艾蒿水提物對(duì)肉仔雞免疫和抗氧化功能的影響

楚維斌，史彬林，閆素梅，張鵬飛，趙飛，孫登生，趙啟龍，張靜（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特010018）

艾蒿水提物對(duì)肉仔雞免疫和抗氧化功能的影響

楚維斌，史彬林*，閆素梅，張鵬飛，趙飛，孫登生，趙啟龍，張靜
（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特010018）

本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加不同水平的艾蒿水提物對(duì)肉仔雞免疫和抗氧化功能的影響。試驗(yàn)選用192只1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞，隨機(jī)分為4個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，其他3組分別飼喂在基礎(chǔ)日糧中添加500、1 000、2 000 mg/kg艾蒿水提物的試驗(yàn)日糧。試驗(yàn)期共42 d，分為前、后兩期，每期21 d。結(jié)果表明：與對(duì)照組相比，試驗(yàn)后期1 000 mg/kg的艾蒿水提物添加組法氏囊指數(shù)顯著增加（P＜0.05）；試驗(yàn)前期500 mg/kg艾蒿水提物添加組免疫球蛋白M（IgM）含量顯著增加（P＜0.05），試驗(yàn)后期1 000 mg/kg艾蒿水提物添加組免疫球蛋白G（IgG）含量顯著增加（P＜0.05）；試驗(yàn)前期添加量1 000 mg/kg的試驗(yàn)組超氧化物歧化酶（SOD）含量顯著提高（P＜0.05），而艾蒿添加組丙二醛（MDA）含量都顯著降低（P＜0.05）。試驗(yàn)證明，日糧中添加艾蒿水提物可提高肉仔雞免疫和抗氧化能力。

艾蒿水提物；肉仔雞；免疫器官指數(shù)；免疫指標(biāo)；抗氧化指標(biāo)

抗生素具有一定的促生長(zhǎng)、抗菌和改善畜禽新陳代謝的作用［1］，其作為飼料添加劑已有幾十年的歷史。然而，飼用抗生素在提高畜禽生產(chǎn)性能的同時(shí)，也產(chǎn)生了許多負(fù)面效應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期飼喂抗生素會(huì)使動(dòng)物體內(nèi)的病原微生物產(chǎn)生抗藥性，同時(shí)在畜產(chǎn)品中的藥物殘留會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生直接危害［2］。因此，開(kāi)發(fā)一種無(wú)毒、無(wú)藥物殘留、可提高機(jī)體免疫和抗氧化功能的新型綠色添加劑成為研究的新方向。

艾蒿為菊科蒿屬多年生草本植物。傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為艾蒿具有散寒止痛、溫經(jīng)止血、通經(jīng)活絡(luò)等功效。艾蒿含有多糖、揮發(fā)油、黃酮、三萜類及多種微量化學(xué)元素。黃酮類成分是一類具有C6-C3-C6基本母核結(jié)構(gòu)的天然有色產(chǎn)物，目前研究發(fā)現(xiàn)，蒿屬植物的黃酮類化合物結(jié)構(gòu)類型主要包括黃酮醇類、黃酮類、二氫黃酮類及其苷類。多糖是一類由單糖組成的天然高分子化合物，其在增強(qiáng)免疫、抗衰老、降血糖方面有顯著作用。目前，人們對(duì)艾蒿的應(yīng)用研究主要集中在其對(duì)生產(chǎn)性能的影響方面，而關(guān)于其對(duì)肉雞免疫、抗氧化方面影響的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加艾蒿水提物對(duì)肉仔雞免疫和抗氧化功能的影響，為艾蒿作為一種新型飼料添加劑的研究與應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料試驗(yàn)用艾蒿采自和林格爾縣大紅城鄉(xiāng)境內(nèi)，將其陰干、蒸煮提取、凍干成粉。試驗(yàn)地點(diǎn)在內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)生產(chǎn)雞舍。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和日糧選取192只1日齡體重相近的健康A(chǔ)A肉仔雞，分為4個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧（玉米-豆粕型），其他3組分別飼喂基礎(chǔ)日糧中添加500、1 000、2 000 mg/kg艾蒿水提物的試驗(yàn)日糧。試驗(yàn)期42 d，分前后兩期，各21 d。試驗(yàn)日糧參照NRC（1994）肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合內(nèi)蒙古地區(qū)肉雞養(yǎng)殖實(shí)際情況配制，基礎(chǔ)日糧配方見(jiàn)表1，各組日糧營(yíng)養(yǎng)水平一致。

1.3 飼養(yǎng)管理試驗(yàn)前對(duì)試驗(yàn)雞舍及相關(guān)試驗(yàn)用具進(jìn)行嚴(yán)格的清洗和消毒。試驗(yàn)雞采用多層籠養(yǎng)，試驗(yàn)期間控制好光照、溫度、濕度、通風(fēng)和光照，具體方法參照AA肉雞飼養(yǎng)管理手冊(cè)。試驗(yàn)期間的免疫按照常規(guī)免疫程序進(jìn)行。

