新型N-取代苯基-9-烷基-3-咔唑磺酰脲類化合物的合成及其抗腫瘤活性

錢 宇，田 靜，常霄巍，巴俊杰

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010110)

磺酰脲類化合物具有生物活性高、毒性小等優(yōu)點(diǎn)，在醫(yī)藥和農(nóng)藥領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用，主要被用于降糖藥和除草劑。此外，一些磺酰脲類化合物還具有利尿、抗血栓、降血脂和抗中風(fēng)等生物活性［1-2］。近年來研究發(fā)現(xiàn)芳基磺酰脲類化合物具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性，尤其用于治療結(jié)腸癌、卵巢癌、肺癌等實(shí)體腫瘤，已經(jīng)被確定為對實(shí)體腫瘤有顯著性作用的一類新型化療藥物［3-6］。

細(xì)胞周期分裂蛋白25B(Cdc25B)有促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂作用，對G2-M期的待修復(fù)檢驗(yàn)點(diǎn)有重要作用，是一種潛在的癌基因，在人類腫瘤(乳腺癌、肺癌、大腸癌、胃癌、前列腺癌、卵巢癌、淋巴瘤和黑素瘤等)細(xì)胞系中過度表達(dá)［7］，因此，尋找Cdc25B抑制劑是發(fā)現(xiàn)抗腫瘤藥物的重要途徑。

Scheme 1

本文根據(jù)芳基磺酰脲類化合物與芳基磺酰胺類化合物化學(xué)結(jié)構(gòu)相似和抗腫瘤作用機(jī)制均為抑制細(xì)胞有絲分裂的原理［8-9］，以具有抗腫瘤活性的二芳基磺酰胺類化合物CA-4系列咔唑磺酰胺類化合物為參照［10］，將其磺酰氨基換成磺酰脲基，根據(jù)在二芳基磺酰脲另一個(gè)芳環(huán)上連接中性、親脂性及體積較小的基團(tuán)能增強(qiáng)抗腫瘤活性的原理［11-12］，設(shè)計(jì)并合成了30個(gè)新型的N-取代苯基-9-烷基-3-咔唑磺酰脲類化合物(7a～7Ⅳ)。以9-烷基咔唑?yàn)樵希?jīng)磺化、氯化和氨化反應(yīng)制得9-烷基咔唑-3-磺酰胺(4a和4o);取代苯胺(5a～5n，5s，5Ⅳ)與三光氣反應(yīng)制得取代苯基異氰酸酯(6a～6n，6s，6Ⅳ);4分別與6經(jīng)縮合反應(yīng)合成了7a～7Ⅳ，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR，IR和ESI-MS表征。并對其進(jìn)行了Cdc25B抑制活性的篩選。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

XT4A型數(shù)字顯微熔點(diǎn)儀(溫度未校正);ZF-1型紫外分析儀;Bruker AvanceⅢ500型核磁共振儀(DMSO-d6為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo));Affinity-1型紅外光譜分析儀(KBr壓片);Finnigan Lcq Advantage Max型質(zhì)譜儀。

所用試劑均為分析純。

1.2 合成

(1)2a和2o的合成通法［13］

冰鹽浴冷卻下，在反應(yīng)瓶中依次加入1 11.04 mmol和二氯甲烷35 mL，降溫至-15℃以下，滴加氯磺酸1.29 g(11.15 mmol)，滴畢，于 -10 ℃以下反應(yīng)30 min;于室溫反應(yīng)3 h(TLC檢測)。抽濾，濾餅用二氯甲烷洗滌，真空干燥得灰綠色固體9-甲基-3-咔唑磺酸(2a，收率 69.4%)和 9-乙基-3-咔唑磺酸(2o，收率 80.1%)。

(2)3a和3o的合成通法［14］

冰鹽浴冷卻下，在反應(yīng)瓶中依次加入五氯化磷1.59 g(7.66 mmol)，2 3.83 mmol和 DMF 10 mL，于-10℃以下反應(yīng)30 min;于室溫反應(yīng)2.5 h(TLC檢測)。倒入冰水中，抽濾，濾餅用蒸餾水洗滌至中性，真空干燥得淡黃色固體9-甲基-3-咔唑磺酰氯(3a，收率 83.2%，m.p.142 ℃ ～145℃)和 9-乙基-3-咔唑磺酰氯(3o，收率 84.3%，m.p.132 ℃ ～135 ℃)。

