中藥抗病毒機制的研究進展

李 慧賈新華，2

（1.山東中醫(yī)藥大學，山東濟南250014；2.山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，山東濟南250011）

中藥抗病毒機制的研究進展

李 慧1賈新華1，2

（1.山東中醫(yī)藥大學，山東濟南250014；2.山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，山東濟南250011）

中醫(yī)藥抗病毒有較好的療效，其作用機理可分為直接抑制和間接抑制。直接抑制作用主要是阻斷病毒繁殖過程中的某一環(huán)節(jié)阻止其復制，以清除體內(nèi)的病原體；間接抑制則是激發(fā)調(diào)動機體的免疫防御系統(tǒng)而發(fā)揮抗病毒作用。且中藥發(fā)揮抗病毒作用并非單一機制起效，通常是幾種機制共同作用。中藥復方的抗病毒效果優(yōu)于單味中藥，而中藥復方的有效成分眾多，作用機制復雜，研究困難，需要綜合分析，運用系統(tǒng)的方法進行研究，使臨床用藥更有依據(jù)。

中藥 抗病毒機制 綜述

病毒是一類主要由核酸和蛋白質(zhì)組成的非細胞型微生物，其感染為病毒侵入人體并在靶器官細胞中增殖，并與機體發(fā)生相互作用。具體來說，其致病機理有:一是可以引起感染細胞的損傷和死亡；二是使感染的細胞膜發(fā)生改變，而導致感染細胞與鄰近未感染細胞發(fā)生融合；三是病毒感染中的炎性反應和免疫病理損傷；四是病毒感染引起的暫時性免疫抑制。由于病毒對抗生素不敏感且特效藥少，少數(shù)有一定療效的現(xiàn)代藥物尚不理想。

中醫(yī)藥在防治病毒性疾病方面有豐富的經(jīng)驗和完整的理論體系，具有獨特的優(yōu)越性。中藥抗病毒不只單純著眼于直接的抗病毒作用，更重視“病毒-機體-中藥”的關(guān)系，不僅直接殺滅病毒，阻止病毒的吸附、穿入、復制、轉(zhuǎn)染，更重要的是還能增強機體的免疫力，激發(fā)調(diào)動一切的免疫防御系統(tǒng)發(fā)揮抗病毒作用。中藥抗病毒目前大多從中藥中提取的單體、單味中藥及其提取物和中藥復方制劑三個方面入手，對其作用機制以及臨床應用等進行深入研究。本文對近幾年醫(yī)學界有關(guān)中藥抗病毒作用機制的研究做了粗略的總結(jié)。從研究來看，中藥抗病毒的作用機理可分為直接抗病毒作用和間接抗病毒作用。前者主要是阻斷病毒繁殖過程中的某一環(huán)節(jié)阻止其復制，后者則是激發(fā)調(diào)動機體的免疫防御系統(tǒng)而發(fā)揮抗病毒作用?，F(xiàn)將研究進展概述如下。

1 直接抗病毒途徑

此途徑主要是對病毒的直接滅活作用，以及阻斷病毒增殖過程中的各環(huán)節(jié)而發(fā)揮抗病毒作用。病毒的增殖過程大致可分為吸附、穿入、脫殼、基因組轉(zhuǎn)錄、基因組復制與基因表達、裝配、成熟與釋放。此增殖周期中，病毒附于宿主細胞表面與細胞表面結(jié)合后穿過細胞膜進入細胞，在細胞溶酶體酶作用下，脫去衣殼蛋白釋放病毒核酸，核酸釋放入細胞內(nèi)，則進入病毒的生物合成階段，包括病毒核酸復制和基因表達，最后病毒核酸與蛋白質(zhì)合成之后，在細胞質(zhì)內(nèi)或細胞核內(nèi)組裝成成熟的病毒顆粒。根據(jù)病毒增殖過程并結(jié)合中藥抗病毒相關(guān)研究，可將直接抗病毒作用分為三個階段:

