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    乙型肝炎病毒E抗原、大蛋白與乙肝病毒DNA的關系

    2015-07-01 23:43:57樊燕王永忠鄭國軍朱珍蔣莉
    山東醫(yī)藥 2015年1期
    關鍵詞:乙型肝炎定量陰性

    樊燕,王永忠,鄭國軍,朱珍,蔣莉

    (常州市第三人民醫(yī)院,江蘇常州213001)

    乙型肝炎病毒E抗原、大蛋白與乙肝病毒DNA的關系

    樊燕,王永忠,鄭國軍,朱珍,蔣莉

    (常州市第三人民醫(yī)院,江蘇常州213001)

    目的 探討乙型肝炎病毒(HBV)表面E抗原(HBeAg)、大蛋白(LHBs)與乙肝病毒DNA(HBV DNA)的關系。方法 分別檢測109例HBeAg陽性和116例HBeAg陰性的乙型肝炎患者的LHBs、HBV DNA表達情況,并進行對比分析。結(jié)果 HBeAg陽性組中,LHBs、HBV DNA的檢測率分別為89.9%和84.4%,二者比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05);HBV DNA定量與HBeAg定量和LHBs均呈正相關(r分別為0.81、0.94,P均<0.05),不同HBV DNA載量組間HBeAg定量和LHBs含量均有統(tǒng)計學差異(P均<0.01)。結(jié)論 對HBeAg陰性患者而言,LHBs能在一定程度上反映體內(nèi)HBV的復制情況,可作為HBV DNA的補充,指導臨床診治和用藥。

    乙型肝炎病毒大蛋白;乙型肝炎病毒E抗原;乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸

    乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白由HBV DNA的S區(qū)編碼,包括大蛋白(LHBs)、中蛋白和主蛋白三種成分。LHBs存在于感染性Dane顆粒和亞病毒顆粒中,它獨特的雙重跨膜拓撲結(jié)構(gòu)使其在病毒生活周期中執(zhí)行了兩個重要功能,一是作為配體和病毒受體結(jié)合,二是在病毒體形成過程中負責與核殼體相接觸,包裝外膜,同時介導HBeAg亞病毒顆粒在細胞中的滯留[1,2]。本研究對HBV感染患者進行LHBs、HBV DNA、HBeAg檢測,分析三者間的關系?,F(xiàn)報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料 選擇我院2013年6月~2014年6月收治的225例乙型肝炎患者,均符合2000年全國病毒性肝炎學術會議修訂的診斷標準[3]。根據(jù)HBeAg檢測結(jié)果將患者分為陽性組109例和陰性組116例,陽性組男51例、女58例,年齡(50.6±14.8)歲;陰性組男64例、女52例,年齡(49.0±15.6)歲。兩組性別、年齡具有可比性。

    1.2 方法

    1.2.1 檢測方法 采集受試者清晨空腹靜脈血5 mL,分離血清,-80 ℃保存待檢。HBV DNA檢測采用美國ABI 7500型熒光定量PCR儀,試劑由上海復星醫(yī)學科技有限公司提供;HBeAg檢測采用Wallac公司生產(chǎn)的DELFIA1235全自動時間分辨免疫熒光分析儀,試劑由廣州市達瑞抗體工程技術有限公司提供;LHBs檢測采用ELSIA方法,試劑由北京熱景生物技術有限公司提供。所有檢測均按照SOP規(guī)程操作。

    1.2.2 統(tǒng)計學方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,率的比較用配對資料χ2檢驗。計量資料組間差異采用方差分析,相關性分析采用線性相關分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    2.1 LHBs、HBV-DNA檢測結(jié)果比較 根據(jù)HBeAg抗原檢測結(jié)果分為陰性和陽性兩組,LHBs、HBV DNA陽性率比較均無統(tǒng)計學差異(P均>0.05),見表1。

    表1 兩組LHBs、HBV DNA檢測結(jié)果比較[例(%)]