(3)4a和4o的合成通法［15］

冰鹽浴冷卻下，在反應(yīng)瓶中加入氨水5 mL，攪拌下緩慢滴加3 3.58 mmol的THF(10 mL)溶液，滴畢，于0℃以下反應(yīng)20 min;于室溫反應(yīng)1 h(TLC檢測)。倒入冰水中，用稀鹽酸調(diào)至pH≈6，抽濾，濾餅真空干燥得灰白色固體9-甲基-3-咔唑磺酰胺(4a，收率 82.1%，m.p.223 ℃ ～226℃)和 9-乙基-3-咔唑磺酰胺(4o，收率 85.2%，m.p.182 ℃ ～185 ℃)。

(4)6a～6n，6s，6Ⅳ的合成通法

在三口燒瓶中加入固體光氣(BTC)6.00 g(0.02 mol)和甲苯30 mL，攪拌使其溶解;冰水浴冷卻下緩慢滴加5(0.04 mol)的甲苯(15 mL)溶液和三乙胺5～7滴的混合溶液，滴畢(1 h)，于室溫反應(yīng)1 h;回流反應(yīng)至澄清(TLC檢測)。常壓蒸出甲苯，剩余液減壓蒸餾得取代苯基異氰酸酯(6a～6n，6s，6Ⅳ)。

6a:白色晶體，收率 65.2%，b.p.100 ℃/4.0 KPa。6b:無色透明液體，收率56.0%，b.p.84 ℃ /6.0 KPa。6c:白色晶體，收率54.0%，b.p.120℃/5.3 KPa。6d:無色透明液體，收率55.9%，b.p.110 ℃ /4.7 KPa。6e:無色透明液體，收率57.5%，b.p.80 ℃ /4.7 KPa。6f:無色透明液體，收率 41.8%，b.p.152 ℃ /6.7 KPa。6g:無色透明液體，收率45.4%，b.p.114℃/3.3 KPa。6h:白色晶體，收率 59.6%，b.p.125℃/6.0 KPa。6i:無色透明液體，收率 54.2%，b.p.125 ℃/6.0 KPa。6j:無色透明液體，收率52.1%，b.p.145 ℃/4.0 KPa。6k:無色透明液體，收率20.5%，b.p.118 ℃ /3.3 KPa。6l:白色晶體，收率 40.5%，b.p.102 ℃ /4.0 KPa。6m:白色晶體，收率 46.6%，b.p.110 ℃ /2.7 KPa。6n:無色透明液體，收率58.5%，b.p.103℃/6.0 KPa。6s:無色透明液體，收率30.0%，b.p.75℃/2.0 KPa。6Ⅳ:白色晶體，收率 56.6%，b.p.123 ℃ /8.0 KPa。

(5)7a ～7Ⅳ的合成(以7a 為例)［16］

在三口燒瓶中加入4a 1.00 g(3.85 mmol)和乙腈30 mL，攪拌下于室溫反應(yīng)1 h。加入K2CO31.59 g(11.54 mmol)，回流反應(yīng) 1 h。滴加 6a 0.89 g(5.78 mmol)的乙腈(10 mL)溶液，滴畢(0.5 h);回流反應(yīng)6 h(TLC檢測)。冷卻，抽濾，濾餅分別用蒸餾水和乙醇洗滌，真空干燥得白色粉末 7a 1.01 g。

用類似方法合成白色粉末7b～7Ⅳ。

7a:收率 63.3%，m.p.298℃ ～300℃;1H NMR δ:8.52(s，1H)，8.47(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.93 ～ 7.90(m，1H)，7.61(d，J=8.5 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.50 ～ 7.46(m，1H)，7.44 ～ 7.42(m，2H)，7.24(t，J=7.0 Hz，1H)，7.07 ～7.05(m，2H)，3.89(s，3H);IR ν:3 352，2 934，1 641，1 589，1 522，1 494，1 396，1 130，1 061 cm-1;ESI-MSm/z:412.21{［M -H］-}。