1.1 侵入前抗病毒作用 侵入前抗病毒作用除了對病毒的直接滅活作用之外，還主要作用于病毒增殖過程中的吸附和穿入兩個環(huán)節(jié)，通過阻止病毒吸附與穿入，達到抗病毒效果。此作用機制可分為兩類:

一類是直接滅活作用:在對板藍根提取液抗病毒的雞胚實驗研究中發(fā)現(xiàn)[1]，板藍根提取液能直接滅活甲1型流感病毒鼠肺適應株。王志玉[2]實驗研究表明大黃醇提液中蒽醌類對單純皰疹病毒有直接的殺滅作用。另外，中藥抗病毒膠囊可使Ⅱ型單純皰疹病毒顆粒變形，大小不均勻，包膜裸露或破損以及病毒顆粒凝集融合成塊，結(jié)構(gòu)模糊不清，從而失去感染活力[3]。復方金銀花則在體外有較好的抑制Ⅰ型單純皰疹病毒的作用，效果要優(yōu)于無環(huán)鳥苷和鹽酸嗎啉胍，而且能夠增加細胞對環(huán)境的耐受力和延長細胞壽命[4]。

還有一類是阻止病毒的吸附及穿入，從而發(fā)揮抗病毒作用。有研究表明板藍根主要通過其多糖組分協(xié)同其蛋白組分，作用于細胞膜表面的唾液酸，與病毒（如流感病毒）產(chǎn)生競爭性吸附，以包被的方式保護細胞，有效預防了病毒對細胞的侵害，從而達到抗病毒的目的[5-6]。有報道黃芪A6組分阻斷流感病毒吸附感染宿主細胞的機制與其抑制流感病毒包膜功能、影響病毒對敏感細胞的吸附和穿入密切相關(guān)[7]。

中藥抗病毒活性成分中的黃酮類、多糖及其衍生物、三萜類化合物及其衍生物、生物堿及苷類等，都能通過阻止病毒顆粒對宿主細胞的吸附過程，而發(fā)揮抗病毒作用。有人認為甘草甜素的抗帶狀皰疹病毒活性可能與抑制病毒顆粒穿入脫殼或釋放有關(guān)，但其確切機制還不清楚[8]。甘草酸苷抑制HIV-1（Ⅰ型人類免疫缺陷病毒）病毒粒子在CD4+T細胞中的復制機制為甘草酸苷部分地防止了HIV-1吸附到CD4+T細胞上[9]。甘草甜素抗HSV（單純皰疹病毒）感染機制之一也可能是通過抗黏附來實現(xiàn)的，它可以對抗HSV感染后機體內(nèi)黏附力和黏附應力的變化[10]。黃芩苷能抑制HIV（人類免疫缺陷病毒）與細胞CD4受體的結(jié)合，主要是通過與轉(zhuǎn)化因子結(jié)合，削弱HIV與細胞受體的結(jié)合能力，抑制HIV感染人體外周血單個核細胞（包含淋巴細胞、單核細胞等）[11]。

1.2 細胞內(nèi)抗增殖作用 中藥抗病毒可通過抑制病毒基因組轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄的修飾，抑制病毒基因組核酸的復制，以及抑制病毒蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運來實現(xiàn)。病毒核酸的復制需多種病毒酶的協(xié)同合作才能完成，這些病毒酶不同于人體細胞復制所需的酶蛋白，尋找這些病毒酶活性抑制劑可以阻斷病毒核酸的復制。其中抑制病毒基因組活性的酶大致有抑制DNA多聚酶、抑制病毒RNA多聚酶、抑制逆轉(zhuǎn)錄酶、抑制病毒核苷酸還原酶。

