復(fù)方扶正消癌1號對胃癌患者T淋巴細胞及樹突狀細胞表型影響的臨床研究

高紅芳 周 莉

（上海市第七人民醫(yī)院腫瘤科，上海200137）

胃癌是我國發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一，中晚期多表現(xiàn)為氣陰兩虛型。我院中藥復(fù)方扶正消癌1號在以往研究中被證實治療中晚期胃癌氣陰兩虛型療效確切，但其作用機制尚不清楚。T淋巴細胞和樹突狀細胞（dendritic cell，DC）是參與機體細胞免疫的主要功能細胞，其中DC是目前已知的機體內(nèi)最強的抗原提呈細胞，是細胞免疫應(yīng)答的始動者，其通過捕獲抗原、加工處理后將抗原特異性地遞呈給T淋巴細胞而發(fā)揮免疫保護功能。研究發(fā)現(xiàn)，T淋巴細胞和DC介導(dǎo)的細胞免疫與腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)密切相關(guān)[1]。本研究旨在通過比較，觀察復(fù)方扶正消癌1號對胃癌晚期患者T淋巴細胞及樹突狀細胞表型表達的影響，探討復(fù)方扶正消癌1號對中晚期胃癌氣陰兩虛型患者免疫功能的作用。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集我院腫瘤科2010年1月到2014年3月間收治的晚期胃癌患者60例，所有患者均有明確的病理學(xué)或細胞學(xué)診斷，按照單盲法隨機分為治療組與對照組。治療組30例：男18例，女12 例；年齡 48～67 歲，平均年齡（56.92±11.27）歲；病理分型腺癌25例，其他5例；臨床分期Ⅲ期13例，Ⅳ期17例；轉(zhuǎn)移部位為肺轉(zhuǎn)移8例，肝轉(zhuǎn)移12例，腦轉(zhuǎn)移3例，骨轉(zhuǎn)移3例，沒有轉(zhuǎn)移6例。對照組30例：男 17例，女 13例；年齡 44～64歲，平均年齡（58.12±12.10）歲；病理分型腺癌 24 例，其他 6 例；臨床分期Ⅲ期14例，Ⅳ期16例；轉(zhuǎn)移部位為肺轉(zhuǎn)移9例，肝轉(zhuǎn)移11例，腦轉(zhuǎn)移3例，骨轉(zhuǎn)移3例，沒有轉(zhuǎn)移6例。2組患者一般資料比較，無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：按照全國胃癌協(xié)作組通過的胃癌診斷標(biāo)準(zhǔn)及UICC分期標(biāo)準(zhǔn)[2]，所有病例均有病理學(xué)或細胞學(xué)診斷。中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：參考《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》中氣陰兩虛證的辨證依據(jù)[3]。主癥：①胃脘痞滿；②堵悶不舒；③食后加重；④舌質(zhì)胖嫩或有齒痕，色淡紅，苔薄白或少苔；⑤脈沉細或濡緩。次癥：①神疲乏力；②少氣懶言；③自汗；④口干少飲；⑤形體消瘦。凡具備以上主癥2項（其中舌苔脈象必備1項）加次癥2項即可診斷。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) （1）經(jīng)病理學(xué)確診為胃癌；（2）參考國際抗癌聯(lián)盟分期標(biāo)準(zhǔn)，臨床分期為Ⅲ-Ⅳ期；（3）中醫(yī)符合氣陰兩虛型診斷；（4）行為狀態(tài)評分≥3分；（5）預(yù)計生存期＞6 個月；（6）至少有一處可測量的病灶，主要臟器功能正常；（7）年齡為44歲到64歲；（8）知情同意，依從性好，可隨訪。

2 治療方法

2.1 對照組 根據(jù)病情，均為無法耐受或放棄放、化療等治療的患者，予最佳支持療法（BSC）：結(jié)合氣陰兩虛證型，每日予以參麥注射液60mL益氣養(yǎng)陰、抗腫瘤、提高免疫；結(jié)合患者其他兼證給予必要的對癥處理，如予以硫酸嗎啡緩釋片止痛，奧美拉唑注射液制酸，鹽酸甲氧氯普胺止嘔等。

