黃成名 程軍勇 鄭莉 張海玲 蘇彩晴 付高峰
摘 要: 建立氣相色譜法測定獼猴桃和土壤中百菌清殘留的方法,方法的檢出限為0005 mg·kg-1,通過對百菌清在獼猴桃和土壤中降解動態(tài)研究,表明百菌清在獼猴桃和土壤中的降解半衰期為574 d和776 d,施藥后第35 d,獼猴桃中百菌清未檢出,土壤中百菌清殘留量為0012 mg·kg-1,推薦百菌清在獼猴桃上使用的安全間隔期為35 d。
關鍵詞: 百菌清;獼猴桃;土壤;安全間隔期
中圖分類號:S482.2+6;S663.4 文獻標識碼:A 文章編號:1004-3020(2015)05-0027-03
在農(nóng)藥、肥料使用上對時間、數(shù)量上把握不準,導致獼猴桃品質差,商品價值低[1,2]。百菌清是深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司推出的一種高效低毒廣譜的殺菌劑,可用于防治果樹、蔬菜等多種病害。利用百菌清防治獼猴桃的病害,對于提高獼猴桃產(chǎn)量和品質具有重要意義。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
試驗材料為18 a生‘武植三號和‘魁蜜。試驗樹樹勢基本一致,坐果情況相近。供試藥劑為75%百菌清可濕性粉劑(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司提供)。儀器設備主要有Agilent6890N氣相色譜儀(美國Agilent 公司,微電子捕獲檢測器(μ-ECD)),配化學工作站和7683B自動進樣器和DB-1701毛細管色譜柱;旋轉蒸發(fā)儀(瑞士 BUCHI公司);渦流混合器、電子天平、精密移液槍、氮吹儀、固相萃取柱(氟羅里硅土柱,Agilent,6 mL/500 mg);試劑主要有百菌清標準品(純度98%,)色譜純乙腈、色譜純正己烷、色譜純丙酮,淋洗液:正己烷∶丙酮(9∶1,V/V)。
1.2 試驗方法
1.2.1 取樣方法
75%百菌清可濕性粉劑在獼猴桃中的消解動態(tài)試驗,試驗小區(qū)設施藥區(qū)和不施藥區(qū)(空白對照)處理,每處理3個小區(qū),每個小區(qū)面積不少于60 m2,施藥劑量為推薦劑量的1.5倍(332 g·hm-2),兌水20 L,施藥時間:病害發(fā)生初期(現(xiàn)蕾期)噴霧施藥。75%百菌清可濕性粉劑在土壤中的消解動態(tài)試驗取未種植的空地(20~30 m2),去除土表附著物,按消解試驗相同濃度以332 g·hm-2劑量均勻噴霧(使土表濕透),噴藥后0(2 h),1,3,7,14,21,28,35,45 d分別采樣。分別按時間采集獼猴桃和土壤樣品。每小區(qū)按對角線法隨機采集獼猴桃樣品不少于1 kg(8~10個);土壤鉆取0~10 cm土層,每小區(qū)不少于10個點,采樣量不少于05 kg。寫好標簽和采樣日期,貯存在-20 ℃冰箱中保存。
1.2.2 色譜條件
色譜柱:DB-1701毛細管柱30 m×032 mm×025 μm;色譜柱溫度:160 ℃(保持4 min)15 ℃/min250 ℃(保持15 min);ECD檢測器溫度:290 ℃;進樣口溫度:240 ℃;載氣高純氮(純度9999%):20 mL·min-1;尾吹氣(高純氮):30 mL·min-1;進樣量:10 μL。
1.2.3 樣品處理方法
稱取獼猴桃樣品250 g,土壤樣品100 g準確加入50 mL乙腈溶液,獼猴桃樣品高速均質2 min,土壤樣品超聲30 min,靜置15 min, 準確吸取乙腈層10 mL于圓底燒瓶中,50 ℃水浴旋轉蒸發(fā)干,然后加入1 mL淋洗液溶解,待凈化。
用5 mL正己烷預洗,當溶劑液面流至吸附填料表面時,立即加入樣品提取液,用10 mL離心管收集洗脫液,用8 mL正己烷∶丙酮(9∶1,V/V)分兩次淋洗固相萃取柱,合并收集洗脫液,用氮吹儀40 ℃下吹干,用正己烷定容至20 mL,供氣相色譜儀檢測[3]。
