SY SMEX X T-4000i血液分析儀應用性能評價

夏紅安，劉穎，魯小龍

廣安市人民醫(yī)院 檢驗科，四川 廣安638001

SY SMEX X T-4000i血液分析儀應用性能評價

夏紅安，劉穎，魯小龍

廣安市人民醫(yī)院 檢驗科，四川 廣安638001

目的 對SYSMEX XT-4000i血液分析儀的性能進行驗證及評價。方法 使用臨床常規(guī)血液、體液標本和儀器配套質(zhì)控物對XT-4000i的本底計數(shù)、攜帶污染率、精密度（批內(nèi)、日間）、線性范圍、準確度，儀器間的比對等分析性能進行驗證和評價。結果 XT-4000i測定的本底計數(shù)均低于廠商設計規(guī)定的要求；XT-4000i檢測血液標本白細胞、紅細胞、血紅蛋白含量、血小板4項，其攜帶污染率低，精密度、線性范圍、準確度均良好，其白細胞分類計數(shù)與顯微鏡分類具有相關性；XT-4000i 檢測體液標本白細胞、紅細胞計數(shù)及白細胞分類與手工法檢測結果具有較高的相關性。結論 XT-4000i血液分析儀性能良好，可以較好地滿足臨床常規(guī)血液標本及體液標本的檢測要求。

血液分析儀；性能評價；體液細胞檢測；質(zhì)量控制

臨床血液學檢驗是臨床和實驗室最常規(guī)、最基礎的一項檢驗項目，全血細胞分析的準確與否對臨床醫(yī)生判斷疾病及治療非常重要。SYSMEX XT-4000i血液分析儀（下稱XT-4000i）是日本SYSMEX公司生產(chǎn)的一臺性能較高、自動化程度較強的五分類血液分析儀，同時該儀器增加了體液細胞的分析模式，使體液常規(guī)的細胞檢測成為可能，為了驗證其可靠性，本研究依照國家相關行業(yè)文件對儀器進行分析評價，現(xiàn)報告如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 測定樣品

定值樣本采用SYSMEX公司配套的樣品，日間精密度測試樣品采用公司配套的高值和低值室內(nèi)質(zhì)控品，每日開機后先使用配套質(zhì)控物進行室內(nèi)質(zhì)控，室內(nèi)質(zhì)控在控后，測定樣本。攜帶污染、批內(nèi)精密度、線性范圍、準確度和比對試驗均使用患者EDTA-K2抗凝的新鮮靜脈全血（BD真空采血管采集靜脈血3 mL，采血后迅速輕輕顛倒混勻6～8次，2 h內(nèi)完成檢測），體液標本準確度使用30例體液標本（腦脊液10例、腹水10例、胸水10例，標本無凝塊、不粘稠）。

1.1.2 儀器與試劑

XT-4000i及其原裝配套試劑、校準物和質(zhì)控物；經(jīng)校準后符合要求的XE-2100全自動血細胞分析儀及配套試劑；OLYMPUS CX21顯微鏡；瑞氏染液按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第3版）[1]要求配制。

2 方法

2.1 本底檢測

每次開機后，查看儀器的本底檢測結果。

2.2 攜帶污染率（CR）實驗[2]

分別針對WBC、 RBC、HGB、PLT4個項目進行檢測，按CLSI EP102A文件要求，在儀器穩(wěn)定狀態(tài)下，取1份高值樣本連續(xù)測定3次，所得檢測值依次為H1、H2、H3，接著取1份低值樣本連續(xù)測定3次，所得檢測值依次為L1、L2、L3。按公式計算：CR =|（L1-L3）|/（H3-L3）×100%。

2.3 精密度分析[2]

2.3.1 批內(nèi)精密度

取正常濃度水平樣本和醫(yī)學決定水平樣本（低值）兩個水平的樣本，按常規(guī)方法在儀器上連續(xù)檢測20次，計算20次的算術平均值和標準差，計算變異系數(shù)即為批內(nèi)精密度。

