基質(zhì)金屬蛋白酶在涎腺良、惡性多形腺瘤中的表達(dá)

唐瑞平，伍愛(ài)民，鄭本強(qiáng)，李 敬，鄧 凌，何 紅 (.荊楚理工學(xué)院醫(yī)學(xué)院，湖北 荊門 448000;.湖北省荊門市第二人民醫(yī)院口腔醫(yī)院，湖北 荊門 448000;.湖北省荊門市第二人民醫(yī)院口腔科，湖北 荊門 448000)

在涎腺上皮性腫瘤中多形腺瘤(pleomorphic adenoma，PA)是一種非常常見的腫瘤疾病，患者占比可以超過(guò)50%，在醫(yī)學(xué)界將該類疾病歸入良、惡性之間的腫瘤當(dāng)中，一旦病患患上此類疾病非常容易出現(xiàn)反復(fù)發(fā)作等情況。在治療效果不理想的情況下，超過(guò)90%的良性多形性腺瘤癌會(huì)惡化為惡性多形性腺瘤，此類疾病病患在涎腺惡性腫瘤中的人數(shù)占比超過(guò)15%?；|(zhì)金屬蛋白酶－2(matrix metalloproteinases－2，MMP－2)是通過(guò)腫瘤細(xì)胞中的無(wú)活性的酶原進(jìn)行分泌產(chǎn)生的一種明膠酶，可以對(duì)病患機(jī)體中的彈性蛋白、纖連蛋白等進(jìn)行分解，使其在明膠中進(jìn)行充分溶解。組織抑制劑(tissue inhibitors of metalloproteinase，TIMPs)聯(lián)合基質(zhì)金屬蛋白酶可以實(shí)現(xiàn)對(duì)病患體內(nèi)的細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)行合成、降解的平衡效果。細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN) 通 過(guò) 刺 激MMPs 的生成而促進(jìn)腫瘤的侵襲，是免疫球蛋白的一種。本次實(shí)驗(yàn)將選取2012 年1 月～2013 年12 月期間來(lái)我院接受治療的45 例患有多形性腺瘤的病患和42 例惡性多形性腺瘤病患，并對(duì)人體在正常情況下的涎腺組織，惡性的多形性腺瘤以及涎腺多形性腺瘤的相關(guān)EMMPRIN、TIMP－2 以及MMP－2 進(jìn)行比較分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:選取2012 年1 月～2013 年12 月期間來(lái)我院接受治療的45 例患有多形性腺瘤的病患和42 例惡性多形性腺瘤病患，同時(shí)選取同一時(shí)期在我院接受治療的66 例正常涎腺切除術(shù)的病患進(jìn)行比較。參與本次實(shí)驗(yàn)的所有病患其在治療前均未進(jìn)行過(guò)化療和放療等相關(guān)的腫瘤治療。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學(xué)SP 法:EMMPRIN、TIMP－2、MMP－2 以及MT1－MMP 制劑均選取有美國(guó)Santa Cruz 企業(yè)生產(chǎn)的制劑進(jìn)行，SP 試劑選取有博士德生物公司生產(chǎn)的制劑進(jìn)行。對(duì)病患的免疫組織進(jìn)行染色處理，將標(biāo)本進(jìn)行封片處理。

1.2.2 結(jié)果判定:一般在細(xì)胞質(zhì)上可檢測(cè)到TIMP－2 和MMP－2，在細(xì)胞膜上可以檢測(cè)到EMMPRIN 和MT1－MMP。通過(guò)對(duì)免疫組織細(xì)胞進(jìn)行染色，若其出現(xiàn)均勻的棕黃色顆粒，且被上色的顆粒強(qiáng)度要高于非特異性的染色體，則可認(rèn)定為陽(yáng)性。在進(jìn)行陽(yáng)性的著色的染色體選擇時(shí)，需要注意選擇定位好、染色效果好且結(jié)構(gòu)鮮明的顆粒進(jìn)行對(duì)比分析。在每一張切片中選取5 個(gè)隨機(jī)的區(qū)域進(jìn)行觀察，之后對(duì)其中的陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)進(jìn)行記錄，計(jì)算出其陽(yáng)性率。具體計(jì)算標(biāo)準(zhǔn):0 分:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)無(wú)，著色強(qiáng)度無(wú)色;1 分:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤10%，著色強(qiáng)度淡黃色;2 分:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)11%～50%，著色強(qiáng)度棕黃色;3 分:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)51%～75%，著色強(qiáng)度棕褐色;4 分:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞75%。當(dāng)數(shù)量積分×著色強(qiáng)度積分＞3 分即為免疫反應(yīng)陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS13.0 軟件對(duì)本次使用的統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)量資料采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，P ＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