7b:收率 65.5%，m.p.282℃ ～284℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.33(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，7.93 ～ 7.90(m，1H)，7.61(d，J=8.0 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49 ～7.46(m，1H)，7.41 ～7.39(m，2H)，7.24(t，J=7.5 Hz，1H)，6.88 ～6.84(m，2H)，3.86(s，3H);IR ν:3 350，2 936，1 636，1 595，1 526，1 476，1 404，1 128，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:396.23{［M -H］-}。

7c:收率 56.9%，m.p.283 ℃ ～285℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.47(s，1H)，8.18(d，J=7.5 Hz，1H)，7.92(d，J=8.5 Hz，1H)，7.61(d，J=8.0 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49(t，J=7.5 Hz，1H)，7.39 ～7.37(m，2H)，7.24(t，J=7.5 Hz，1H)，7.18 ～7.16(m，2H)，3.89(s，3H);IR ν:3 352，2 934，1 643，1 587，1 524，1 492，1 392，1 124，1 061 cm-1;ESI-MSm/z:457.99{［M -H］-}。

7d:收率 52.1%，m.p.264℃ ～266℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.19 ～8.14(m，2H)，7.91(d，J=8.5 Hz，1H)，7.61(d，J=8.5 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.0 Hz，1H)，7.29 ～7.27(m，2H)，7.23(t，J=7.0 Hz，1H)，6.86 ～6.84(m，2H)，3.84(s，3H)，2.12(s，3H);IR ν:3 352，2 924，1 628，1 591，1 514，1 476，1 358，1 128，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:392.12{［M -H］-}。

7e:收率 59.1%，m.p.136 ℃ ～137℃;1H NMR δ:10.57(s，1H)，8.76(s，1H)，8.67(s，1H)，8.33(d，J=8.0 Hz，1H)，8.04 ～8.02(m，1H)，7.79(d，J=8.5 Hz，1H)，7.71(d，J=8.5 Hz，1H)，7.58 ～7.55(m，1H)，7.32(t，J=7.5 Hz，1H)，7.21 ～7.18(m，2H)，6.78 ～6.75(m，2H)，3.95 ～ 3.89(m，5H)，1.27(t，J=7.50 Hz，3H);IR ν:3 347，2 980，1 689，1 593，1 514，1 477，1 248，1 157，1 038 cm-1;ESI-MSm/z:422.17{［M -H］-}。

7f:收率 75.2%，m.p.273℃ ～275 ℃;1H NMR δ:8.53(s，1H)，8.20 ～8.18(m，1H)，8.13(s，1H)，7.94 ～ 7.92(m，1H)，7.62(d，J=8.0 Hz，1H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49(t，J=8.0 Hz，1H)，7.34 ～7.29(m，2H)，7.24(t，J=8.0 Hz，1H)，6.67 ～6.65(m，2H)，3.89(s，3H)，3.62(s，3H);IR ν:3 345，2 938，1 634，1 597，1 526，1 475，1 409，1 125，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:408.37{［M -H］-}。

7g:收率 40.6%，m.p.263 ℃ ～265 ℃;1H NMR δ:8.70(s，1H)，8.51(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.92 ～ 7.90(m，1H)，7.84(s，1H)，7.62(d，J=8.5 Hz，1H)，7.56(t，J=8.5 Hz，1H)，7.50(t，J=7.5 Hz，1H)，7.25 ～ 7.22(m，3H)，3.89(s，3H);IR ν:3 339，2 932，1 632，1 584，1 518，1 477，1 285，1 115，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:446.21{［M -H］-}。

7h:收率 43.8%，m.p.283 ℃ ～285 ℃;1H NMR δ:8.58(s，1H)，8.52(s，1H)，8.20(d，J=7.5 Hz，1H)，7.93 ～ 7.90(m，1H)，7.67 ～7.61(m，2H)，7.55(d，J=8.5 Hz，1H)，7.50 ～7.47(m，1H)，7.25(t，J=7.5 Hz，1H)，7.11 ～7.01(m，2H)，3.89(s，3H);IR ν:3 341，2 932，1 639，1 618，1 516，1 476，1 431，1 115，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:414.17{［M -H］-}。

