PTEN、p53和Survivin表達(dá)在胃癌組織中的意義

張海鵬,梁鵬鋒,苗 峰(.陜西省中醫(yī)醫(yī)院普外科，西安 7000;.陜西省渭南市中心醫(yī)院普外科 74000;.陜西省西安市兒童醫(yī)院新生兒外科 70056)

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·論 著·

PTEN、p53和Survivin表達(dá)在胃癌組織中的意義

張海鵬1,梁鵬鋒2,苗 峰3(1.陜西省中醫(yī)醫(yī)院普外科，西安 710003;2.陜西省渭南市中心醫(yī)院普外科 714000;3.陜西省西安市兒童醫(yī)院新生兒外科 710056)

目的 探討PTEN、p53和Survivin表達(dá)在胃癌組織中的臨床意義。方法 選擇2010～2013年陜西省中醫(yī)醫(yī)院收治的60例胃癌患者的胃癌標(biāo)本作為A組，選擇同期于陜西省中醫(yī)醫(yī)院手術(shù)切除吻合口切緣處的正常胃黏膜60例作為B組，另取不典型增生胃黏膜石蠟標(biāo)本65例作為C組，采用免疫組織化學(xué)鏈霉親和素方法檢測(cè)Survivin、PTEN和p53基因在3組中的表達(dá)情況。結(jié)果 胃癌組織中的Survivin、p53基因陽性率高于其他兩組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Survivin基因的陽性表達(dá)和p53陽性呈正相關(guān)(P<0.05)，和PTEN陰性率呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，3種基因在胃癌不同病理指標(biāo)中的陽性表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 Survivin、PTEN和p53基因異常表達(dá)和胃癌發(fā)生有密切的關(guān)系，其中PTEN與p53基因是判斷胃癌生物學(xué)行為的重要指標(biāo)，Survivin、PTEN、p53基因在胃癌發(fā)生及發(fā)展中有著相互協(xié)同的作用。

Survivin基因； PTEN基因； p53基因； 胃癌

胃癌是世界上發(fā)病率較高的癌癥，中國是一個(gè)胃癌高發(fā)國家，依據(jù)目前的研究結(jié)果，胃癌病因?qū)W、發(fā)病機(jī)制和胃癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制等尚仍未完全研究清楚[1-2]。本研究通過免疫組化法檢測(cè)胃癌標(biāo)本、不典型增生胃黏膜以及正常胃黏膜的Survivin、張力蛋白同源物基因(PTEN)和p53的表達(dá)情況，并進(jìn)行比較，同時(shí)分析各基因表達(dá)和患者的一般情況、腫瘤的浸潤深度及分化程度等參數(shù)的相關(guān)性，進(jìn)一步闡明在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中的具體分子調(diào)控機(jī)制，從而有利于判斷胃癌預(yù)后及為相應(yīng)的治療提供重要的理論依據(jù)，現(xiàn)將情況報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010～2013年陜西省中醫(yī)醫(yī)院收治的60例胃癌患者的胃癌標(biāo)本作為A組，選擇同期于陜西省中醫(yī)醫(yī)院手術(shù)切除吻合口切緣處的正常胃黏膜60例作為B組，另取不典型增生胃黏膜石蠟標(biāo)本65例作為C組。A組中男38例，女22例，年齡48～75歲，平均(53.5±2.8)歲。B組中男34例，女26例，年齡46～77歲，平均(52.8±2.7)歲。C組中男35例，女30例，年齡46～78歲，平均(54.5±3.6)歲。所有標(biāo)本均在術(shù)后用40 g/L甲醛進(jìn)行固定處理，并使用石蠟包埋。3組患者在性別、年齡等一般資料方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 兔抗人PTEN、山羊抗人Survivin相關(guān)性抗體、p53相關(guān)性抗體，山羊抗兔及兔抗山羊SABC試劑盒和DAB顯色液均于博士德生物工程有限公司購買。標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)的脫蠟水化之后，置于0.01 mol/L的枸櫞酸緩沖液中進(jìn)行微波抗原修復(fù)，并在室溫下進(jìn)行冷卻。按照SABC試劑盒的說明書進(jìn)行相關(guān)的操作，其中DAB顯色及蘇木素的復(fù)染使用已知陽性片與PBS分別進(jìn)行陽性與陰性的對(duì)照。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo) (1)Survivin基因陽性表達(dá)判斷：染色陽性信號(hào)棕黃色顆粒，大部分在細(xì)胞質(zhì)，偶在細(xì)胞核。其中每張切片檢測(cè)5個(gè)視野，染色強(qiáng)度高于背景則為陽性，陽性細(xì)胞數(shù)小于10%為(+)，10%～60%為(++)，高于60%則為(+++)，染色強(qiáng)度和背景之間無明顯差異則為(-)。(2)PTEN基因的陽性表達(dá)判斷：染色陽性呈棕黃色顆粒，于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，同樣每張切片檢測(cè)5個(gè)視野，陽性細(xì)胞小于10%為(-)，陽性細(xì)胞10%～40%則為(+)，介于40%～70%為(++)，高于70%則為(+++)。(3)突變型p53基因陽性表達(dá)判斷：染色陽性呈棕黃色顆粒，在細(xì)胞核內(nèi)。每張切片檢測(cè)5個(gè)視野，其中陽性細(xì)胞數(shù)小于5%則為(-)，5%～25%則為(+)，25%～50%則為(++)，高于50%為(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用等級(jí)秩和檢驗(yàn)及χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組中Survivin基因、PTEN基因、突變型p53基因表達(dá)情況比較 胃癌組織中的Survivin基因、p53基因陽性率高于其他兩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組中Survivin基因、PTEN基因、突變型p53基因表達(dá)情況比較

