興凱湖翹嘴鲌幼魚藥物敏感性試驗(yàn)

崔 程 尹海富 王連琪 尹 航

（1 遼寧省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站 沈陽 110031）（2 東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 哈爾濱 150030）

翹嘴鲌（Culter alburnus）隸屬于鯉形目、鯉科、鲌亞科、鲌屬（Topmouth culter），俗稱大白魚、噘嘴鰱子、翹嘴巴、翹鲌子、關(guān)刀魚等，并且在不同的地區(qū)有不同的地方名稱，而興凱湖翹嘴鲌?jiān)谂d凱湖，屬于一種特殊的地理種群，是“四大淡水名魚”之一。興凱湖翹嘴鲌個(gè)體大、生長速度快、肉質(zhì)潔白、肉味細(xì)嫩鮮美。據(jù)測定，興凱湖翹嘴鲌每100g魚肉含蛋白質(zhì)18.6g、脂肪4.6g，營養(yǎng)十分豐富。興凱湖翹嘴鲌不僅是招待貴賓餐桌上的佳肴，更深得廣大美食家的好評。

由于長期的過度捕撈，現(xiàn)在興凱湖翹嘴鲌?zhí)烊毁Y源已越來越少，而市場需求量日趨增長。近年來，興凱湖翹嘴鲌的人工繁殖、苗種培育、成魚養(yǎng)殖已初具規(guī)模，為了配合養(yǎng)殖生產(chǎn)的發(fā)展需要，有必要對池養(yǎng)興凱湖翹嘴鲌進(jìn)行水產(chǎn)藥物的敏感性試驗(yàn)，為科學(xué)用藥提供參考，促進(jìn)其養(yǎng)殖生產(chǎn)的發(fā)展，以期獲得更大的經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)用魚

急性毒性試驗(yàn)用魚來自于黑龍江農(nóng)墾震達(dá)興凱湖大白魚研究所養(yǎng)殖基地7號池，面積3300m2，選擇規(guī)格一致、體型勻稱的個(gè)體作為實(shí)驗(yàn)材料魚，幼魚全長7.25±1.84cm，體重4.88±2.12g。試驗(yàn)前將魚放在水族箱中暫養(yǎng)一周以適應(yīng)試驗(yàn)環(huán)境。

1.2 試驗(yàn)藥品

試驗(yàn)藥物為車輪凈、復(fù)合H高聚碘、特效殺蟲靈、二氧化氯四種水產(chǎn)藥物，如表1所示。

1.3 試驗(yàn)條件

試驗(yàn)用水為經(jīng)過充分曝氣的深井水，進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)停止曝氣。試驗(yàn)期間溶解氧5mg/L以上、水溫范圍20~24℃、pH7.1~7.9。

1.4 試驗(yàn)方法

選擇體格較健壯、體型勻稱的興凱湖翹嘴鲌幼魚。幼魚全長7.25±1.84cm，體重4.88±2.12g。翹嘴鲌幼魚暫養(yǎng)在水族箱中一周，以適應(yīng)試驗(yàn)的環(huán)境條件。在試驗(yàn)前的24h停止投喂。