7i:收率 51.1%，m.p.209℃ ～211 ℃;1H NMR δ:8.53(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，8.13(s，1H)，7.93 ～ 7.91(m，1H)，7.63 ～7.55(m，2H)，7.50(t，J=7.0 Hz，1H)，7.26 ～ 7.18(m，2H)，7.09 ～ 7.07(m，1H)，6.80(d，J=8.0 Hz，1H)，3.89(s，3H)，2.06 ～2.04(m，6H);IR ν:3 518，3 284，2 920，1 618，1 593，1 506，1 477，1 387，1 130，1 067 cm-1;ESI-MSm/z:406.44{［M -H］-}。

7j:收率 71.7%，m.p.262 ℃ ～264 ℃;1H NMR δ:8.53(s，1H)，8.43(s，1H)，8.20(d，J=7.5 Hz，1H)，7.93 ～ 7.91(m，1H)，7.63 ～7.55(m，2H)，7.50(t，J=8.0 Hz，1H)，7.41(d，J=6.0 Hz，1H)，7.26 ～7.21(m，2H)，7.06 ～ 7.03(m，1H)，3.89(s，3H)，2.16(s，3H);IR ν:3 348，2 930，1 630，1 587，1 528，1 476，1 404，1 321，1 128，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:426.52{［M -H］-}。

7k:收率 72.1%，m.p.276℃ ～278℃;1H NMR δ:8.72(s，1H)，8.52(s，1H)，8.20(d，J=8.0 Hz，1H)，7.93 ～7.91(m，1H)，7.66 ～7.60(m，2H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49(t，J=7.0 Hz，1H)，7.25 ～7.17(m，2H)，7.10 ～7.07(m，1H)，3.89(s，3H);IR ν:3 350，2 931，1 645，1 592，1 521，1 477，1 415，1 325，1 125，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:430.69{［M -H］-}。

7l:收率 71.4%，m.p.193℃ ～195 ℃;1H NMR δ:8.52(s，1H)，8.44(s，1H)，8.20(d，J=7.5 Hz，1H)，7.92(d，J=8.5 Hz，1H)，7.63 ～7.60(m，2H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.50 ～7.47(m，1H)，7.25(t，J=7.5 Hz，1H)，7.15 ～ 7.12(m，1H)，6.70 ～ 6.98(m，1H)，3.89(s，3H)，2.14(s，3H);IR ν:3 335，2 926，1 622，1 595，1 503，1 477，1 377，1 126，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:426.22{［M -H］-}。

7m:收率 34.5%，m.p.136℃ ～138℃;1H NMR δ:10.79(s，1H)，9.06 ～9.03(m，1H)，8.77(s，1H)，8.34(d，J=7.5 Hz，1H)，8.06 ～8.03(m，1H)，7.90 ～7.79(m，1H)，7.70(d，J=7.5 Hz，1H)，7.59 ～7.50(m，2H)，7.32(t，J=7.5 Hz，1H)，7.26 ～7.19(m，2H)，7.03 ～6.99(m，1H)，3.95(s，3H);IR ν:3 339，2 936，1 717，1 589，1 541，1 477，1 327，1 161，1 078 cm-1;ESI-MSm/z:412.27{［M -H］-}。

7n:收率 62.3%，m.p.241℃ ～243℃;1H NMR δ:8.52(s，1H)，8.20 ～8.17(m，2H)，7.93 ～7.91(m，1H)，7.61(d，J=8.0 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49(t，J=7.5 Hz，1H)，7.26 ～7.21(m，2H)，7.17(d，J=8.5 Hz，1H)，6.93 ～6.89(m，1H)，6.49(d，J=7.5 Hz，1H)，3.95(s，3H)，2.13(s，3H);IR ν:3 341，2 922，1 626，1 591，1 533，1 476，1 427，1 119，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:392.18{［M -H］-}。

7o:收率 69.9%，m.p.264 ℃ ～266 ℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.48(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，7.90(d，J=8.5 Hz，1H)，7.62(d，J=8.5 Hz，1H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49 ～7.43(m，3H)，7.24 ～7.21(m，1H)，7.05(d，J=8.0 Hz，2H)，4.47 ～4.43(m，2H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 353，2 983，1 651，1 592，1 538，1 492，1 316，1 125，1 090 cm-1;ESI-MSm/z:426.33{［M -H］-}。