2.2 Survivin基因、p53基因和PTEN表達(dá)之間的相關(guān)性 Survivin基因的陽性表達(dá)和p53陽性關(guān)系密切呈正相關(guān)(P<0.05)；和PTEN陰性率呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，具體見表2。

表2 Survivin基因、p53基因和PTEN表達(dá)之間的相關(guān)性

表3 胃癌各病理指標(biāo)和Survivin基因、PTEN基因、p53 基因陽性表達(dá)之間的關(guān)系[n(%)]

注：與中、高分化胃癌相比，aP<0.05；與浸潤至漿膜層外胃癌相比，bP<0.05；與無臟器轉(zhuǎn)移胃癌相比，cP<0.05；與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌相比，dP<0.05。

2.3 胃癌各病理指標(biāo)和Survivin基因、PTEN基因、p53基因陽性表達(dá)之間的關(guān)系 統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，3種基因在胃癌不同病理指標(biāo)中的陽性表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，具體見表3。

3 討 論

已有研究表明，腫瘤細(xì)胞不僅存在增殖及分化方面的異常，還具有凋亡的異常，并且在細(xì)胞凋亡抑制方面，和惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展之間具有較為密切的關(guān)系。Survivin基因?qū)儆谝环N凋亡抑制基因，在人體的生理狀態(tài)之下，通過細(xì)胞凋亡的發(fā)生，對(duì)體內(nèi)衰老的及異常的細(xì)胞進(jìn)行清除，對(duì)人體內(nèi)的組織動(dòng)態(tài)平衡的保持具有積極的作用。研究表明在多步驟的腫瘤發(fā)生早期，多種因素均具有凋亡抑制作用，這樣在促進(jìn)細(xì)胞繼續(xù)增殖方面就產(chǎn)生了有利的條件，同時(shí)有利于異常基因進(jìn)一步積聚和表達(dá)，使細(xì)胞更加趨于惡性轉(zhuǎn)化，對(duì)腫瘤發(fā)生和發(fā)展產(chǎn)生了積極的作用[3-6]。本研究中Survivin基因在胃癌中的陽性表達(dá)率為75.00%，在不典型增生胃黏膜中陽性表達(dá)率為40.00%，而在正常的胃黏膜中則不表達(dá)，結(jié)果提示Survivin基因表達(dá)在胃癌惡性轉(zhuǎn)化早期及進(jìn)展期較為活躍，Survivin基因和胃癌發(fā)生、發(fā)展具有密切的關(guān)系，Survivin基因在胃癌組織和不典型增生癌前病變中異常的表達(dá)抑制了異常突變細(xì)胞凋亡的發(fā)生，擾亂細(xì)胞的生長及凋亡，從而促使了細(xì)胞逃離生長監(jiān)控，加劇了腫瘤細(xì)胞的生長。PTEN基因是一種抑癌基因，關(guān)于PTEN蛋白的表達(dá)有較多的研究，結(jié)果認(rèn)為PTEN等位基因失活可通過PTEN蛋白的表達(dá)丟失來反映，可以用免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行相應(yīng)的評(píng)估。