2.2 治療組 在對照組治療的基礎(chǔ)上給予口服復(fù)方扶正消癌1號，藥物組成：黃芪15g，太子參15g，麥冬15g，白術(shù) 10g，山藥12g，茯苓 12g，白花蛇舌草30g，當(dāng)歸 15g，冬凌草 15g，延胡索 15g，柿蒂 10g，甘草6g。湯藥制備由醫(yī)院制劑科統(tǒng)一完成，專人負責(zé)質(zhì)控監(jiān)制，每劑水煎煮2次，合并藥汁約300mL，每日1劑，分2次飯后服。

2組均以治療1個月為1個療程，連續(xù)治療3個療程。

3 療效觀察

3.1 觀察指標(biāo) 流式細胞儀檢測治療前后患者外周血T淋巴細胞CD3＋、CD4＋及CD8＋和DC細胞表型 CD1α、CD80、CD86 及 CD83 的表達。

3.2 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行處理。計量資料以（±s）表示，治療組與對照組比較采用t檢驗，組間率的比較采用方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3.3 治療結(jié)果

3.3.1 2組患者治療前后T淋巴細胞表達變化 治療前2組患者外周血 T淋巴細胞 CD3＋、CD4＋及CD8＋表達未見明顯差異 （P＞0.05）。與治療前相比，治療組治療3個月后外周血T淋巴細胞CD3+、CD4+表達顯著增加（P＜0.05），而 CD8+表達顯著下降（P＜0.05），CD4+/CD8+水平顯著增加（P＜0.05）。與治療前相比，對照組治療3個月后，CD3+、CD4+、CD8+表達及CD4+/CD8+水平未見明顯差異（P＞0.05）。 見表 1。

表1 治療組與對照組治療前后T淋巴細胞表達比較（±s）%

表1 治療組與對照組治療前后T淋巴細胞表達比較（±s）%

注：與本組治療前比較，*P＜0.05；與對照組治療后比較，#P＜0.05。

對照組（n=30）治療組（n=30）治療前 治療后 治療前 治療后CD3+指標(biāo)68.06±1.96 70.35±3.53*#68.36±1.48 68.13±1.81 CD4+DC8+ 22.90±1.91 22.60±1.75 23.28±2.00 19.39±3.05*#34.06±1.86 34.60±1.68 34.82±1.85 37.33±3.52*#CD4+/DC8+ 1.27±0.51 1.29±0.66 1.29±0.39 1.67±0.44*#

3.3.2 2組患者治療前后DC表型表達變化 治療前2組患者 DC表型 CD1α、CD80、CD86及 CD83表達未見明顯差異（P＞0.05）。與治療前相比，治療組治療3 個月后 DC 表型 CD1α、CD80、CD83、CD86 表達顯著增加（P＜0.05）。與治療前相比，對照組治療3個月后DC細胞表型表達未見明顯差異（P＞0.05）。見表2。3.4 不良反應(yīng)發(fā)生情況 整個臨床試驗階段發(fā)現(xiàn)有3例患者出現(xiàn)了嘔吐癥狀，推測此嘔吐發(fā)生與原發(fā)胃癌有關(guān)，經(jīng)對癥治療后癥狀消失，無其他明顯肝、腎毒性反應(yīng)，表明臨床上加服復(fù)方扶正消癌1號治療晚期胃癌是安全的。

表2 治療組與對照組治療前后DC表型表達比較（±s）%

表2 治療組與對照組治療前后DC表型表達比較（±s）%

注：與本組治療前比較，*P＜0.05；與對照組治療后比較，#P＜0.05。

對照組（n=30）治療組（n=30）治療前 治療后 治療前 治療后CD1α指標(biāo)54.77±1.88 60.00±3.64*#54.92±3.26 55.40±1.39 CD80 CD83 63.09±1.76 63.72±2.98 62.64±1.74 67.62±4.74*#CD86 62.93±2.01 65.37±2.89 63.17±1.93 68.32±4.75*#67.58±1.86 66.58±2.07 67.65±1.82 72.82±4.12*#

