起自身組織的損傷并出現(xiàn)臨床癥狀。自身免疫病大都為原發(fā)性，少數(shù)為繼發(fā)性。前者與遺傳因素密切相關，預后多數(shù)不良，常呈慢性遷延[4]。自身免疫病的篩選指標可以選擇ANA，抗核抗體ANA是一組將自身真核細胞的各種成分脫氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等作為靶抗原的自身抗體的總稱，能與所有動物的細胞核發(fā)生反應，主要存在于血清中，也可存在于胸水、關節(jié)滑膜液和尿液中。ENA 即抗可溶性抗原?？箍扇苄钥乖璄NA抗體是針對核內可提取性核抗原的一種自身抗體，有10余種，主要為抗核糖核蛋白抗體（RNP）和酸性核蛋白（Sm）抗體。所謂ENA是指在鹽水中可溶解的一部分核抗原。ANA與ENA聯(lián)合檢測可以提高AID的檢出率，對AID的診斷、治療及預后做出有益的評估[6，7]。本文結果顯示，各滴度ANA陽性患者中ENA陽性的檢出率分別為A組低滴度組63.33%、B組中滴度組74.07%、C組高滴度組80.95%，隨著ANA滴度的升高，ENA陽性的檢出率也對應升高。ANA為陽性結果的患者ENA并不一定陽性，而是隨著ANA滴度的升高ENA檢出率也升高，因此，兩者的陽性率并不完全吻合，而是存在一定的檢測誤差，但是隨著ANA滴度的升高，兩個結果的陽性率趨向于吻合，即高滴度時檢測的誤差影響較小。因此本實驗的結果可以充分證明結論，即ANA滴度的升高ENA陽性的檢出率也對應升高。

自身免疫疾病AID是指機體產(chǎn)生針對自身成分的抗體或細胞性免疫效應的現(xiàn)象。由此而引起自身組織的損傷并出現(xiàn)臨床癥狀，其發(fā)病機制復雜，經(jīng)常累及多個臟器器官，肝臟是最容易受到侵犯的器官，也是人體合成多種蛋白質的主要器官，是重要的免疫器官。本文結果顯示，C組高滴度組的肝功能異常檢出率大于B組中滴度組，而B組又大于A組低滴度組，由此可見肝功能異常的檢出率隨著ANA滴度的升高而升高。AID可以產(chǎn)生大量的自身抗體累及臟器器官，臟器器官受損又可誘導產(chǎn)生自身抗體，因此自身抗體的水平高低可以反映臟器的受損程度[8-13]。ANA可以增強機體的免疫應答水平，導致機體臟器受到自身的免疫性損傷。

從本文來看，ANA的檢測對于AID患者的確診有重要的意義，ANA陽性與ENA的陽性率矛盾主要是因兩種物質的檢測方法的靈敏度不同導致，但是在高濃度的自身抗體時，這種檢測的誤差的影響較小，因此ENA檢測陽性率隨著ANA的滴度而發(fā)生變化，高滴度ANA時ENA的檢測陽性率也高。ANA陽性與肝功能損傷有一定的關聯(lián)性，隨著ANA的濃度的升高，對于肝臟的損傷程度也升高，肝功能檢測陽性率隨著ANA的滴度在升高。但ANA陽性患者的ENA檢查結果并非一定為陽性，兩者的陽性率并不完全吻合，對其進行聯(lián)合檢測有利于對自身免疫疾病進行輔助診斷。因此ANA的不同滴度檢測對于自身免疫性疾病的診斷、治療、預后的判斷具有重要的臨床意義，對自身免疫性疾病引起的器官損傷特別是肝臟的損傷診斷具有一定的意義。

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（收稿日期：2015-04-21）