表1 試驗(yàn)藥物的規(guī)格與成分Table1 Specificationsand ingredientsof testdrugs

在配制預(yù)試驗(yàn)藥物溶液時(shí)，按幾何數(shù)量級間距來選擇濃度范圍。整個(gè)試驗(yàn)周期的時(shí)間為24h。每個(gè)方桶內(nèi)放5條興凱湖翹嘴鲌幼魚，從試驗(yàn)開始8h內(nèi)，需要持續(xù)觀察興凱湖翹嘴鲌幼魚對每一種藥物的應(yīng)激反應(yīng)狀態(tài)和魚體表現(xiàn)。在試驗(yàn)開始后的6h、12h和24h時(shí)間段記錄興凱湖翹嘴鲌幼魚的死亡數(shù)量，此外還要及時(shí)清除藥物中毒死亡的魚。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)得到的試驗(yàn)結(jié)果反復(fù)試驗(yàn)，盡量縮小藥物濃度的范圍，從而確定出正式試驗(yàn)的濃度范圍，確保試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)得到的結(jié)果，在使興凱湖翹嘴鲌幼魚全部存活的最高濃度和使之全部致死的最低濃度之間的范圍，從而確定正式試驗(yàn)時(shí)的藥物濃度范圍。每一種藥物都選擇5個(gè)間距濃度來作為正式試驗(yàn)的濃度（見表2），每一個(gè)濃度設(shè)置三個(gè)平行試驗(yàn)，同時(shí)還要設(shè)置一組空白試驗(yàn)進(jìn)行對照，試驗(yàn)結(jié)果取其平均值。正式試驗(yàn)每個(gè)方桶內(nèi)放入10尾興凱湖翹嘴鲌幼魚，試驗(yàn)周期為4d。在試驗(yàn)期間，保證溶解氧含量在5mg/L以上，水溫20~24℃，pH7.1~7.9。配置藥物時(shí)，首先需要將試驗(yàn)藥物配置成母液，再根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求按比例稀釋到所需的濃度，如此可以增加藥物濃度的準(zhǔn)確性，最大限度減少誤差。

表2 各種試驗(yàn)藥物的濃度梯度Table2 Concentration gradientofvarious testdrugs

1.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

觀察記錄各組魚苗在放入藥液后24h、48h和96h的存活情況。將96h內(nèi)使魚苗致死的最低濃度及下一個(gè)濃度定為最低致死濃度范圍。中間忍受限(半致死濃度)TLm按Reed-Muench法求出，安全濃度（SC）根據(jù)下式求得：SC＝48h LC50×0.3／（24h LC50／48h LC50）2。

2 結(jié)果

2.1 各種藥物對興凱湖翹嘴鲌的最低致死濃度范圍

試驗(yàn)表明，興凱湖翹嘴鲌魚苗對這4種藥物的敏感性均不同（見表3），其中以車輪凈最敏感，復(fù)合H高聚碘最不敏感。

表3 各種藥物對興凱湖翹嘴鲌的最低致死濃度范圍Table3 Minimum lethalconcentration rangeofvariousdrugs

2.2 各種藥物對興凱湖翹嘴鲌魚苗的半致死濃度和安全濃度

藥物的毒性大小可用TLm值表示，TLm值越小，毒性越大。本次試驗(yàn)結(jié)果（見表4）。若按48h的TLm值大小排列，各種藥物對魚苗的毒性大小依次為:車輪凈＞特效殺蟲靈＞二氧化氯＞復(fù)合H高聚碘。

表4 4 種藥物對興凱湖翹嘴鲌的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果Table4 Acute toxicity test resultsof four kindsofdrugs

3 分析與討論

3.1 車輪凈為微黃色透明液體，主要成分為Amobam（代森銨）和苦參堿。其所含特殊成分可滲入蟲體表皮，能夠刺激車輪蟲、斜管蟲、小瓜蟲等原生動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng)，使蟲體麻痹，置其萎縮死亡。此外，本品對養(yǎng)殖池塘的輪蟲也有一定的殺滅作用。由試驗(yàn)結(jié)果可知，在以上四種水產(chǎn)藥物中，興凱湖翹嘴鲌幼魚對車輪凈最敏感，毒性最大，其TLm48為0.0057mg/L，安全濃度（SC）也只有0.0006mg/L，因此在使用車輪凈對養(yǎng)殖水體進(jìn)行殺蟲時(shí)要謹(jǐn)慎。興凱湖翹嘴鲌幼魚受車輪凈中毒后，魚類急劇游動(dòng)，無目的的上下竄游，橫沖直撞、翻滾，鰓部充血甚至出血，一般魚類興奮期過后，即麻痹不動(dòng)，沉底死亡。

