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    TTNJ—16蔬菜農(nóng)藥殘留檢測儀使用及注意事項(xiàng)

    2015-04-27 16:04:46姚莉菊等
    長江蔬菜·技術(shù)版 2015年4期
    關(guān)鍵詞:顯色劑酯酶底物

    姚莉菊等

    特約欄目主持:萬勇

    高級(jí)工程師,武漢市農(nóng)科院農(nóng)業(yè)機(jī)械化科學(xué)研究所副所長,負(fù)責(zé)科研、科技管理工作。長期在農(nóng)業(yè)科技推廣一線從事新產(chǎn)品開發(fā)和高新技術(shù)的引進(jìn)、改進(jìn)工作。參與“七萬畝建設(shè)”相關(guān)技術(shù)規(guī)范的起草與制定;主持、完成《七萬畝設(shè)施蔬菜技術(shù)集成示范推廣》(農(nóng)機(jī)部分);長期從事“溫室內(nèi)環(huán)境智能控制系統(tǒng)”、“現(xiàn)代設(shè)施條件下水肥耦合與配方施放技術(shù)”的研究;致力于小型設(shè)施蔬菜機(jī)具開發(fā),擁有專利5項(xiàng)。

    農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全事關(guān)民眾消費(fèi)安全和社會(huì)穩(wěn)定。近年來,武漢市蔡甸區(qū)以區(qū)農(nóng)檢站為主體,不斷強(qiáng)化監(jiān)管措施,按照統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)為各街鄉(xiāng)鎮(zhèn)配備了TTNJ-16通道檢測儀器,以提高蔬菜農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,在使用過程中建議注意以下幾點(diǎn)。

    1 試劑配制及保存

    1.1 緩沖液

    取一包緩沖液,加入500 mL蒸餾水,溶解攪拌均勻后密閉,于避光、陰涼處保存。

    1.2 顯色劑

    取顯色劑一瓶,加入15 mL緩沖液溶解,4℃冰箱中保存。

    1.3 底物

    取底物一瓶,加入15 mL蒸餾水,4℃冰箱中保存。

    1.4 乙酰膽堿酯酶

    取乙酰膽堿酯酶一瓶,加入3 mL緩沖液溶解,4℃冰箱中保存。

    2 對(duì)照溶液測試

    2.1 自動(dòng)對(duì)照的設(shè)置

    在試管中加入2.5 mL緩沖液,再加入100 μL酶、100 μL顯色劑,搖勻后置于水浴鍋中,在恒溫37.5℃下放置15 min。15 min后再加入100 μL底物搖勻,立即倒入1 cm比色皿,放入儀器比色池中,按“對(duì)照”按鈕,儀器開始作對(duì)照,3 min后自動(dòng)對(duì)照完成。

    2.2 測定

    建議測定對(duì)照值在0.4~0.8,當(dāng)對(duì)照值在0.3~0.4時(shí)盡快使用本試劑盒,同時(shí)冷凍保存未使用完的乙酰膽堿酯酶液。當(dāng)排除溫度、檢測設(shè)備等其他因素后,已測定的對(duì)照值仍然<0.3,則應(yīng)停止使用該瓶乙酰膽堿酯酶液,重新配制一瓶乙酰膽堿酯酶液后,嘗試再次測定對(duì)照值,通常情況下僅更換乙酰膽堿酯酶液即可繼續(xù)正常使用本試劑盒。

    3 樣品處理

    3.1 取樣部位

    為了保證取樣具有代表性,葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部;果蔬從不同個(gè)體的表皮處取樣。樣品不可用水沖洗,剪成1 cm×1 cm的碎片,稱取樣品2 g,放入燒杯中。

    3.2 樣品處理

    在裝有樣品的燒杯中加入10 mL緩沖液,振蕩1~2 min后過濾,用移液槍提取2.5 mL過濾后的待測液于試管中,加入100 μL酶、100 μL顯色劑,搖勻。在37.5℃水浴恒溫鍋中放置15 min,放置時(shí)間與對(duì)照液放置時(shí)間一致。

    3.3 檢測

    15 min后再加入100 μL底物搖勻,此時(shí)檢測液開始顯色反應(yīng),應(yīng)立即倒入1 cm比色皿,放入儀器比色池中,按“測量”按鈕,3 min后儀器測量完成,顯示測量結(jié)果。當(dāng)樣品提取液對(duì)酶的抑制率小于50%時(shí),樣品為合格;當(dāng)≥50%時(shí),表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在,即樣品檢測結(jié)果為陽性。

    4 檢測結(jié)果的歸檔

    對(duì)檢測結(jié)果為超標(biāo)的樣品要重復(fù)檢測2次以上,以確保結(jié)果的可靠性。應(yīng)在檢測工作完成后將檢測結(jié)果粘貼在記錄本上,同時(shí)保存在檢測儀器內(nèi),便于存檔、備查等。

    5 檢測器皿的清洗

    檢測所用的比色皿,必須用洗滌液清洗,后用清水清洗干凈,再晾干。不要用洗潔精之類的清潔劑,以免影響測量,不可用堿液洗滌,也不能用硬布、毛刷刷洗。試管、燒杯、剪刀一定要干凈,操作過程中應(yīng)分開使用,以免影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

    6 其他需注意的事項(xiàng)

    ①蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時(shí),可采取整株(體)蔬菜浸泡。對(duì)一些葉綠素含量較高的蔬菜,也可采取整株(體)浸泡的方法,減少色素的干擾。

    ②試劑溶解前冷凍保存的保質(zhì)期為1年;酶粉溶解后應(yīng)盡快用完,可短期冷藏保存,如1周不能用完,應(yīng)冷凍保存,反復(fù)冷凍不可超過3次,冷凍保存不超過1個(gè)月;底物和顯色劑溶解后冷藏保存,保質(zhì)期1個(gè)月,可冷凍長期保存,配制檢測試劑時(shí)請(qǐng)勿劇烈振蕩。

    ③樣品處理時(shí)勿將樣品剪得太碎。

    ④加入酶試劑必須定量準(zhǔn)確,勿將液體滴在玻璃壁上,否則誤差較大。向下操作。

    ⑤樣品結(jié)果抑制率大于50%的需要重復(fù)檢驗(yàn)2次,才能判斷為陽性。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 秦桂云.蔬菜農(nóng)藥殘留檢測的方法及原理[EB/OL].(2013-05-17)[2014-02-11].http://www.agrichem.cn/news/2013/3/25/201332514442058255.shtml.

    [2] 普春,歐陽繼敏.蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方法介紹及注意事項(xiàng)[J].云南農(nóng)業(yè)科技,2009(S2):97-98.

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