4 討論

早中期胃癌目前治療方法仍以手術(shù)、放療、化療為主，效果較好，但針對晚期胃癌缺乏有效手段。中醫(yī)扶正祛邪法在改善中晚期胃癌患者的臨床癥狀，提高生活質(zhì)量，延長生存時間以及輔助化療的增效與減毒等方面表現(xiàn)出明顯優(yōu)勢。中晚期胃癌多以虛為主，虛多實少，主要表現(xiàn)為氣陰兩虛型，本研究采用的復(fù)方扶正消癌1號，是我院腫瘤科的臨床經(jīng)驗方。方中黃芪、太子參、白術(shù)扶正益氣為君，白花蛇舌草、冬凌草攻伐抗癌為臣，佐以延胡索、柿蒂止痛降逆，并以甘草調(diào)和諸藥。全方健脾補氣、益胃固表，共奏扶助正氣、攻伐癌腫之效。

本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，復(fù)方扶正消癌1號治療3個療程后，患者外周血T淋巴細胞CD3+、CD4+表達明顯增加，CD8+表達顯著降低，CD4+/CD8+比例明顯增加。CD3+可以反映T淋巴細胞總值的變化，CD3+增加，提示復(fù)方扶正消癌1號可以提高淋巴細胞總值。CD4+的T淋巴細胞也稱輔助性T淋巴細胞，它可以通過多種途徑發(fā)揮抗腫瘤作用。CD8+T淋巴細胞分為抑制性T細胞（TS）和殺傷性T細胞（TC）。與CD4+的T淋巴細胞相比，CD8+T細胞一方面在細胞免疫的終末階段產(chǎn)生殺傷腫瘤的作用，另一方面也可以產(chǎn)生抑制T淋巴細胞調(diào)節(jié)的作用，故而，CD4+/CD8+可以反映T輔助細胞與T抑制細胞之間的平衡，進而反映機體的免疫狀態(tài)。CD4+增加，CD4+/CD8+增加，CD8+降低，提示復(fù)方扶正消癌1號可以促進淋巴細胞活化和增殖，提高機體免疫功能。

腫瘤抗原遞呈是誘導(dǎo)細胞免疫應(yīng)答發(fā)揮抗腫瘤功能的關(guān)鍵過程，而DC是機體內(nèi)已知的最強抗原遞呈細胞，它能高效攝取、加工處理和遞呈抗原[4]，未成熟的DC具有較強的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細胞，將信息傳遞給T淋巴細胞，開始機體細胞免疫應(yīng)答。腫瘤細胞可以通過干擾DC遷移或成熟而影響DC功能的發(fā)揮，逃避機體的免疫監(jiān)測，進而增殖或轉(zhuǎn)移[5]。而DC細胞功能的發(fā)揮，同其細胞表型表達有關(guān)。其中CD1α是DC的特異性表面標(biāo)志，CD1α陽性細胞數(shù)的多少可反映DC的數(shù)量[6]；CD83是成熟DC的主要特征性標(biāo)志，其激活淋巴細胞功能最強[7]；CD86是DC表面重要的共刺激分子，CD86與T細胞表面的CD28構(gòu)成共刺激通路，可激活MHCI類限制性CD8+的T細胞和MHCⅡ類限制性CD4+的T細胞，從而發(fā)揮抗腫瘤作用[8]；CD80為DC表面的共刺激分子之一，通過與淋巴細胞表面的共刺激分子受體相結(jié)合，形成強烈的共刺激信號，參與T細胞的活化[9-10]。本研究結(jié)果表明，與治療前和對照組治療后相比，復(fù)方扶正消癌1號治療3個月后胃癌患者DC細胞表型CD1α、CD80、CD83、CD86 表達顯著增加， 提示復(fù)方扶正消癌1號能夠促進DC成熟，進而提升T淋巴細胞發(fā)揮抗腫瘤的免疫應(yīng)答作用。

本研究為復(fù)方扶正消癌1號的臨床推廣提供了依據(jù)，至于復(fù)方扶正消癌1號降低的CD8+T淋巴細胞具體是TS還是TC還有待進一步研究。

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