3.2 復(fù)合H 高聚碘主要成分為H 高聚碘、植物萃取液，性狀為棕紅色透明液體。復(fù)合H高聚碘是由多個(gè)碘原子聚合成的高聚物和植物萃取物經(jīng)特殊工藝復(fù)合而成，能迅速殺滅池塘中的各種病原體和寄生蟲。復(fù)合H高聚碘制劑的+5價(jià)碘與聚維酮碘制劑相比，+5價(jià)碘具有極高穿透性，殺菌能力提高10倍以上，本品同時(shí)富含數(shù)種天然植物萃取物協(xié)同殺菌殺蟲，在同樣有效碘含量下，殺菌能力更高，有效時(shí)間持久，從而有效降低了使用成本，是新一代的理想消毒劑。而溴制劑屬于性狀較溫和的水體消毒劑，雖然溴制劑在水中殺菌效果與普通碘制劑相當(dāng)，但其起效慢，成本高，不適合于治病消毒。普通碘制劑較上述兩種消毒劑相比，對水中生物刺激性小，安全，無殘留。而復(fù)合H高聚碘與普通的碘制劑相比較而言，具有更加突出的優(yōu)越性，因其氧化性更強(qiáng)，因而具有更強(qiáng)的殺菌消毒能力，復(fù)合H高聚碘藥效時(shí)間更加持久，且受pH影響較小，在強(qiáng)光照射的條件下，穩(wěn)定性良好，不會(huì)對人的機(jī)體產(chǎn)生毒副作用。據(jù)謝春剛等研究，計(jì)算出扁吻魚幼魚對聚維酮碘的安全濃度（SC）為18.8mg/L，而本實(shí)驗(yàn)計(jì)算出興凱湖翹嘴鲌幼魚對復(fù)合H高聚碘的安全濃度（SC）為8.818mg/L，同作為碘制劑結(jié)果相近，由于復(fù)合H高聚碘藥效更優(yōu)越，所以兩者之間又會(huì)有些差別。興凱湖翹嘴鲌幼魚在復(fù)合H高聚碘急性中毒以后，魚表現(xiàn)為狂游不止、急燥不安，沖撞到桶壁以后，游動(dòng)速度慢下來，頭部向下沉，尾部向上漂，最后直至筋疲力盡，沉于方桶底部并最終死亡，通過觀察可以發(fā)現(xiàn)，隨著聚合H高聚碘藥物濃度的增加、幼魚染毒時(shí)間的延長，魚體較正常魚體色變黑，尾部略微彎曲。

3.3 特效殺蟲靈主要成分是阿維菌素，性狀為淡黃色至黃褐色溶液。阿維菌素是一種神經(jīng)毒劑，作用于害蟲的神經(jīng)中樞，見效快，不可逆。最終導(dǎo)致害蟲的麻痹和死亡。有研究表明，阿維菌素對植物沒有毒性，對哺乳動(dòng)物毒性較低，對魚類和蝦、蟹類毒性較強(qiáng)，稍有過量就會(huì)造成水產(chǎn)動(dòng)物的中毒。由徐文彥、郭國軍等研究顯示阿維菌素對黃河鯉24h、48h的半致死濃度LC50分別為8.72×10-3mg/L、7.85×10-3mg/L，安全濃度（SC）為0.697×10-3mg/L。而據(jù)盛銀平、饒毅等研究結(jié)果表明：“混養(yǎng)車輪凈”（阿維菌素5%）對草魚、鳊、澎澤鯽、鳙、鰱、彩鯽、錦鯉的96h LC50分別為2.2736 mg/L、1.9477mg/L、1.9055mg/L、1.5201mg/L、1.4676mg/L、1.9911mg/L、2.0693mg/L，安全濃度分別為0.2274mg/L、0.1948mg/L、0.1906mg/L、0.1520mg/L、0.1468mg/L、0.1991mg/L、0.2063mg/L。本試驗(yàn)結(jié)果顯示水產(chǎn)藥物特效殺蟲靈（阿維菌素1%）對興凱湖翹嘴鲌幼魚的TLm24、TLm48、TLm96分別為0.566mg/L、0.528mg/L、0.447mg/L，安全濃度（SC）為0.138mg/L。與上述研究結(jié)果近似。但是楊光的阿維菌素對鯉魚毒理效應(yīng)的研究試驗(yàn)結(jié)果表明，阿維菌素對鯉魚24h、48h、72h和96LC50分別為117.88μg·L-1、83.31μg·L-1、47.38μg·L-1和41.23μg·L-1，安全濃度為4.12μg·L-1。與本試驗(yàn)安全濃度結(jié)果相去甚遠(yuǎn)，有待討論。在特效殺蟲靈致魚中毒后，興凱湖翹嘴鲌幼魚沿著方桶四壁急速游動(dòng)，像發(fā)狂了一樣，然后失去平衡，頭部朝上，身體在水中向下垂并彎曲，再然后慢慢地向下沉并且側(cè)身臥于方桶底部，隨著用藥時(shí)間的延長，幼魚鰓蓋開始大幅度擴(kuò)張，呼吸頻率卻比最初要弱，稍過一會(huì)兒，幼魚又在水面活動(dòng)并急促的張嘴呼吸，如此反復(fù)多次，最后沉于底部死亡，也有少數(shù)魚死后漂浮于水面。幼魚中毒死亡以后，經(jīng)過解剖發(fā)現(xiàn)，魚體背部的顏色較之前或變淺或變黑，其它的部位則呈現(xiàn)出微紅色。頭部有充血的癥狀，鰓絲的顏色也要比對照組的正常魚更加鮮紅，漁場粘膜充血或出血明顯。