2.3.2 日間精密度

使用高值、中值和低值的室內(nèi)質(zhì)控品，每日至少檢測1次，連續(xù)檢測20天，計算在控數(shù)據(jù)的變異系數(shù)即為日間精密度。

2.4 準確度分析[2]

2.4.1 全血細胞計數(shù)（CBC）

實驗材料為SYSMEX公司提供的定值標準物質(zhì)（SCS-1000），連續(xù)測定4次后取均值，計算相對偏差。

2.4.2 白細胞分類

選取30例非血液科、非腫瘤科住院患者新鮮抗凝全血標本，應用XT-4000i對每份標本重復檢測2次，取五分類均值；顯微鏡分類[1]，每份樣本推血片2張，由2人選擇血片體尾之間區(qū)域細胞分布均勻處使用油鏡，各計數(shù)200個白細胞，分別取其平均值，與XT-4000i五分類均值結果進行相關性比對。

2.5 線性范圍

選取1份接近預期上限的高值全血樣本，用同源血小板血漿按100%、80%、60%、40%、20%比例依次稀釋，每個稀釋度樣本分別重復測定3次，計算測定結果的均值，將實測值與理論值作比較（偏差＜10%），驗證線性范圍[3]。

2.6 比對實驗[2]

以校準后符合要求的XE-2100為參考儀器，XT-4000i 和XE-2100分別檢測涵蓋各醫(yī)學決定水平的新鮮抗凝全血樣本共30例，樣本均在2 h內(nèi)完成檢測。比較WBC、RBC、HGB、PLT，對每一項參數(shù)確定其相關系數(shù)和線性回歸方程，相關性檢驗應用配對t檢驗，并且計算P值。

2.7 體液標本準確度分析

2.7.1 XT-4000i計數(shù)與分類

30例體液標本（腦脊液10例，腹水10例，胸水10例，標本無凝塊，不粘稠），每例標本連續(xù)測定2次后取均值。

2.7.2 手工計數(shù)與分類

檢測方法嚴格按照第3版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》，采用標準的改良牛鮑計數(shù)板在顯微鏡下計數(shù)體液標本的紅、白細胞，透明或微渾的標本直接沖池計數(shù)，渾濁的標本根據(jù)情況用生理鹽水稀釋后計數(shù)RBC；WBC用0.2%冰醋酸稀釋后計數(shù)，所有細胞均計上下10個大方格總數(shù)。所有標本在1 h內(nèi)與XT-4000i同時檢測。

3 統(tǒng)計學分析與結果

運用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

3.1 本底計數(shù)

XT-4000i本底檢測結果顯示每次本底檢測計數(shù)均達到廠商設計規(guī)定的要求。

3.2 攜帶污染率（CR）實驗

WBC、RBC、HGB和PLT的CR分別為：0.1%、0.31%、0.59%和0.18%，均遠低于判定標準，滿足衛(wèi)生部臨檢中心要求的標準[3]，全部合格，見表1。

表1 XT-4000i全血細胞分析儀攜帶污染率的測定結果

3.3 精密度分析

3.3.1 批內(nèi)精密度

批內(nèi)精密度檢測結果見表2。對正常濃度水平樣本檢測各項目的批內(nèi)精密度均在允許范圍內(nèi)，符合行業(yè)標準。對醫(yī)學決定水平樣本檢測各項目的批內(nèi)精密度也均符合行業(yè)標準，見表3。

表2 XT-4000i對正常濃度水平樣本進行檢測的批內(nèi)精密度結果

表3 XT-4000i對醫(yī)學決定水平（低值）樣本進行檢測的批內(nèi)精密度結果

3.3.2 日間CV

對高、中和低值質(zhì)控物檢測各項目的日間精密度均符合衛(wèi)生行業(yè)標準，見表4。

表4 對高、中和低值質(zhì)控物進行檢測的日間精密度結果

3.4 準確度分析

3.4.1 全血細胞計數(shù)

