產(chǎn)后三泡外洗濃縮液的薄層色譜鑒別

馮昀熠潘 智李 淳黎 潔游 燕夏 銘

（1.廣西壯族自治區(qū)桂林市中醫(yī)醫(yī)院，廣西 桂林 514002；2.貴陽中醫(yī)學(xué)院，貴州 貴陽 541000）

產(chǎn)后三泡外洗濃縮液的薄層色譜鑒別

馮昀熠1潘 智1李 淳1黎 潔1游 燕1夏 銘2

（1.廣西壯族自治區(qū)桂林市中醫(yī)醫(yī)院，廣西 桂林 514002；2.貴陽中醫(yī)學(xué)院，貴州 貴陽 541000）

目的：建立產(chǎn)后三泡外洗濃縮液的薄層色譜鑒別法。方法：飛龍掌血采用氨水堿化的三氯甲烷提取，在正己烷-三氯甲烷-丙酮（15:10:2）展開。腫節(jié)風(fēng)用石油醚萃取后再用三氯甲烷提取，在甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1)展開。結(jié)果：飛龍掌血斑點(diǎn)噴以改良碘化鉍鉀試液后顯色明顯。腫節(jié)風(fēng)在365nm下檢視有熒光斑點(diǎn)，氨熏后斑點(diǎn)變?yōu)辄S綠色。

產(chǎn)后三泡；飛龍掌血；腫節(jié)風(fēng)；薄層色譜鑒別

瑤醫(yī)藥是我國傳統(tǒng)醫(yī)藥的重要組成部分，具有顯著的民族性、地域性和傳統(tǒng)性，是民族地區(qū)重要的醫(yī)藥衛(wèi)生資源。近年來，瑤醫(yī)藥在防治多種疑難危重疾病中取得了卓越的成效，然而，由于缺乏系統(tǒng)整理和研究，許多療效明顯的瑤藥制備工藝落后，作用機(jī)理不明，難以得到推廣應(yīng)用，不少已瀕臨失傳。

產(chǎn)后三泡外洗濃縮液是來源于金秀瑤醫(yī)醫(yī)院的協(xié)定處方，其功能活血祛瘀、益氣養(yǎng)神、催乳。用于產(chǎn)婦產(chǎn)后恢復(fù)分娩疲勞，增強(qiáng)免疫力，減少惡露，催乳生乳。為了更好地推廣應(yīng)用，將其以成方制劑的方式進(jìn)行制劑研究，為推廣瑤醫(yī)藥積累一些實(shí)用經(jīng)驗(yàn)。

本文建立了2個(gè)藥材的薄層色譜鑒別標(biāo)準(zhǔn)，飛龍掌血為蕓香科植物飛龍掌血Toddalia asiatica Lam的根，腫節(jié)風(fēng)為金栗蘭科草珊瑚Sarcandra glabra(Thunb. )Nakai的干燥全草

1 儀器與試藥

1.1 儀器

電熱鼓風(fēng)干燥箱101A-3B型；SP-Ⅰ型手動(dòng)點(diǎn)樣器；TD-Ⅰ型手動(dòng)薄層鋪板機(jī)。

1.2 試藥

硅膠板（青島海洋化工廠）；無水乙醇，甲醇，甲酸，三氯甲烷，乙酸乙酯，三氯化鐵，鐵氰化鉀，石油醚（60～90℃），二硝基苯肼，甲苯，冰醋酸均為分析純?cè)噭?/p>

產(chǎn)后三泡外洗濃縮液：批號(hào)為20121124，20121125，20121126。

1.3 對(duì)照藥材

飛龍掌血對(duì)照藥材（批號(hào)121188-200502）、腫節(jié)風(fēng)對(duì)照藥材(121048-201205)

2 薄層鑒別

2.1 飛龍掌血TLC鑒別及方法學(xué)考察

2.1.1 飛龍掌血TLC鑒別

取產(chǎn)后三泡外洗濃縮液30mL，置蒸發(fā)皿中，加鹽酸10ml，蒸干（除去樹脂、色素等），殘?jiān)铀?0ml使溶解，濾過，濾液置分液漏斗中，加氨水2ml（pH值為11），用三氯甲烷60ml分兩次振搖提取，分取三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取飛龍掌血藥材3g，加80ml水，煎煮1小時(shí)，濾過，濾液濃縮至約30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。分別點(diǎn)樣5，10μl，展開劑：三氯甲烷∶甲醇∶濃氨試液（30∶1∶0.2），紫外光燈（365nm）下檢視；噴以改良碘化鉍鉀試液。結(jié)果：紫外光燈（365nm）無顯主斑點(diǎn)，噴以改良碘化鉍鉀試液，對(duì)照上方有一主斑點(diǎn)，樣品無。

取本品30mL置分液漏斗中，加濃氨水2ml，用三氯甲烷60ml分兩次振搖提取，分取三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取飛龍掌血藥材3g，加80ml水，煎煮1小時(shí)，濾過，濾液濃縮至約30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液和陰性溶液。點(diǎn)樣：分別點(diǎn)樣5，10μl。展開劑：正己烷-三氯甲烷-丙酮（15∶10∶2）。顯色：噴以改良碘化鉍鉀試液。

鑒別結(jié)果見圖1。供試品樣品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置顯相同顏色的斑點(diǎn)，而飛龍掌血陰性樣品溶液在此相應(yīng)位置無斑點(diǎn)顯示，故飛龍掌血陰性樣品溶液對(duì)此鑒別無干擾。