1.2.4 標準曲線的制作
將1000 mg·L-1的百菌清標準溶液分別用正己烷分別稀釋配得0005,001,002,010,050,100 mg·L-1系列標準溶液,在1.2.2氣相色譜條件下進行測定,百菌清標準品濃度在0005~10 mg·L-1范圍成線性,線性方程為y=310 8019 x-2 1416,R2= 0992 1,其中y為百菌清相應的峰面積,x為百菌清標準品溶液濃度(mg·L-1)。
1.2.5 最小檢出量
在上述條件下,百菌清的最小檢出量為50×10-12 g。
1.2.6 最低檢測濃度
在上述色譜條件和分析方法百菌清獼猴桃、土壤的最低檢出濃度為0005 mg·kg-1。
1.2.7 相對保留時間
上述色譜條件下,百菌清保留時間約為514 min。
2 結果與分析
2.1 獼猴桃和土壤色譜測定結果
在1.2.2色譜條件下,百菌清標準品(005 mg·L-1)、獼猴桃空白樣品(CK)、獼猴桃樣品(施藥后第5 d)、土壤空白樣品(CK)、土壤樣品(施藥后第5 d)的色譜圖,分別見圖1~圖5。
2.2 百菌清在獼猴桃和土壤中的降解動態(tài)
從試驗結果可知,百菌清在獼猴桃和土壤中的殘留量隨著時間的延長而降低,噴施百菌清的當天(施藥后2 h),獼猴桃中百菌清殘留量為3974 mg·kg-1,土壤中百菌清殘留量為0442 mg·kg-1。百菌清在獼猴桃和土壤中的半衰期,即百菌清藥物殘留量變成初始一半所用的時間,獼猴桃中為574 d,土壤中為776 d,噴施百菌清后第35 d,獼猴桃中百菌清殘留量低于檢測限(0002 mg·kg-1),表示已全部消解無殘留。土壤中百菌清殘留量為0012 mg·kg-1,消解率為97.3%,僅有微量的殘留。獼猴桃中百菌清殘留量與消解率相關系數(shù)為0984 4,土壤中百菌清殘留量與消解率相關系數(shù)為0963 5,均呈較強的正相關關系。
3 結論與討論
(1)對不同的試樣前處理操作進行對比試驗,對各種提取凈化方法,建立了采用氣相色譜法測定獼猴桃和土壤中百菌清的檢測方法,結果表明,該方法提取效率、凈化效果均滿足方法回收率和儀器檢測的要求[4]。
(2)通過對百菌清在獼猴桃和土壤中降解動態(tài)研究結果表明,百菌清在獼猴桃中的半衰期為574 d,百菌清在土壤中的半衰期為7.76 d,噴施百菌清后第35 d,獼猴桃中百菌清殘留量低于檢測限0.005(mg·kg-1),表示消解無殘留,為丘陵崗地安全有效噴施殺菌劑提供理論參考。
(3)結合百菌清在獼猴桃中的降解動態(tài)檢測結果,為保障獼猴桃食用安全和合理用藥,在正常劑量用藥下,推薦35 d為百菌清在獼猴桃上使用的安全間隔期。
(4)從三峽植物園的試驗來看,獼猴桃果實和土壤百菌清殘留量是較低的,在安全范圍內。下一階段,將擴大百菌清的使用區(qū)域,提高檢測水平,降低藥物殘留,確保消費安全仍是亟待解決的重要問題,以提高獼猴桃產(chǎn)品的市場份額。
參 考 文 獻
[1]謝志兵,魯旭東.CPPU對獼猴桃果實生長的影響[J].農(nóng)業(yè)與技術,2003,(3):6365.
[2] 鐘彩虹,李大衛(wèi),龔俊杰,等.湖北省獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展調查與研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學,2012,(12):24962501.
[3] 金雁,姚家彪,付海濱,等.氣相色譜法快速測定蔬菜、水果中多種有機磷農(nóng)藥殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2007,(7):11531154.
[4] 梅文泉,佴注,黎其萬,等.蔬菜中多種有機磷農(nóng)藥殘留量的氣相色譜測定[J].云南農(nóng)業(yè)大學學報,2005,(1):107110.
(責任編輯:鄭京津)