ELISA法和TRUST法檢測梅毒結果比較

蘇麗霞

ELISA法和TRUST法檢測梅毒結果比較

蘇麗霞

目的 比較酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)檢測方法的敏感性和特異性, 評價其在臨床診斷中的應用價值。方法 應用ELISA和TRUST聯(lián)合檢測1913例血清標本, 包括手術前和輸血前篩查的1715例以及門診內(nèi)鏡檢查前的198例血清標本, 可疑陽性結果采用梅毒螺旋體明膠凝集試驗(TPPA)確診。結果 共檢測1913例, 用TPPA法確診32例為陽性。用TRUST法檢出29例陽性, 其中26例確診陽性, 3例為假陽性, 敏感性為81.3%(26/32), 特異性為89.7%(26/29)。用ELISA法檢出33例陽性, 其中32例確診陽性, 1例為假陽性, 敏感性為100.0%(32/32),特異性為97.0%(32/33)。結論 ELISA法操作相對簡單, 結果判定可標準化, 特異性和敏感性好, 可作為梅毒抗體檢測較理想的方法, 適合大批量標本檢測。TRUST法可作為梅毒篩查方法之一, 配合ELISA法使用, 特別適合作為臨床觀察效果的治療指標。

梅毒螺旋體； 梅毒螺旋體特異性抗體明膠凝集試驗；酶聯(lián)免疫吸附試驗；梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗

梅毒是一種慢性性傳播疾病, 具有高度危險性。該病可累及全身各組織、器官的損害, 甚至死亡, 也可以呈多年潛伏狀態(tài)而無癥狀。梅毒螺旋體是引起人類梅毒的病原體, 梅毒患者是唯一傳染源, 傳染方式有母嬰垂直傳播、經(jīng)血傳播和性傳播。目前檢測梅毒的方法主要有病原學、血清學檢測,其中血清學檢測又有多種不同的方法, 一類是非梅毒螺旋體抗原血清試驗, 如TRUST；另一類是采用梅毒螺旋體抗原血清試驗, 如TPPA、ELISA等［1］。本文就兩種方法在梅毒檢測中的比較進行探討, 現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 本院2006年6月～2014年6月手術前和輸血前篩查的1715例以及門診內(nèi)鏡檢查前的198例血清標本,無性別年齡限制。

1.2 標本采集 采集以上所有標本, 用普通試管, 清晨空腹采集, 1 h內(nèi)分離血清, 嚴格避免溶血。

1.3 儀器和試劑 使用儀器為上?？迫A酶標儀和洗板機。TPPA試劑盒為日本富士瑞必歐株式會社提供；ELISA試劑盒由上海科華生物工程股份有限公司提供；TRUST試劑盒由上海榮盛生物工程有限公司提供。

1.4 方法 所有標本均使用TRUST和ELISA聯(lián)合檢測, 陽性結果采用TPPA法進行確認檢測, 具體操作及結果判定均按試劑說明書嚴格執(zhí)行。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩種方法檢測 1913例標本中, ELISA法陽性者33例,陽性率為1.73%；TRUST法陽性者29例, 陽性率為1.52%。經(jīng)χ2檢驗, 差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 ELISA法和TRUST法檢測結果比較(n, %)

2.2 可疑陽性標本檢測結果 可疑陽性結果共36例, 其中26例兩種方法均為陽性, 7例為ELISA法檢出陽性, 3例為TRUST法檢出陽性。36例陽性結果經(jīng)TPPA法檢測證實, ELISA法單獨檢出的7例陽性有1例為假陽性, TRUST法單獨檢出的3例陽性均為假陽性, 經(jīng)χ2檢驗, 三種檢測方法比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05), 但ELISA法靈敏度和特異性均明顯優(yōu)于TRUST法。見表2。

表2 36例可疑標本的三種方法比較(n, %)

3 討論

機體感染梅毒螺旋體后可產(chǎn)生特異性抗螺旋體抗體(TP-Ab)和非特異性抗體。TP-Ab是診斷梅毒螺旋體感染的依據(jù), TPPA法是將梅毒螺旋體Nichols株的精致菌體成分包被于明膠顆粒上, 此種致敏顆粒與被測標本中的抗TP抗體結合時可產(chǎn)生凝集反應, 此實驗為梅毒螺旋體抗體的確診試驗。由表1和表2結果可知, 共檢測1913例, 用TPPA法確診32例為陽性。用TRUST法檢出29例陽性, 其中26例確診陽性, 3例為假陽性, 敏感性為81.3%(26/32), 特異性為89.7%(26/29)。用ELISA法檢出33例陽性, 其中32例確診陽性, 1例為假陽性, 敏感性為100.0%(32/32), 特異性為97.0%(32/33)。

可疑標本經(jīng)確診后, ELISA準確率為97.0%, 與TPPA法高度吻合, 而TRUST則檢出假陽性率高。由于患者感染梅毒后非特異性的磷脂抗體出現(xiàn)晚于特異性螺旋體抗體, 而晚期梅毒及治療后梅毒非特異性抗體可能轉(zhuǎn)陰, 因此, TRUST可導致假陰性［2］。ELISA法則是利用基因重組過程合成抗原, 檢測血清中梅毒特異性抗體, 在梅毒各期均有較高敏感性, 能夠準確不漏檢及較高避免假陰性的出現(xiàn)。另據(jù)報道, TRUST在Ⅰ期、Ⅱ期梅毒的檢出率高達95%以上［3］, 而且TRUST法試劑價廉、操作方便快捷, 因此, ELISA法目前尚不能完全取代TRUST法, 而且TRUST法價廉快捷, 對Ⅰ期、Ⅱ期梅毒靈敏度也較好。因此實驗室可同時采用兩種方法進行梅毒的篩選, 可以相互補充且經(jīng)濟有效。

［1］ 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程.第3版.南京:東南大學出版社, 2006:647-650.

［2］ 尚桂芳, 聶冬梅, 楊立新.兩種梅毒檢測試劑敏感性及特異性比較中國輸血雜志, 2003, 16(6):333-334.

［3］ West B, walraven G, morison L, et al.Preformance of the rapid, plasma regain and rapid syphilis screening tests in the dragnosis of syphilis in the field conditions in rural Africa.Sex Transm Infect, 2002, 78(4):282-285.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.18.053

2014-12-29］

455000 河南省安陽市燈塔醫(yī)院檢驗科