7p:收率 56.5%，m.p.292 ℃ ～294 ℃;1H NMR δ:8.55(s，1H)，8.40(s，1H)，8.20(d，J=7.5 Hz，1H)，7.92(d，J=8.0 Hz，1H)，7.63 ～7.55(m，2H)，7.49 ～7.41(m，3H)，7.23(t，J=7.5 Hz，1H)，6.90 ～6.86(m，2H)，4.49 ～4.43(m，2H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 355，1 632，1 605，1 560，1 510，1 325，1 125，1 085 cm-1;ESI-MSm/z:410.37{［M -H］-}。

7q:收率 80.1%，m.p.258℃ ～260℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.49(s，1H)，8.18(d，J=7.5 Hz，1H)，7.90(d，J=8.0 Hz，1H)，7.62(d，J=8.0 Hz，1H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.47(t，J=7.5 Hz，1H)，7.40 ～7.38(m，2H)，7.23(t，J=7.5 Hz，1H)，7.19 ～ 7.17(m，2H)，4.47 ～4.43(m，2H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 350，2 980，1 624，1 593，1 533，1 496，1 321，1 126，1 093 cm-1;ESI-MSm/z:470.52{［M-H］-}。

7r:收率 44.3%，m.p.265℃ ～267 ℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.19 ～8.16(m，2H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.62(d，J=8.0 Hz，1H)，7.55(d，J=8.5 Hz，1H)，7.47(t，J=8.0 Hz，1H)，7.29(d，J=8.5 Hz，2H)，7.22(t，J=7.5 Hz，1H)，6.85(d，J=8.0 Hz，2H)，4.47 ～4.29(m，2H)，2.13(s，3H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 352，2 985，1 645，1 595，1 537，1 470，1 315，1 140，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:406.14{［M -H］-}。

7s:收率 45.3%，m.p.292 ℃ ～294 ℃;1H NMR δ:8.77(s，1H)，8.53(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，7.92(d，J=7.5 Hz，1H)，7.64 ～7.56(m，4H)，7.50 ～7.46(m，1H)，7.37(d，J=8.0 Hz，2H)，7.24 ～7.21(m，1H)，4.48 ～4.43(m，2H)，1.32(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 327，2 980，1 652，1 589，1 535，1 471，1 346，1 114，1 051 cm-1;ESI-MSm/z:460.13{［M -H］-}。

7t:收率 50.3%，m.p.122 ℃ ～124 ℃;1H NMR δ:10.55(s，1H)，8.76(s，1H)，8.63(s，1H)，8.33(d，J=7.5 Hz，1H)，8.04 ～8.01(m，1H)，7.82(d，J=8.0 Hz，1H)，7.72(d，J=8.5 Hz，1H)，7.57(t，J=7.5 Hz，1H)，7.32(t，J=7.5 Hz，1H)，7.21 ～ 7.18(m，2H)，6.79 ～6.76(m，2H)，4.54 ～4.49(m，2H)，3.94 ～3.89(m，2H)，1.35(t，J=6.0 Hz，3H)，1.26(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 344，2 978，1 683，1 591，1 541，1 450，1 334，1 149，1 076 cm-1;ESI-MSm/z:436.19{［M -H］-}。

7u:收率 78.7%，m.p.240℃ ～243℃;1H NMR δ:8.56(s，1H)，8.20(d，J=8.0 Hz，2H)，7.93 ～7.91(m，1H)，7.65 ～7.59(m，2H)，7.50 ～ 7.47(m，1H)，7.32 ～ 7.22(m，3H)，6.68 ～6.66(m，2H)，4.48 ～4.44(m，2H)，3.63(s，3H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 331，2 974，1 624，1 593，1 523，1 477，1 325，1 130，1 064 cm-1;ESI-MSm/z:422.43{［M -H］-}。

7v:收率 64.3%，m.p.259℃ ～261℃;1H NMR δ:8.72(s，1H)，8.51(s，1H)，8.19(d，J=7.5Hz，1H)，7.90(d，J=8.5 Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.63(d，J=8.0 Hz，1H)，7.57(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.5 Hz，1H)，7.26 ～ 7.22(m，3H)，4.48 ～ 4.44(m，2H)，1.31(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 340，2 980，1 637，1 593，1 508，1 475，1 377，1 116，1 062 cm-1;ESI-MSm/z:460.16{［M -H］-}。