段林建等[12]研究結(jié)果表明連翹苷可能通過抑制甲型流感病毒NP與病毒RNA結(jié)合形成NP復合物，阻礙NP基因復制，也有可能是抑制NP的轉(zhuǎn)錄水平或NP翻譯后修飾。有研究用MTT法檢測板藍根抗巨細胞毒效應，結(jié)果認為其抗病毒作用的機制可能與其所含之尿苷、尿嘧啶、次黃嘌呤等成分有關(guān)[13]。板藍根煎劑與病毒混合存在于培養(yǎng)上清中，其所含嘌呤嘧啶能干擾病毒DNA、RNA的復制，從而抑制病毒增殖，起到保護細胞免受病毒損害的作用。

有人認為抑制逆轉(zhuǎn)錄酶活性是抗HIV病毒復制的重要環(huán)節(jié)[11]，而黃酮類化合物抗HIV病毒主要作用于逆轉(zhuǎn)錄酶和整合。在HIV-1病毒逆轉(zhuǎn)錄酶試驗中，黃酮類化合物的多種多羥甲基表現(xiàn)出良好的抗HIV活性。比如黃酮類黃芩素和黃芩苷均有抑制逆轉(zhuǎn)錄酶活性的作用，且黃芩素的作用強于黃芩苷，還有從大戟地上部分得到的槲皮素對于HIV-1整合酶具有選擇性抑制活性。國外也有研究認為，黃酮類化合物可能通過抑制病毒復制過程信號傳遞物質(zhì)的活性，阻斷病毒復制所需的信號傳遞，進而抑制病毒的復制[14]。蒲公英中抑制甲型H1N1的化學成分，其作用機制為通過抑制病毒在狗腎細胞或人肺腺癌細胞中的核蛋白質(zhì)的合成并抑制聚合酶活性來抑制病毒的增殖[15]。其對HIV-1也具有明顯抑制作用，作用機制為抑制HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶的活性來抑制病毒繁殖[16]。

穿心蓮提取物炎琥寧能夠在病毒復制過程中通過占據(jù)DNA與蛋白質(zhì)的結(jié)合位點，阻止蛋白質(zhì)對DNA片段的包裹，從而導致病毒不能正常復制，同樣屬于抑制病毒的復制，來抑制人類皰疹病毒[17]。1.3 抗表達（溢出）再感染作用 此過程主要是阻止病毒由感染細胞向未感染細胞浸染。甘草甜素對VZV（水痘帶狀皰疹病毒）的體外抑制研究表明，病毒感染16h后加入甘草甜素，可抑制病毒從感染細胞向未感染細胞的擴散[18]。

2 間接抗病毒作用

此途徑主要是指通過增強機體的免疫力，激發(fā)調(diào)動機體的免疫防御系統(tǒng)來間接發(fā)揮抗病毒的作用，十分符合中醫(yī)“正氣存內(nèi)，邪不可干”的思想。中藥對機體免疫具有重要的調(diào)節(jié)作用，各種中藥都是多層次、多途徑、多靶點地作用機體，識別自己，排除非己成分，從而維持機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，提高機體免疫力。

2.1 免疫促進作用

2.1.1 促進免疫器官發(fā)育 免疫器官是人體產(chǎn)生免疫反應和執(zhí)行免疫功能的組織機構(gòu)，免疫器官的質(zhì)量與免疫功能密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖可以使正常小鼠脾臟及胸腺的重量增加，還可以糾正燒傷后小鼠脾臟及胸腺的重量減輕，調(diào)節(jié)其免疫功能[19]。

2.1.2 增強免疫細胞的作用 中藥抗病毒對T淋巴細胞、殺傷細胞和自然殺傷B細胞、單核巨噬細胞以及白細胞等免疫細胞均有不同程度的影響。中藥免疫增強劑可作用于胸腺淋巴系統(tǒng)，誘導T細胞分化增殖，形成效應細胞，產(chǎn)生淋巴因子。茅蘇萍等[20]通過對106例單皰病毒性角膜炎患者黃芪治療前后Th1/Th2細胞因子水平研究，發(fā)現(xiàn)其能調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞因子的失衡狀態(tài)，上調(diào)Th2細胞，抑制Th1細胞，改善患者機體免疫功能紊亂狀況。蔡小燕等[21]則認為黃芪在一定程度上增加了激素/免疫抑制劑對細胞凋亡的抑制作用，調(diào)節(jié)T淋巴細胞亞群比例趨于正常。大青葉能促進ConA活化的T細胞分泌IL-2（白細胞介素-2），輔助Tc細胞和B細胞的分化和增殖，調(diào)節(jié)細胞免疫和體液免疫功能[22]。