p53基因蛋白在17號(hào)染色體的短臂上，蛋白產(chǎn)物定位在細(xì)胞核中，屬于一種含有393個(gè)氨基酸的核蛋白，野生型p53的作用是抑制細(xì)胞的過度增殖，同時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡，協(xié)調(diào)細(xì)胞凋亡和增殖的速度，同時(shí)具有防止細(xì)胞異常蓄積及惡性生長的作用，p53基因突變之后，其表達(dá)就失去了抑制細(xì)胞增殖的作用，從而導(dǎo)致細(xì)胞增殖過度。p53基因是迄今為止發(fā)現(xiàn)的和胃癌關(guān)系最為密切的一種腫瘤抑制基因。p53缺失或者發(fā)生突變已經(jīng)被證實(shí)和胃癌發(fā)生、發(fā)展具有密切關(guān)系[7-12]。本研究結(jié)果顯示，胃癌組織中的Survivin基因、p53基因陽性率高于其他兩組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Survivin基因的陽性表達(dá)和p53陽性關(guān)系密切(P<0.05)，呈正相關(guān)，和PTEN陰性率呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，3種基因在胃癌不同病理指標(biāo)中的陽性表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。研究結(jié)果顯示，胃癌中PTEN和突變型p53的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。胃癌發(fā)生是一個(gè)關(guān)于多種癌基因激活及抑癌基因失活過程的協(xié)調(diào)作用，PTEN與p53基因在胃癌組織中表達(dá)關(guān)系說明兩者對(duì)胃癌發(fā)生、發(fā)展具有協(xié)同的作用。本研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)胃癌組織中Survivin基因表達(dá)和PTEN基因表達(dá)具有負(fù)相關(guān)的關(guān)系，由此可見兩者在胃癌發(fā)病過程中也具有協(xié)同的作用。

綜上所述，Survivin、PTEN 和p53基因異常表達(dá)和胃癌發(fā)生有密切的關(guān)系，其中PTEN與p53基因是判斷胃癌生物學(xué)行為的重要指標(biāo)，Survivin、PTEN、p53基因在胃癌發(fā)生及發(fā)展中有著相互協(xié)同的作用。

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Clinical significance of PTEN,p53 and Survivin expression in gastric carcinoma

ZHANGHai-peng1,LIANGPeng-feng2,MIAOFeng3

(1.DepartmentofSurgery,ShaanxiProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicine,Xi′an,Shaanxi710003,China;2.DepartmentofGeneralSurgery,WeinanMunicipalCentralHospital,Weinan,Shaanxi714000,China;3.DepartmentofNeonatalSurgery,Xi′anMunicipalChildren′sHospital,Xi′an,Shaanxi710056,China)

Objective To investigate the expression and clinical significance of PTEN,p53 and Survivin in gastric carcinoma tissue.Methods The gastric carcinoma samples in 60 cases of gastric carcinoma in the 2010 and 2013 in Shaanxi Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine were selected as the group A,at the same period 60 samples of normal gastric mucosa in anastomosis stoma incisal edge in this hospital as the group B and 65 paraffin samples of atypical dysplasia gastric mucosa as the group C.The immunohistochemical streptavidin-biotin method was adopted to detect the expression of Survivin,PTEN and p53 gene in these three groups.Results The positive rate of Survivin and p53 gene in the gastric cancer tissue were higher than the that in the other two groups,the difference was statistically significant(P<0.05);the positive expression of Survivin gene was closely related with the p53 positive(P<0.05),showing the positive correlation,and the negative correlated with PTEN negative rate (P<0.05);the statistic results showed that the positive expression of three genes had statistical difference among different pathological indicators of gastric cancer (P<0.05).Conclusion The abnormal expression of Survivin,PTEN and p53 gene has the close relation with gastric cancer occurrence,in which PTEN and p53 gene are the important indicator for judging the biological behavior of gastric cancer,Survivin,PTEN and p53 gene have a mutual synergistic effect in the occurrence and development of gastric carcinoma.

Survivin gene; PTEN gene; p53 gene; gastric carcinoma

張海鵬,男,本科，主治醫(yī)師，主要從事肝膽胃腸方面的臨床工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.18.020

A

1672-9455(2015)18-2700-03

2015-04-15

2015-05-07)