1.4 檢測(cè)項(xiàng)目和方法

1.4.1 免疫器官指數(shù)在試驗(yàn)第21、42天時(shí)每個(gè)重復(fù)選取體重適中的健康雞1只，空腹稱重，按常規(guī)方法進(jìn)行屠宰。屠宰后將免疫器官（脾臟、胸腺、法氏囊）分離并稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)，免疫器官指數(shù)=器官重（g）/活體重（kg）。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4.2 血清免疫和抗氧化指標(biāo)分別在試驗(yàn)第21、42天時(shí)每個(gè)重復(fù)選取1只體重適中的健康雞，頸靜脈采血，靜置1 h后在4 000 r/min下離心15 min，分離血清于-20℃下保存。用ELISA試劑盒（南京博爾迪）測(cè)定免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、可溶性CD4（sCD4）、可溶性CD8（sCD8）等免疫指標(biāo)和總抗氧化能力（TAOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、過(guò)氧化氫酶（CAT）等抗氧化指標(biāo)。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2007進(jìn)行整理，采用SAS9.0統(tǒng)計(jì)軟件中的ANOVA程序?qū)υ囼?yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因子方差分析，采用Duncan′s多重比較確定組間差異顯著性水平，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。所得結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 艾蒿水提物對(duì)肉仔雞免疫器官的影響由表2可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)后期1 000 mg/kg艾蒿水提物組顯著提高了法氏囊指數(shù)（P＜0.05），而其他免疫器官指數(shù)的組間差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 艾蒿水提物對(duì)肉仔雞血清免疫指標(biāo)的影響由表3可知，試驗(yàn)前期與對(duì)照組相比，添加量為500、1 000 mg/kg的試驗(yàn)組IgM含量都有所提高，但添加量為500 mg/kg時(shí)差異顯著（P＜0.05）；艾蒿水提物添加組sCD8含量都有所下降，但組間差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)后期，添加量為1 000 mg/kg的試驗(yàn)組IgG含量顯著增加（P＜0.05）。其他血清免疫指標(biāo)的組間差異均不顯著。

2.3 艾蒿水提物對(duì)肉仔雞血清抗氧化指標(biāo)的影響從表4可以看出，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)前期添加量1 000 mg/kg的試驗(yàn)組SOD含量顯著提高（P＜0.05），而添加艾蒿組MDA含量都顯著降低（P＜0.05）。

3 討論

3.1 艾蒿水提物對(duì)肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響免疫器官是動(dòng)物免疫活性細(xì)胞發(fā)育、增殖的場(chǎng)所，免疫器官的狀況與機(jī)體免疫功能相關(guān)。一般認(rèn)為，免疫器官越重機(jī)體免疫機(jī)能越好。脾臟、胸腺、法氏囊是畜禽主要免疫器官，參與機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫，它們的機(jī)能強(qiáng)弱與發(fā)育的狀態(tài)決定著機(jī)體免疫的水平。本試驗(yàn)表明，試驗(yàn)后期艾蒿添加組法氏囊指數(shù)較對(duì)照組都有所增加，分別增加1.2%、47.2%、17.8%，而添加量為1 000 mg/kg時(shí)顯著增加，這與趙興華等［3］的研究結(jié)果一致。而胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)組間差異不顯著，這與黃菁等［4］的研究結(jié)果不一致。糖類化合物是一類具有多羥基醛或酮的化合物。多糖是自然界中具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的糖類物質(zhì)，具有多種生物活性。研究發(fā)現(xiàn)，多糖在T、B淋巴細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞（NK），淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）等免疫細(xì)胞和促進(jìn)細(xì)胞因子生成、激活補(bǔ)體系統(tǒng)方面具有重要作用。艾蒿中的多糖類物質(zhì)具有促進(jìn)免疫器官發(fā)育的作用，而黃酮會(huì)抑制免疫器官細(xì)胞凋亡。這可能是法氏囊指數(shù)增加的原因。

