川崎病冠脈損傷與血清巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α水平的相關(guān)性

顏世軍，周炳文，黃 娜，繆東幸

（1.中國人民解放軍第81醫(yī)院兒科，江蘇 南京 210002；2.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京兒童醫(yī)院，江蘇 南京 210009）

川崎病冠脈損傷與血清巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α水平的相關(guān)性

顏世軍1，周炳文1，黃 娜2，繆東幸1

（1.中國人民解放軍第81醫(yī)院兒科，江蘇 南京 210002；2.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京兒童醫(yī)院，江蘇 南京 210009）

目的 探討血清巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α(MIP-1α)水平與川崎病(KD)冠脈損傷的相關(guān)性。方法選取急性期KD患兒40例，其中15例有冠脈損傷，正常對(duì)照組20例。采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)血清MIP-1α水平，超聲心動(dòng)圖檢測(cè)冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張程度，分析血清MIP-1α水平變化及其與冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張程度的相關(guān)性。結(jié)果KD急性期患兒的血清MIP-1α水平為(79.16±11.54)ng/L，高于正常對(duì)照組(38.16±5.21)ng/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；冠脈損傷KD患兒的MIP-1α水平為(89.14±10.52)ng/L，高于無冠脈損傷KD患兒(71.15±2.48)ng/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。KD患兒血清MIP-1α水平與冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張程度呈正相關(guān)(r=0.438，P＜0.05)。結(jié)論KD急性期患兒的血清MIP-1α水平明顯升高，伴有冠狀動(dòng)脈損傷的KD患兒的水平更高；血清MIP-1α水平與冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張程度呈正相關(guān)。

川崎病；冠狀動(dòng)脈；巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α

川崎病(Kawasaki disease，KD)又名皮膚黏膜淋巴結(jié)綜合征，是一組以全身血管炎為主要病變的急性發(fā)熱出疹性疾病，屬于急性自限性血管炎綜合征[1]，冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張或瘤樣形成是其最主要的并發(fā)癥。目前KD的發(fā)病率有不斷上升的趨勢(shì)，已取代風(fēng)濕熱成為兒童后天性心臟病的主要原因[2]。有研究表明，KD患兒在急性期和亞急性期血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)顯著高于正常對(duì)照組，提示VEGF可能參與了血管炎癥的發(fā)生，導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈損傷。而Low等[3]發(fā)現(xiàn)炎癥細(xì)胞分泌巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α(MIP-1α)，使VEGF表達(dá)上調(diào)，故推測(cè)MIP-1α可能參與了KD血管炎癥的發(fā)生并導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈損傷。本研究通過檢測(cè)KD患兒血清MIP-1α水平，探討其與KD，特別是KD合并冠脈損傷的相關(guān)性及其在血管炎癥反應(yīng)中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年10月至2013年8月在解放軍第81醫(yī)院兒科和南京兒童醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院的KD急性期患兒40例，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照第7次世界小兒KD研討會(huì)(日本Hakone，2002)修訂的KD診斷標(biāo)準(zhǔn)。40例KD患兒中男性24例，女性16例，平均年齡(1.68±0.66)歲；另隨機(jī)選擇在體檢中心體檢的健康兒童20例作為正常對(duì)照組(NC)，其中男性12例，女性8例，平均年齡(2.05±1.14)歲，平均年齡及性別構(gòu)成與KD組差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 冠脈擴(kuò)張的分度 依據(jù)諸福棠實(shí)用兒科學(xué)，冠脈擴(kuò)張分為：(1)正常(0度)，冠脈無擴(kuò)張(0～3歲≤2.5 mm，3～9歲≤3 mm)；(2)輕度(Ⅰ度)，瘤樣擴(kuò)張明顯而局限，內(nèi)徑≤4 mm；(3)中度(Ⅱ度)，可為單發(fā)、多發(fā)或廣泛性，內(nèi)徑4～7 mm；(4)重度(Ⅲ度)，巨瘤內(nèi)徑≥8 mm，多為廣泛性，累及一支以上[2]。