XT-4000i五項主要檢測指標其相對偏差均符合WS/ T406-2012衛(wèi)生行業(yè)標準，見表5。

表5 XT-4000i對CBC檢測的準確度結果

3.4.2 白細胞分類

以顯微鏡法為金標準，XT-4000i測定的白細胞分類比值與鏡檢法比較，得出各自的回歸方程和相關系數(shù)。其中，中性粒細胞（N）、淋巴細胞(L)、單核細胞（M）、嗜酸性粒細胞（E）和嗜堿性粒細胞（B）的相關系數(shù)分別為0.993、0.987、0.914、0.898和0.812。

3.5 線性范圍

WBC、RBC、HGB和PLT線性范圍評價結果見表6。行業(yè)標準：a≤1±0.05、r≥0.975，均符合CLSI H26-A2行業(yè)標準。

表6 XT-4000i的線性范圍評價結果

3.6 血液標本比對實驗

以XE-2100系統(tǒng)作為參考儀器，XT4000檢測結果與其進行相關與回歸分析，得出兩臺儀器各參數(shù)的線性回歸方程和相關系數(shù)，見表7。各項目的相關系數(shù)r均＞0.99，說明回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠。

表7 血液標本比對試驗結果

3.7 體液標本比對實驗

以手工法檢測結果為標準，根據(jù)計數(shù)值將RBC（×106/L）分為3個濃度水平，I：100～1000；II：1001～100000；III：>100000。為便于統(tǒng)計分析未收集RBC＜100×106/L的標本。WBC（×106/L）分為3個水平，I：1～50；II：51～100；III：>100。其計數(shù)分析結果見表8。

表8 體液標本比對試驗結果

4 討論

選擇性能良好的檢測系統(tǒng)或方法是保證患者檢驗結果可靠性的重要前提，檢測系統(tǒng)或方法的分析性能評價是臨床實驗室質(zhì)量管理的重要內(nèi)容。ISO15189《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力的專用要求》（下稱ISO15189要求）參加認可的實驗室，在開展某一檢測項目前，需提供并保留相關的方法學驗證實驗數(shù)據(jù)；美國頒布的臨床實驗室修正法規(guī)的最終法規(guī)（CLIA′88 Final Rule）明確要求：每個實驗室在引入未作修改的、FDA認可或批準的檢測系統(tǒng)時，在報告患者檢測結果前，必須作性能指標的確認。本實驗室依照國家行業(yè)標準中關于血液分析儀的性能要求及驗證方法的明確規(guī)定，參考ISO 15189要求并結合儀器實際性能，探討并制定了針對Sysmex XT-4000i血液分析儀性能驗證方案，供同行參考。

檢測系統(tǒng)最主要性能為精密度、準確度、線性報告范圍和攜帶污染率等。對XT-4000i評價結果顯示，攜帶污染率均＜1.00%的標準要求；批內(nèi)精密度和日間精密度變異系數(shù)（CV%）在國家衛(wèi)生行業(yè)標準規(guī)定范圍內(nèi)＜CLIA′88指標規(guī)定；正確度結果顯示各偏差均＜1/2 CLIA′88允許總誤差；線性范圍內(nèi)WBC、RBC、HGB、PLT測定值與理論值相關系數(shù)均＞0.999，線性及相關良好；在血液標本比對分析中，XT-4000i與XE-2100相比較，主要參數(shù)的相關系數(shù)均＞0.99，相關性良好。XT-4000i對白細胞分類檢測與鏡檢法比較，N、L符合率最高，其次是M、E，B相對較差。分析其原因：① 不同種類白細胞在外周血出現(xiàn)比例差異較大，B最少（參考值為0%～1%），數(shù)據(jù)變異較大；② 人工鏡檢法計數(shù)量遠低于儀器計數(shù)量，且單核細胞的形態(tài)變異較多，儀器不易分辨[5]，儀器計數(shù)時還會出現(xiàn)單核細胞與中性桿狀核粒細胞相混淆現(xiàn)象。