動物實驗表明黃芪多糖可提高小鼠B淋巴細胞的增殖反應[23]，因而黃芪對B淋巴細胞功能也有增強作用。

2.1.3 增強體液免疫 抗病毒體液免疫的主要因素是抗體，分泌型IgA可防止病毒的局部入侵，IgG、IgM可中斷已入侵的病毒通過血液循環(huán)擴散。

甘草甜素（GL）可以改善機體的體液免疫功能，研究發(fā)現(xiàn)GL劑量依賴性地減少血IgE水平，增加IgA、IgG、IgM水平和AchE活性，減少外周血和鼻黏膜P物質(zhì)水平[24]。許多中藥如人參、茯苓、靈芝、山藥、黃精、菟絲子、當歸、冬蟲夏草、刺五加等，均具有促進體液免疫的功能。

2.1.4 增強巨噬細胞的吞噬作用和NK細胞的殺傷作用 中藥人參中有效成分人參皂苷對網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（RES）吞噬功能有刺激作用[25]，其機理可能與人參皂苷使巨噬細胞內(nèi)cAMP含量顯著下降，cGMP顯著升高有關(guān)。黃芪可增加外周血中多核白細胞的數(shù)量，加強單核巨噬細胞系統(tǒng)功能，增強自然殺傷細胞（NKC）和LAK細胞（淋巴因子激活的殺傷細胞）活性，通過對細胞免疫功能的雙向調(diào)節(jié)來增強體液免疫，同時對補體系統(tǒng)的影響可誘生干擾素等細胞因子。劉培民[26]通過研究升降散對機體免疫系統(tǒng)的影響，結(jié)果表明升降散水煎液組可促進小鼠剛果紅的吞噬，增強巨噬細胞的吞噬能力，提高小鼠的非特異性免疫力。

2.1.5 誘生干擾素（IFN） 干擾素是由細胞基因組控制的一類誘生蛋白質(zhì)。它具有抗病毒繁殖及腫瘤生長等多種生物活性，是機體內(nèi)自身產(chǎn)生的一種抵御外來病毒入侵，維持機體或細胞功能自穩(wěn)定的防御性物質(zhì)。近年來在中藥研究中發(fā)現(xiàn)一些中藥具有誘生干擾素和促誘生干擾素的作用，其中尤以內(nèi)源性干擾素最多。

有研究表明，黃芪多糖能使動物體誘生內(nèi)源性干擾素，作用于細胞后產(chǎn)生抗病毒蛋白而抑制病毒蛋白合成，從而產(chǎn)生抗病毒感染作用[27]。另有研究者將煎液加入培養(yǎng)的小鼠脾細胞中，能誘生γ-干擾素。從香菇中提取的香菇素，能誘導血清IFN（干擾素）生成；青蒿素、丹參、刺五加和龍膽草等都能誘生干擾素，而具有抗病毒作用[24]。葛根湯則主要通過增強IFN的活性，抑制白細胞介素-1α（IL-1α）的產(chǎn)生，在流感早期服用，能快速誘生干擾素抑制病毒顆粒，降低lL-1α水平而控制機體對流感病毒感染后所表現(xiàn)的異?？哼M的病理反應。