1.3 方法

1.3.1 樣本采集 采集清晨空腹靜脈血4 ml，離心半徑13.5 cm，3 000 r/min，離心30 min，取上清，置PC管中-75℃保存，標(biāo)本收集完后同批檢測(cè)。

1.3.2 MIP-1α檢測(cè) 血清MIP-1α測(cè)定采用雙抗體夾心ELISA法，按說明程序嚴(yán)格操作，酶標(biāo)450 nm處測(cè)OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用標(biāo)準(zhǔn)曲線求標(biāo)本MIP-1α含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。KD患兒MIP-1α水平與冠脈內(nèi)徑之間關(guān)系分析采用直線相關(guān)分析，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般情況 40例KD急性期患兒中發(fā)生冠脈擴(kuò)張(CAL)15例，其中男性9例，女性6例，年齡平均(1.74±0.75)歲；未發(fā)生冠脈擴(kuò)張(NCAL)25例，其中男性16例，女性9例，年齡平均(1.71±0.82)歲。CAL與NCAL患兒的性別、年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.08，χ2=1.05，P均＞0.05)。

2.2 血清MIP-1α水平 KD急性期患兒血清MIP-1α水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。KD患兒中，15例CAL患兒的血清MIP-1α水平明顯高于25例NCAL患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表1 KD患兒與正常對(duì)照組患兒比較(±s)

表1 KD患兒與正常對(duì)照組患兒比較(±s)

NC組KD組t值P值20 40 38.16±5.21 79.16±11.54 17.08 0.001 2.05±0.21 2.58±0.49 2.36 0.001

表2 CAL與NCAL組患兒比較(±s)

表2 CAL與NCAL組患兒比較(±s)

組別CAL組NCAL組t值P值例數(shù)15 25 MIP-1α（ng/L）89.14±10.52 71.15±2.48 3.08 0.02冠脈內(nèi)徑（mm）3.35±0.23 2.11±0.18 18.76 0.001

2.3 相關(guān)性分析 40例KD患兒的血清MIP-1α水平與冠脈擴(kuò)張程度呈正相關(guān)(r=0.438～0.659，P＜0.05)。

3 討論

隨著對(duì)KD認(rèn)識(shí)的深入，近年我國的發(fā)病率逐漸升高[4]。KD的病因和發(fā)病機(jī)制目前尚不明確，可能是在一定的遺傳易感性基礎(chǔ)上，由一種或多種廣泛存在的感染因子引起的機(jī)體自身免疫系統(tǒng)異常激活導(dǎo)致的急性血管炎綜合征[5-6]。目前對(duì)KD血管內(nèi)皮功能紊亂和損傷的研究較多，進(jìn)一步研究認(rèn)為VEGF參與了KD血管炎癥的發(fā)生。VEGF主要由血管平滑肌細(xì)胞生成，在KD急性期和亞急性期VEGF顯著升高，恢復(fù)期降至正常。VEGF提高微血管滲透性，造成血管周圍水腫，在KD急性期加強(qiáng)血管壁的破壞，參與了冠狀動(dòng)脈損傷進(jìn)程。VEGF還加強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移，在KD急性期后參與血管重構(gòu)[7]。

有研究已證實(shí)通過促進(jìn)中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌MIP-1α可使VEGF表達(dá)水平上調(diào)[3，8]。MIP-1α可由單核/巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生，可誘導(dǎo)并趨化、激活單核/巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等，從而引起炎癥細(xì)胞浸潤，誘導(dǎo)其分泌更多趨化因子，形成炎癥反應(yīng)循環(huán)[9]。由于炎癥反應(yīng)在KD血管炎發(fā)展過程中起著重要作用，因此可以認(rèn)為MIP-1α作為單核/巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的趨化因子，能夠促進(jìn)其分泌血管生長因子(如VEGF)，導(dǎo)致KD血管內(nèi)皮功能紊亂，造成冠狀動(dòng)脈損傷。