XT-4000i帶有體液模式，可直接對各種體液標本進行檢測，實現(xiàn)了體液標本的自動化。利用XT-4000i檢測體液標本中的細胞，與手工計數(shù)相比具有較好的相關性，但是對于細胞數(shù)較少的標本，兩種方法的結果差異較大。分析其原因：① 細胞分布不均，所計數(shù)的標本用量較少；② 儀器本身檢測范圍的基數(shù)設計可能不適用于細胞數(shù)太少的標本。XT-4000i設定的WBC檢測限為0.001×109/L～99.999×109/L，對應手工法的檢測限為1×106/ L～99999×106/L，故WBC本底值為1×106/L，儀器對RBC設定的檢測參數(shù)低限為0.001×1012/L，但是研究參數(shù)低限為0.0001×1012/L，對應手工檢測低限為100×106/L。故建議低細胞數(shù)標本應手工鏡檢。XT-4000i對體液細胞的檢測有很高的應用價值,但是尚不能完全代替手工計數(shù)，兩者應相互結合，以便對臨床提供更準確的參考信息。

總之，XT-4000i具有較高的臨床應用價值[6-7]，其攜帶污染率低、精密度、準確度、線性及可比性良好，能滿足臨床實驗室常規(guī)血液標本的檢測，其對白細胞較多的體液標本可部分代替人工鏡檢進行計數(shù)及分類。對于血液五分類結果可能會受到患者本身細胞狀態(tài)影響，需結合儀器報警及人工顯微鏡分類后再綜合評估。

[1] 葉應嫵,王毓三,申子渝.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006.

[2] WS/T406-2012,臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量要求[S].

[3] CLSI.alidation.Verification,and Quality of Automated Hematology. lyzers.CLSI document H26-A2[S]. Wayne,Pa.:Clinical and Laboratory Standards Insyitute.2010.

[4] YY/T0653-2008,血液分析儀[S].

[5] Amundsen EK, Henriksson CE, Holthe MR, Urdal P. Is the blood basophil count sufficiently precise, accurate, and specific?: three automated hematology instruments and flow cytometry compared[J]. Am J Clin Pathol. 2012 Jan;137(1):86-92.

[6] 白雪.X T-400i多功能全自動細胞分析儀在體液細胞檢測中與手工法的應用比較[J].中國醫(yī)療設備,2012,27(1):75-76.

[7] 孫穎.多臺全自動血細胞分析儀測試結果比對及相關性分析[J].基層醫(yī)學論壇,2012,(1):86-87.

Application Performance Evaluation of SYSMEX XT-4000i Hematology Analyzer

XIA Hong-an, LIU Ying, LU Xiao-long
Clinical laboratory, The People’s Hospital Guang’an City, Guang’an Si chuan 638001, China

Objective To test and evaluate the performance of SYSMEX XT-4000i hematology analyzer. Methods Clinical blood samples, body fluid samples and quality control materials were used to test and evaluate the background counting, contamination rate, precision (within-run precision, within-day precision), linear range, accuracy, and the contrast between XT-4000i machines. Results The background counting tested by XT-4000i was lower than the specified requirements designed by the manufacturer. Using the XT-4000i to test the WBC, RBC, HGB and PLT has advantages of low contamination rate, and high precision, linear range and accuracy, as well as strong correlation between differential leukocyte counting and microscope classification. The results of testing the WBC, RBC and differential leukocyte manual counting by XT-4000i are highly related. Conclusion The XT-4000i hematology analyzer has good performance to meet the requirements of clinical routine detections of blood and body fluid samples.

hematology analyzer; performance assessment; body fl uid detection; quality control

R197.39；TH776

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2015.01.037

1674-1633(2015)01-0114-04

2014-08-06

作者郵箱：xiahongan@126.com