2.1.6 多種細胞因子綜合調(diào)節(jié) 機體內(nèi)自然殺傷細胞（NK）、干擾素1（IFN-1）和白介素（IL-2）相互作用，形成免疫網(wǎng)絡(luò)，增強抗病毒和免疫調(diào)節(jié)作用。有學者研究解毒利肺口服液（簡稱JLOL，主要由金銀花、連翹、黃茶、川貝等組成）對感染病毒機體免疫系統(tǒng)的影響，運用流感病毒鼠肺適應株感染小鼠制成病毒性肺炎模型觀察，經(jīng)JLOL治療后，血漿中IL-2及IFN-γ水平均升高，說明該藥可促進病毒感染動物IL-2及IFN-γ的產(chǎn)生。這兩種細胞因子均能增強細胞毒性T細胞（CTL）作用，并激活自然殺傷細胞（NK），從而相互作用形成免疫網(wǎng)絡(luò)[28]。中藥單體虎杖苷、甘草酸、黃芪多糖、野黃芩苷、白藜蘆醇和氧化苦參堿在體外具有良好的抗甲型流感病毒的作用，其抗病毒機制與調(diào)節(jié)IFN-β1、IL-29等基因的表達有關(guān)[29]。

2.2 改善病毒所致機體的不良反應和病變 病毒對細胞的殺傷作用可導致器官的損傷和功能障礙，所以疾病早期所導致的細胞損傷是由病毒所引起，后期的機體炎癥與損傷則由復雜的免疫病理反應所引起。因而病程早期以抗病毒為主，后期則應著重修復機體損傷，防止繼發(fā)感染。富杭育等[30]對小鼠灌胃正柴胡飲（由柴胡、陳皮、防風、芍藥、甘草、生姜組成），結(jié)果發(fā)現(xiàn)其能顯著抑制流感病毒在鼠肺內(nèi)的增殖及由病毒引起的肺部炎癥，并呈明顯的量效關(guān)系，而且能降低致死量病毒感染小鼠的死亡率，延長存活時間。

3 結(jié)語

綜上所述，中藥抗病毒是通過直接抑制作用和間接抑制作用來實現(xiàn)的。直接抑制作用通過對病毒的直接殺滅或阻止其復制來清除體內(nèi)的病原體，而間接抑制作用則通過促進人體的特異性和非特異性免疫，來增強機體抵抗病毒的能力。但是中藥在抗病毒過程中并非只是單純一種機制起作用，通常是幾種作用機制并存，相互交叉作用的結(jié)果。因而我們要從已經(jīng)篩選并證明有顯著抗病毒作用的中藥中提取抗病毒的有效成分，研究復方中藥制劑中各中藥成分之間的相互作用和影響。相對于單味中藥來說，中藥復方具有更好的抗病毒效果，能更好地反映中藥的辨證論治與組方原則。例如蓮花清瘟顆粒，可以通過綜合抑制作用、對病毒吸附的預防作用、抑制病毒吸附后的復制增殖作用以及直接殺傷病毒的作用，實現(xiàn)多環(huán)節(jié)抗甲型人流感病毒的目的[31]。因此，中藥抗病毒可以通過藥物的配伍組合應對病情變化，實現(xiàn)治療的個體化與整體性。

中藥的藥理作用廣泛而復雜，化學成分也不易測定，且其抗病毒機制為多種途徑綜合作用的結(jié)果。因而中藥抗病毒機制的研究存在一定的困難性。中藥中的多種有效成分，根據(jù)不同的病理作用，可在多個方面發(fā)揮直接殺滅病毒、促進機體免疫系統(tǒng)殺傷病毒、減輕病毒對機體的損傷等作用。因而在中藥抗病毒機制方面需要綜合分析，增強對中藥復方的認識，運用系統(tǒng)的方法進行研究，從而為指導中藥抗病毒臨床應用提供理論依據(jù)。

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R286.87

A

1672-397X（2015）06-0082-04

李慧（1991—），女，碩士研究生，從事中西醫(yī)結(jié)合治療呼吸系統(tǒng)疾病的研究。

賈新華，博士研究生，副主任醫(yī)師。breathcn@163.com

2014-12-09

編輯：傅如海

“泰山學者”建設(shè)工程專項經(jīng)費資助（ts20110819）