表2 日糧中添加不同水平的艾蒿水提物對(duì)肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響

表3 日糧中添加不同水平的艾蒿水提物對(duì)肉仔雞血清免疫指標(biāo)的影響

表4 日糧中添加不同水平的艾蒿水提物對(duì)肉仔雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

3.2 艾蒿水提物對(duì)肉仔雞血清免疫指標(biāo)的影響免疫球蛋白是機(jī)體內(nèi)一類廣泛參與體液免疫反應(yīng)的球蛋白，其中外分泌液中的IgA與脾臟、淋巴結(jié)中產(chǎn)生的IgG具有抗菌、抗病毒等免疫活性，而在初次體液免疫反應(yīng)中出現(xiàn)的IgM具有補(bǔ)體激活等生物學(xué)功能［5］。輔助/誘導(dǎo)性T細(xì)胞是主要的CD4陽(yáng)性細(xì)胞，在抗原捕獲及遞呈中發(fā)揮重要作用，它分泌的IL等細(xì)胞因子可幫助其他T細(xì)胞增殖、分化、成熟；細(xì)胞毒/抑制性T細(xì)胞是主要的CD8陽(yáng)性細(xì)胞。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)前期500 mg/kg添加組IgM含量顯著增加，而試驗(yàn)后期1 000 mg/kg添加組IgG含量顯著增加，這與Chu等［6］的研究結(jié)果一致。而潘存霞［7］發(fā)現(xiàn)蒿屬植物提取物對(duì)增強(qiáng)機(jī)體免疫能力沒(méi)有影響，這與本試驗(yàn)結(jié)果不一致，其原因可能是試驗(yàn)動(dòng)物不同，艾蒿對(duì)動(dòng)物機(jī)體的影響存在一定差異。已有研究發(fā)現(xiàn)，蒿屬植物的主要成分包括揮發(fā)油、青蒿素、黃酮、山奈酚、微量化學(xué)元素等，其中黃酮、山奈酚等具有增強(qiáng)免疫功能的作用［8］。本試驗(yàn)中IgM、IgG含量的增加可能與艾蒿中黃酮、山奈酚等成分的調(diào)節(jié)作用有關(guān)。

3.3 艾蒿水提物對(duì)AA肉仔雞血清抗氧化指標(biāo)的影響正常情況下，動(dòng)物機(jī)體內(nèi)自由基和內(nèi)源性抗自由基活性物質(zhì)是不斷生成的，它們之間處于一種良好的動(dòng)態(tài)平衡。T-AOC是衡量機(jī)體抗氧化能力的綜合指標(biāo)，其含量的高低能夠反映自由基清除系統(tǒng)對(duì)外來(lái)刺激的代償能力和體內(nèi)自由基代謝狀況。SOD、CAT則是機(jī)體內(nèi)主要的清除自由基的抗氧化酶，它們?cè)谇宄踝杂苫?、過(guò)氧化物和過(guò)氧化氫及減少或阻止自由基形成方面發(fā)揮重要作用［9］。MDA過(guò)量則會(huì)引起細(xì)胞代謝失常，造成機(jī)體功能障礙，其含量的多少能夠反映出細(xì)胞受損傷的程度。試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)前期各處理組MDA含量都顯著降低，其中1 000 mg/kg的添加量組SOD含量顯著增加。這與何湘蓉等［10］的研究結(jié)果一致。

有研究表明，艾蒿中的黃酮類化合物具有清除自由基的作用［11］。黃酮類化合物主要通過(guò)兩個(gè)機(jī)理起到抗氧化作用：①黃烷醇與金屬進(jìn)行螯合反應(yīng)，形成螯合物。②黃酮醇能作為自由基的接受體而阻礙自由基連鎖反應(yīng)。SOD是清除氧離子鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中產(chǎn)生的下游酶，本試驗(yàn)認(rèn)為由于添加了艾蒿水提物，機(jī)體內(nèi)清除自由基、氧離子能力增強(qiáng)，使細(xì)胞受損程度降低，進(jìn)而使血清中SOD含量增加，MDA含量減少。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在日糧中添加艾蒿水提物對(duì)提高肉仔雞免疫和抗氧化功能有較好的作用，這為艾蒿水提物在肉仔雞飼料中的合理添加提供了理論依據(jù)。

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Effect of Artemisia Argyi Extract on Immune and Antioxidative Function in Broilers

CHU Wei-bin，SHI Bin-lin*，YAN Sun-mei，ZHANG Peng-fei，ZHAO Fei，SUN Deng-sheng，ZHAO Qi-long，ZHANG Jing
（College of Animal Science，Inner Mongolia Agricultural University，Inner Mongolia Hohhot 010018，China）

This study was designed to investigate the effects of aqueous extract of Artemisia argyi on immune and antioxidative function in broilers.192 one-day-old broiler chickens were randomly divided into four treatments with four replicates of 8 chicks.These four diets were formulated by adding Artemisia argyi extract of 0，500，1 000 and 2 000 mg/kg to the basal diet.The experiment lasted 42 days，containing two periods with 21 days each.The results showed that compared with the control，the bursa of fabricius index in 1 000 mg/kg Artemisia argyi group increased significantly in the latter period（P＜0.05）；immunoglobulin M（IgM）in 500 mg/kg Artemisia argyi group was the highest，and significantly higher than that of control group in the earlier period（P＜0.05）.Immunoglobulin G（IgG）in 500 mg/kg Artemisia argyi group was significantly higher than that of control group in the latter period（P＜0.05）.In addition，compared with the control，the MDA of three Artemisia argyi group decreased significantly，while the SOD in 1000 mg/kg significantly increased in the early period（P＜0.05）.It was concluded that the aqueous extract of Artemisia argyi can promote the immune and antioxidative function in broilers.

Artemisia argyi extract；broiler；immune organ index；immune parameter；antioxidative index

S831.5

：A

：0258-7033（2015）19-0067-04

2015-04-15；

2015-06-17

楚維斌，男（1987-），河北保定人，在讀碩士生，研究方向?yàn)閯?dòng)物環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)與安全生產(chǎn)，E-mail：chuweibin521@163.com

*通訊作者：史彬林，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail：shibinlin@aliyun. com