    2.2 HBV DNA與HBeAg及HBLs的相關性 根據(jù)HBV DNA拷貝數(shù)不同數(shù)量級分為四個組,HBV DNA拷貝數(shù)與HBeAg定量具有相關性(r=0.81,P<0.05),HBV DNA拷貝數(shù)與HBLs 具有相關性(r=0.94,P<0.05),不同HBV DNA拷貝數(shù)組間HBeAg含量差異具有統(tǒng)計學意義(F=93.0,P<0.01),不同HBV DNA拷貝數(shù)組間LHBs含量差異具有統(tǒng)計學意義(F=118.0,P<0.01)。見表2。

    3 討論

    HBeAg是臨床判定HBV復制程度及判斷慢性乙型肝炎患者預后的一個重要指標,是抗病毒治療終點的重要依據(jù)之一。HBV DNA是HBV存在和復制的重要指標,臨床常應用于判斷HBV感染者病毒復制的情況及臨床有無傳染性。Bruns等[4]對鴨肝模型的研究發(fā)現(xiàn),含有嗜肝病毒血清的感染性不僅依賴于具有感染性的Dane顆粒的多少,而且還依賴缺乏核酸、富含LHBs的亞病毒顆粒的數(shù)量,后者主要包括管狀顆粒和小球型顆粒,這些顆粒具有反式激活作用,能夠顯著增強細胞內(nèi)的病毒復制和基因表達。LHBs包括HBsAg、PreS1、PreS2蛋白,是HBV Dane顆粒和亞病毒顆粒的主要包膜成份,與HBV復制密切相關,LHBs檢測反映的是患者血清中是否存在Dane顆粒和亞病毒顆粒,因而對判定體內(nèi)HBV復制或有無傳染性可能具有更重要的意義[5~7]。

    表2 HBV DNA定量和HBeAg定量檢測結(jié)果對比

    本研究采用針對LHBs特殊構(gòu)象制備的單克隆抗體對225例HBV感染者血清中HBV外膜LHBs進行檢測,結(jié)果顯示LHBs與HBV DNA的陽性率無統(tǒng)計學差異,可認為LHBs在一定程度上反映了HBV復制。但同時我們也發(fā)現(xiàn)部分樣本LHBs陽性而HBV DNA陰性,其原因可能是LHBs的亞病毒顆粒的數(shù)量是完整病毒顆粒的10 000倍以上,血液中消退時間也晚于HBV DNA[8]。以往認為,HBeAg陰轉(zhuǎn)是HBV復制減弱、傳染性降低和預后良好的表現(xiàn)。本研究116例HBeAg陰性患者中,HBV與LHBs陽性率分布為52.6%和50.9%,說明這部分患者體內(nèi)病毒復制相當活躍,其原因可能是免疫清除不完全或HBV前C區(qū)或BCP區(qū)發(fā)生變異,HBeAg合成障礙,但不影響病毒復制[8,9]。顯然在判斷病毒復制和傳染性方面,LHBs比HBeAg具有明顯優(yōu)勢,在不具備HBV DNA檢測條件的基層醫(yī)院,LHBs可作為判斷病毒復制的血清學指標。

    研究證實,LHBs與HBeAg和HBV DNA之間具有良好的相關性[10]。本研究顯示,HBV DNA與HBeAg和LHBs呈正相關,不同數(shù)量級HBV DNA載量組間HBeAg和LHBs含量均存在顯著統(tǒng)計學差異,顯示三者一定程度上都能夠反映HBV復制情況,但對于HBeAg陰性患者,LHBs和HBV DNA或更具有價值,檢測LHBs能彌補HBeAg的缺陷,反映患者體內(nèi)HBV復制的真正水平,LHBs和HBV DNA可能更適合抗病毒治療效果的判斷,對指導臨床合理用藥、避免過早停藥導致病情反復具有一定意義[11]。

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    常州市衛(wèi)生局重大項目(201312)。

    王永忠

    10.3969/j.issn.1002-266X.2015.01.016

    R512.6

    B

    1002-266X(2015)01-0041-02

    2014-08-27)

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