3.4 二氧化氯是一種高效并且低毒的廣譜性殺菌消毒劑。主要成分為亞氯酸鈉、二氧化氯。性狀為白色或微黃色結(jié)晶或粉末，有次氯酸的刺激性氣味。在使用二氧化氯時(shí)需要做到現(xiàn)用現(xiàn)配，由于二氧化氯不會(huì)受水體當(dāng)中有機(jī)物和pH等因素的影響，所以二氧化氯能在pH2~10范圍之間依舊保持較高的殺菌效率，同時(shí)二氧化氯也具有高效性，近些年來，二氧化氯作為防治和治療多種魚病類藥物在水產(chǎn)增養(yǎng)殖過程中被廣泛使用，同時(shí)也具有較好的療效。本次試驗(yàn)中，二氧化氯24h半致死濃度為4.843mg/L、48h為4.196mg/L、72h為3.448mg/L、96h為3.281mg/L，計(jì)算出安全濃度為0.945mg/L。參考其他學(xué)者的研究表明：二氧化氯對花魚骨的安全濃度為1.04mg/L，對金魚的安全濃度為1.40mg/L，對草魚魚苗的安全濃度為6.34mg/L，對泥鰍的安全濃度為2.32mg/L，對黃顙魚的安全濃度為0.51mg/L。根據(jù)丁淑荃等研究鱖對二氧化氯的安全濃度為0.37mg/L。本試驗(yàn)計(jì)算出的二氧化氯對興凱湖翹嘴鲌幼魚的安全濃度（SC）為0.945mg/L，與本試驗(yàn)得出的結(jié)果相近。一般情況下，采用二氧化氯全池潑灑的方式來進(jìn)行殺菌消毒，一般使用濃度為0.1~0.2mg/L，所以在興凱湖翹嘴鲌?jiān)鲳B(yǎng)殖的過程中，可以把二氧化氯當(dāng)做一種理想的消毒殺菌藥物來使用。興凱湖翹嘴鲌幼魚二氧化氯中毒后，魚體煩燥不安，尾部劇烈擺動(dòng)失去平衡，腹部向上翻動(dòng)，魚體全部仰游輕微昏迷直至出現(xiàn)死亡；最后鰓蓋充血，尾鰭柄充血死亡。

由試驗(yàn)得知，車輪凈（45%Amobam，苦參堿溶液）、復(fù)合H高聚碘（10%H高聚碘，植物萃取液）、特效殺蟲靈（1%阿維菌素）、二氧化氯對興凱湖翹嘴鲌幼魚的安全濃度分別為0.108mg/L、8.818mg/L、0.138mg/L、0.945mg/L。這四種水產(chǎn)藥物的安全濃度均高于廠家推薦使用濃度。綜上所述，以上四種水產(chǎn)藥物均可以用于興凱湖翹嘴鲌的疾病防治。