7w:收率 49.4%，m.p.265℃ ～267℃;1H NMR δ:8.59(s，1H)，8.52(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.91 ～ 7.89(m，1H)，7.67 ～7.62(m，2H)，7.57(d，J=7.5 Hz，1H)，7.48(t，J=6.0 Hz，1H)，7.24(t，J=7.5 Hz，1H)，7.11 ～7.01(m，2H)，4.48 ～4.44(m，2H)，1.31(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 350，2 976，1 620，1 593，1 539，1 475，1 384，1 125，1 089 cm-1;ESI-MSm/z:428.18{［M -H］-}。

7x:收率 69.7%，m.p.159℃ ～161℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，8.09(s，1H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.63(d，J=8.5 Hz，1H)，7.57(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.5 Hz，2H)，7.24 ～7.20(m，2H)，7.10 ～7.08(m，1H)，6.79(d，J=8.0 Hz，1H)，4.48 ～ 4.43(m，2H)，2.05(s，6H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 321，2 974，1 627，1 593，1 506，1 475，1 384，1 130，1 066 cm-1;ESI-MSm/z:420.44{［M -H］-}。

7y:收率 65.9%，m.p.241 ℃ ～243 ℃;1H NMR δ:8.52(s，1H)，8.43(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.92 ～7.9(m，1H)，7.64(d，J=8.0 Hz，1H)，7.57(d，J=9.0 Hz，1H)，7.49 ～7.46(m，1H)，7.42(s，1H)，7.25 ～7.21(m，2H)，7.05 ～7.03(m，1H)，4.47 ～4.45(m，2H)，2.16(s，3H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 336，2 976，1 625，1 593，1 485，1 475，1 381，1 128，1 067 cm-1;ESI-MSm/z:440.63{［M -H］-}。

7z:收率 81.0%，m.p.263℃ ～265 ℃;1H NMR δ:8.72(s，1H)，8.52(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.66 ～7.62(m，2H)，7.57(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.5 Hz，1H)，7.25 ～7.17(m，2H)，7.09 ～7.08(m，1H)，4.48 ～4.45(m，2H)，1.32(t，J=7.5 Hz，3H);IR ν:3 354，2 972，1 631，1 593，1 514，1 475，1 417，1 325，1 128，1 091 cm-1;ESI-MSm/z:446.81{［M -H］-}。

7Ⅰ:收率 81.7%，m.p.202℃ ～204℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.43(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.90(d，J=8.5 Hz，1H)，7.64 ～7.62(m，2H)，7.57(d，J=8.5 Hz，2H)，7.48(t，J=7.5 Hz，1H)，7.24(t，J=7.5 Hz，1H)，7.15 ～ 7.13(m，1H)，6.99 ～ 6.97(m，1H)，4.48 ～4.43(m，2H)，2.14(s，3H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 337，2 974，1 633，1 593，1 506，1 475，1 377，1 124，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:440.25{［M -H］-}。

7Ⅱ:收率 51.3%，m.p.175℃ ～177℃;1H NMR δ:8.57(s，1H)，8.52(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，7.91(d，J=8.5 Hz，1H)，7.66(s，1H)，7.63(d，J=8.5 Hz，1H)，7.57(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.0 Hz，1H)，7.25 ～7.22(m，2H)，7.05(t，J=8.0 Hz，1H)，6.70 ～ 6.68(m，1H)，4.48 ～ 4.44(m，2H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 337，2 978，1 636，1 585，1 519，1 476，1 325，1 121，1 061 cm-1;ESI-MSm/z:426.25{［M -H］-}。

7Ⅲ:收率 67.1%，m.p.156℃ ～158℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.19 ～8.17(m，2H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.63(d，J=8.0 Hz，1H)，7.55(d，J=8.5 Hz，1H)，7.47(t，J=7.5 Hz，1H)，7.27 ～7.21(m，2H)，7.16(d，J=8.0 Hz，1H)，6.91(t，J=8.0 Hz，1H)，6.49(d，J=7.5 Hz，1H)，4.47 ～4.43(m，2H)，2.13(s，3H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 354，2 978，1 638，1 593，1 531，1 481，1 327，1 129，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:406.19{［M -H］-}。