一般MMP－2 主要存在于多形性腺瘤腫瘤細(xì)胞質(zhì)當(dāng)中，在正常的細(xì)胞中含量較少，TIMP－2 則主要存在于正常的涎腺上皮細(xì)胞和多形性腺瘤細(xì)胞當(dāng)中，MT1－MMP 主要存在于腫瘤細(xì)胞膜中，EMMPRIN 主要也存在于腫瘤細(xì)胞膜中。通過(guò)對(duì)比惡性多形性腺瘤患者、良性多形性性腺瘤患者以及正常的涎腺組織者進(jìn)行TIMP－2、MMP－2 和EMMPRIN 的相關(guān)比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示MMP－2 在三類患者中均有升高的跡象，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05);TIMP－2 在正常涎腺患者中要低于患有涎腺多形性腺瘤的病患，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05);EMMPRIN 在正常涎腺病患中要低于患有多形性涎腺腺瘤的病患，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05);MT1－MMP 在三類患者中均出現(xiàn)上升的趨勢(shì)，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)，具體情況見表2。

表2 MMP－2、TIMP－2、MT1－MMP 及EMMPRIN 在人正常涎腺組織和涎腺良、惡性多形性腺瘤中的陽(yáng)性表達(dá)情況(例)

3 討論

若病患的涎腺腫瘤細(xì)胞基質(zhì)和基底膜需要得到有效的降解，起到關(guān)鍵作用的為MMP－2，而TIMPs 可以與MMPs 進(jìn)行相互的促進(jìn)，對(duì)基質(zhì)的降低起到控制其速度的作用，使腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)轉(zhuǎn)移或侵潤(rùn)等。但在此過(guò)程當(dāng)中，MMPs 在發(fā)揮作用時(shí)還會(huì)受到其他因素的影響，如EMMPRIN 等，這些因子相互作用，共同控制著整個(gè)過(guò)程。MT1－MMP 可以對(duì)大分子的物質(zhì)進(jìn)行直接的降解，同時(shí)還對(duì)纖維蛋白等均可達(dá)到降解的作用。通常情況下MMP－2 主要存在于多形性腺瘤腫瘤細(xì)胞質(zhì)當(dāng)中，在正常的細(xì)胞中含量較少，TIMP－2 則主要存在于正常的涎腺上皮細(xì)胞和多形性腺瘤細(xì)胞當(dāng)中，MT1－MMP 主要存在于腫瘤細(xì)胞膜中，EMMPRIN 主要也存在于腫瘤細(xì)胞膜中，在分析該類疾病的侵襲性時(shí)主要通過(guò)研究分析EMMPRIN、TIMP－2、MMP－2、MT1－MMP 的數(shù)值進(jìn)行判斷。在本次實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)對(duì)比45 例患有多形性腺瘤的病患、42 例惡性多形性腺瘤病患和66 例正常涎腺切除術(shù)的病患，發(fā)現(xiàn)MMP－2 在三類患者中均有升高的跡象;TIMP－2 在正常涎腺患者中要低于患有涎腺多形性腺瘤的病患;EMMPRIN 在正常涎腺病患中要低于患有多形性涎腺腺瘤的病患;MT1－MMP 在三類患者中均出現(xiàn)上升的趨勢(shì)。該結(jié)果表明，目前多形性腺瘤仍然是一種較難治療的疾病，其臨界在良性和惡性腫瘤當(dāng)中，通過(guò)觀察病患的EMMPRIN、TIMP－2、MMP－2、MT1－MMP 的數(shù)值可以對(duì)病患的涎腺良、惡性多形性腺瘤的相關(guān)情況進(jìn)行判斷，具有良好的表達(dá)效果，值得在實(shí)際臨床中進(jìn)行推廣。

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