鑒別飛龍掌血質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為：將30mL產(chǎn)后三泡外洗濃縮液置分液漏斗中，加濃氨水2ml，用三氯甲烷60ml振搖提取2次，將三氯甲烷液蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇1ml作為供試品溶液。另取飛龍掌血藥材3g，加80ml水，煎煮1小時(shí)，濾過，濾液濃縮至約30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液和陰性溶液。

點(diǎn)樣：分別點(diǎn)樣5，10μl。

展開劑：正己烷-三氯甲烷-丙酮（15﹕10﹕2）。

顯色：噴以改良碘化鉍鉀試液。

圖1 飛龍掌血TLC圖

2.1.2 方法學(xué)考察

分別采用三種硅膠G板，在不同溫濕度下按照2.1.1試驗(yàn)，條件如下：硅膠G預(yù)制板青島海洋化工廠分廠T:10℃RH:75%；硅膠G預(yù)制板，上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑T:17℃RH:78%；硅膠G自制板T:25℃ RH:85%；以上三種板均能鑒別出飛龍掌血，且陰性無干擾。

2.2 腫節(jié)風(fēng)TLC鑒別及方法學(xué)考察

2.2.1 腫節(jié)風(fēng)TLC鑒別

分別取本品50mL，置分液漏斗中，用石油醚（60℃～90℃）振搖提取2次，每次25ml，棄去石油醚液，再用三氯甲烷振搖提取2次，每次30ml，合并三氯甲液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取腫節(jié)風(fēng)對(duì)照藥材2g，加80ml水，煎煮1小時(shí)，濾過，濾液濃縮至約50ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取異嗪皮啶對(duì)照品1mg，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各5、10、15μl，對(duì)照品溶液4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（9∶4∶1）[1]為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；置氨蒸氣中熏10分鐘，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的斑點(diǎn)變?yōu)辄S綠色，而腫節(jié)風(fēng)陰性樣品溶液在此相應(yīng)位置無斑點(diǎn)顯示，故腫節(jié)風(fēng)陰性樣品溶液對(duì)此鑒別無干擾。

圖2 腫節(jié)風(fēng)TLC圖

鑒別腫節(jié)風(fēng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為：取產(chǎn)后三泡外洗濃縮液50mL，置分液漏斗中，用石油醚(60℃～90℃)振搖提取2次，每次25ml，棄去石油醚液，再用三氯甲烷振搖提取2次，每次30ml，合并三氯甲液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml作為供試品溶液。另取腫節(jié)風(fēng)對(duì)照藥材2g，加80ml水，煎煮1小時(shí)，濾過，濾液濃縮至50ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取異嗪皮啶對(duì)照品1mg，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。點(diǎn)樣，樣品與對(duì)照藥材溶液各10μl，對(duì)照品溶液4μl。展開劑：甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1)

顯色：置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；置氨蒸氣中熏10分鐘，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的斑點(diǎn)變?yōu)辄S綠色。

2.2.2 方法學(xué)考察

分別采用三種硅膠G板，在不同溫濕度下按照2.2.1試驗(yàn)，條件如下：硅膠G預(yù)制板青島海洋化工廠分廠T:8℃RH:95%；硅膠G預(yù)制板，上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑T:17℃RH:58%；硅膠G自制板T:30℃ RH:65%；以上三種板和溫濕度條件均能鑒別出腫節(jié)風(fēng)，且陰性無干擾。

3 討論

色素等），再將其堿化后用三氯甲烷液萃取，但此法樣品無斑點(diǎn)。后直接用堿化的三氯甲烷萃取效果良好。

展開劑還曾試過三氯甲烷∶丙酮（30∶1），主斑點(diǎn)顯示不清，用正己烷-三氯甲烷-丙酮（15∶10∶2）Rf值稍低，但斑點(diǎn)清晰，分離效果好。

（2）預(yù)試驗(yàn)鑒別腫節(jié)風(fēng)，以乙酸乙酯為提取溶劑，易乳化，很難分層；以三氯甲烷為提取溶劑，易乳化，放置后可分層，供試品色譜圖中與異嗪皮啶對(duì)照品斑點(diǎn)上方有一干擾斑點(diǎn)；用石油醚（60℃～90℃）除去部分脂溶性成，再以三氯甲烷為提取溶劑，易乳化，放置后可分層，供試品色譜圖中與異嗪皮啶對(duì)照品斑點(diǎn)上方也有一干擾斑點(diǎn)，但經(jīng)置氨蒸氣中干擾小斑點(diǎn)清晰可辨。

[1] 國家藥典委員會(huì).中國藥典2010年版[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:208.

（1）預(yù)實(shí)驗(yàn)鑒別飛龍掌血，開始考慮加鹽酸（除去樹脂、

Postpartum three foam concentrate Washing chromatographic identification of TLC

Objective: To develop postpartum three foam concentrate Washing TLC method. Methods: Toddalia asiatica extract using chloroform alkaline ammonia in n-hexane-chloroform-acetone (15: 10: 2) to expand. Zhongjiefeng extracted with petroleum ether and then extracted with chloroform, toluene - ethyl acetate - formic acid (9:4:1) started. Results: dragon palm sprayed with blood spots after the modified bismuth potassium iodide test solution color is obvious. Zhongjiefeng view at 365nm fluorescent spots, Ammonia spot turns yellow-green.

Postpartum three bubble; Toddalia asiatica; Zhongjiefeng; chromatographic identification of TLC

R9

A

1008-1151(2015)03-0098-02

2015-02-11

廣西衛(wèi)生廳中醫(yī)藥科技專項(xiàng)（GZYZ1126）。

馮昀熠，男，廣西壯族自治區(qū)桂林市中醫(yī)醫(yī)院中藥師，碩士研究生，從事中藥新藥開發(fā)研究。