KD并發(fā)CAL嚴(yán)重影響兒童的健康，早期診斷、早期治療可以減少CAL的發(fā)生，可是，目前KD診斷指標(biāo)缺乏特異性。本研究發(fā)現(xiàn)，KD患兒血清MIP-1α水平顯著高于正常對(duì)照組兒童，且與冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張程度呈正相關(guān)。同時(shí)，CAL組患兒的血清MIP-1α水平顯著高于NCAL組的患兒及正常對(duì)照組兒童。因此我們推測(cè)，血清MIP-1α水平的測(cè)定對(duì)于KD急性期患兒的早期診斷具有一定的診斷價(jià)值。同時(shí)，MIP-1α在以單核/巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞活化為主的自身免疫性疾病的發(fā)病過程中起重要作用，而KD治療的關(guān)鍵是控制血管炎，提示我們是否可以通過調(diào)控MIP-1α的水平來緩解KD心血管的損傷，為KD的診治提供了一種思路。

[1]杜忠東.川崎病專題討論會(huì)紀(jì)要[J].中華兒科雜志,2007,45(11): 826-830.

[2]胡亞美,江載芳.諸福棠實(shí)用兒科學(xué)[M].7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:698-705.

[3]Low QE,Drugea IA,Duffner LA,et al.Wound healing in MIP-1αand MCP-1αmice[J].Am J Pathol,2001,159(2):457-463.

[4]張永蘭,杜忠東,趙 地.2000-2004年北京川崎病住院患兒流行病學(xué)調(diào)查[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2007,22(1):12-15.

[5]李瑞燕,李曉輝.川崎病病因研究進(jìn)展[J].心血管病學(xué)進(jìn)展,2010, 31(4):616-620.

[6]Yeung RS.Kawasaki disease:update on pathogenesis[J].Curr Opin Rheumatlo,2010,22(5):551-560.

[7]杜忠東.川崎病病因和發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國實(shí)用兒科雜志, 2006,21(10):724-726.

[8]譚安安.巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊[J].心血管病學(xué)進(jìn)展,2007,28(2):237-239.

[9]Parissis JT,Adamopoulos S,Venetsanou KF,et al.Serum profiles of C-C chemokines in acute myocardiai infarction:possibie implication in post-infarction left ventricular remodeling[J].J Interfon Cytokine Res,2002,22(2):223-229.

Relationship between coronary artery lesion in Kawasaki disease and macrophage inflammatory protein-1α level.

YAN Shi-jun1,ZHOU Bing-wen1,HUANG Na2,MIAO Dong-xing1.1.Department of Pediatrics,the 81stHospital of Chinese People's Lireration Army,Nanjing 210002,Jiangsu,CHINA;2.Nanjing Children's Hospital Affiliated to Nanjing Medical University,Nanjing 210009,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo investigate the relationship between serum MIP-1αlevel and coronary artery lesion in Kawasaki disease(KD).MethodsThe levels of serum MIP-1αfrom 40 KD patients(including 15 patients with coronary artery lesion)and 20 healthy children were detected by enzyme-linked immunosorbent assay.The degree of coronary artery dilatation was detected by ultrasonic cardiogram and its association with MIP-1αwas analyzed.ResultsThe level of serum MIP-1αin acute KD patients(79.16±11.54)ng/L was significantly higher than that in healthy children(38.16±5.21)ng/L(P＜0.05).The level of serum MIP-1αin acute KD patients with coronary artery lesion(89.14±10.52)ng/L was higher than in KD patients with non-coronary artery dilatation(71.15±2.48)ng/L (P＜0.05).In addition,the level of serum MIP-1αin KD patients showed positive correlation with the degree of coronary artery dilatation(r=0.438,P＜0.05).ConclusionThe level of serum MIP-1αis significantly higher in KD patients and further higher in KD patients with coronary artery lesion.The serum MIP-1αlevel in KD patients shows a positive correlation with the degree of coronary artery dilatation.

Kawasaki disease;Coronary artery;Macrophage inflammatory protein-1α

R442.8

A

1003—6350（2015）03—0342—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.03.0123

2014-06-05)

顏世軍。E-mail：ysj_byyy@sina.com