7Ⅳ:收率 33.0%，m.p.234℃ ～235℃;1H NMR δ:8.87(s，1H)，8.51(s，1H)，8.20 ～8.18(m，1H)，8.09(d，J=5.0 Hz，1H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.63(d，J=8.0 Hz，1H)，7.59 ～7.56(m，2H)，7.48(t，J=7.5 Hz，1H)，7.36 ～ 7.34(m，1H)，7.25 ～ 7.21(m，1H)，4.47 ～4.45(m，2H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 331，2 980，2 937，1 626，1 593，1 518，1 491，1 476，1 327，1 128，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:494.57{［M -H］-}。

1.3 抗腫瘤活性測試

采用熒光底物OMFP考察7a～7Ⅳ對Cdc25B的抑制活性。OMFP經(jīng)Cdc25B去磷酸化后得產(chǎn)物OMF，OMF被485 nm激發(fā)光激發(fā)后可發(fā)射出波長為535 nm的可檢測的熒光信號，從而觀察Cdc25B的活性變化以及7a～7Ⅳ對其抑制情況。

2 結(jié)果與討論

2.1 合成

在制備2時(shí)，控制氯磺酸的加入量至關(guān)重要，其量過大時(shí)容易在1的其它位置進(jìn)行取代;量少時(shí)則反應(yīng)不完全，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)氯磺酸過量0.1 mmol較為合適。

在3的合成中，嘗試了多種氯化試劑。(1)以二氯亞砜為氯化劑時(shí)，得粘稠產(chǎn)物，且副產(chǎn)物多。(2)以三氯氧磷為氯化劑時(shí)，反應(yīng)強(qiáng)烈，條件不易控制，后處理危險(xiǎn)，且收率低。(3)以五氯化磷為氯化劑，即本文所采用的方法，收率均在80%以上，且后處理簡單，只需水洗至中性，干燥即可。五氯化磷用量為2 eq.，需分批加入，以控制溫度在-10℃以下。后處理時(shí)要將反應(yīng)液緩慢滴加入冰水中，防止由于未反應(yīng)的五氯化磷遇水放出大量熱而發(fā)生副反應(yīng)。

在4的合成中，滴液方式有兩種:一種是將氨水滴入3中;另一種則相反。按前者操作，易發(fā)生3與產(chǎn)物4的氨化反應(yīng)，生成大量副產(chǎn)物。因此，本實(shí)驗(yàn)采用后一種滴液方式，保證氨化反應(yīng)中3始終在氨水過量狀態(tài)下參與反應(yīng)，從而減少副產(chǎn)物，提高收率。

2.2 抗腫瘤活性

7a～7Ⅳ的抗腫瘤活性結(jié)果見表1。由表1可見，在用藥濃度為 20 μg·mL-1時(shí)，以 Na3VO4(IC50=1.51 ±0.23 μmol·L-1)為陽性對照，7b，7g，7h，7j，7k，7l，7n，7s，7v，7y，7Ⅰ和7Ⅳ 的抑制率大于90%，對Cdc25B具有良好的抑制活性。

整體看來，N-甲基咔唑系列磺酰脲類化合物比N-乙基咔唑系列的抑制活性高。苯環(huán)為單取代時(shí)，對位取代比鄰、間位抑制活性較高;對位上連有氟、氯和三氟甲基時(shí)抑制活性較高。苯環(huán)為二取代時(shí)，抑制活性較單取代高;間、對位上連氟、氯、三氟甲基和甲基的抑制活性高。

表1 7a～7Ⅳ對Cdc25B的抑制活性Table 1 Inhibition of 7a～7Ⅳ to Cdc25B

3 結(jié)論

合成了30個(gè)新型的N-取代苯基-9-烷基-3-咔唑磺酰脲類化合物。初步的體外活性測試結(jié)果表明:7b，7g，7h，7j，7k，7l，7n，7s，7v，7y，7Ⅰ和7Ⅳ對Cdc25B具有良好的抑制作用，可能成為潛在的具有抗腫瘤活性的Cdc25B抑制劑。目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)優(yōu)化和進(jìn)一步的抗腫瘤活性研究正在進(jìn)行中。

致謝:活性篩選實(shí)驗(yàn)由國家新藥篩選中心協(xié)助測定，在此表示誠摯的謝意。

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