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    蒙藥材花錨中黃酮類提取工藝條件的研究

    2015-07-12 09:06:32敖道夫巴達(dá)拉胡
    中國(guó)民族醫(yī)藥雜志 2015年11期
    關(guān)鍵詞:浸膏蘆丁黃酮類

    敖道夫 巴達(dá)拉胡

    (內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院,內(nèi)蒙古 通遼 028000)

    蒙藥材花錨蒙古名為西依熱地格達(dá)、庫(kù)日迪克、都莫迪克、達(dá)格木-札德朱爾、章古圖-地格達(dá)。為龍膽科植物花錨(Halenia sibirica Borkh.)的干燥全草。氣微,味甘、苦,性平、柔、膩。平息“協(xié)日”,清熱,愈傷。用于目黃,口苦,高燒,頭痛,尿黃,“協(xié)日”熱,傷熱,脈熱[1]。是蒙醫(yī)常用藥材,也是傳統(tǒng)方劑旺拉嘎-3 湯的主要組成成分。在我國(guó)除華南和華東地區(qū)外,廣布在其他地區(qū)以及蒙古、西伯利亞、遠(yuǎn)東、歐洲等國(guó)家,生長(zhǎng)于山溝、林緣、林下、水邊濕草地[3]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,目前已從花錨中分離得到了口山酮、口山酮苷、黃酮、黃酮苷、裂環(huán)烯醚萜、三萜類和生物堿等類型成分[4]。現(xiàn)將對(duì)蒙藥材花錨中總黃酮類成分提取工藝進(jìn)行研究,以期為該民族藥資源的開發(fā)研究及臨床應(yīng)用提供參考。

    1 儀器與材料

    1.1 儀器:ZDHW 型調(diào)溫電熱套(北京中興偉業(yè)儀器有限公司),752 -紫外分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司)HH-W600 數(shù)顯三用恒溫水箱(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司)TG328B 電光天平(福州天平儀器廠)。

    1.2 材料:蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(由中國(guó)藥品生物制品鑒定所提供),花錨藥材采自五岔溝林業(yè)局浩森溝林場(chǎng);其他試劑均為分析純。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 提取工藝條件的正交安排:對(duì)影響花錨提取物收率的溶劑量、提取時(shí)間、乙醇濃度、提取次數(shù)4 個(gè)因素,分別取3 個(gè)水平進(jìn)行考察。因素水平見(jiàn)表1。

    表1 因素水平

    2.2 考察指標(biāo)的確定和測(cè)定

    2.2.1 考察指標(biāo)的確定:黃酮為花錨的主要有效成分,易溶于乙醇,故采用乙醇回流法提取花錨,并將蘆丁作為考察指標(biāo),同時(shí)結(jié)合提取率優(yōu)選最佳工藝。

    2.2.2 浸膏得率的測(cè)定:按L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn),取花錨約5.0g 在平行操作條件下加熱回流、提取、過(guò)濾,濾液水浴濃縮、蒸干,稱其質(zhì)量。按浸膏得率(%)= 浸膏質(zhì)量/樣品質(zhì)量100%[4]計(jì)算.其見(jiàn)表2。

    表2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果

    2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:精密稱取蘆標(biāo)準(zhǔn)20mg,放入100mL 容量瓶中,加無(wú)水乙醇90mL,在水浴鍋上加熱溶解,冷卻后,再用無(wú)水乙醇定容(0.2mg/mL),備用。然后精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0 、5.0、6.0mL 分別置25mL 容量瓶中,分別加水至6.0mL ,加5%的亞硝酸鈉溶液1.0mL,搖勻,放置6min,加10%的硝酸鋁溶液1.0mL,搖勻,放置6min,加10%的氫氧化鈉溶液10mL,再加水至刻度,搖勻,放置15min,依據(jù)分光光度法在500nm 波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出回歸方程。結(jié)果得到花錨濃度Y 與吸光度X 關(guān)系曲線的回歸方程為Y =0.608X-0.0023,相關(guān)系數(shù)r =0.9998,所以本實(shí)驗(yàn)花錨濃度與吸光度有良好的相關(guān)性。

    2.2.4 樣品含量測(cè)定:精密稱取正交實(shí)驗(yàn)號(hào)花錨各約5.0g,加熱回流、提取、過(guò)濾、濾液水浴濃縮、蒸干,殘?jiān)脽o(wú)水乙醇定溶至5mL,作為供試品溶液。然后精密吸取上述提取液各1mL,分別加水至6.0mL ,加5%的亞硝酸鈉溶液1.0mL,搖勻,放置6min,加10%的硝酸鋁溶液1.0mL,搖勻,放置6min,加10%的氫氧化鈉溶液10mL,再加水至刻度,搖勻,放置15min,依據(jù)分光光度法在500nm 波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度,計(jì)算黃酮含量,見(jiàn)表2。

    2.3 方差分析:將正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析,分析結(jié)果見(jiàn)表3。

    表3 方差分析表

    綜合2 個(gè)考察指標(biāo)工藝條件,確定花錨最佳提取工藝條件為A2B2C3D1.

    3 結(jié) 果

    通過(guò)以上的L9(34)正交實(shí)驗(yàn),最終確定提取花錨中黃酮類成分的最佳工藝條件為A2B2C3D1。即70%乙醇,12倍量,提取3 次,提取時(shí)間0.5h。

    本研究建立的分光光度法用于測(cè)定黃酮類含量,方法簡(jiǎn)便,實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠,最佳條件適合批量生產(chǎn)該藥材的提取。

    [1]中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn) 蒙藥分冊(cè)[M].1998:45.

    [2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.

    [3]邰巴達(dá)拉胡,拉喜那木吉拉,桂榮,等.蒙藥材花錨的化學(xué)成分研究進(jìn)展[J].中成藥,2015,5(37).

    [4]包保全,孫啟時(shí),包巴根那,等.花錨屬植物化學(xué)成分及生物活性研究進(jìn)展[J].中藥材,2003,5(26).

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