鴨棉子餅中毒的病理學(xué)觀察

曾饒瓊

摘要：對(duì)棉子餅中毒患鴨進(jìn)行了臨床癥狀及病理組織切片的觀察。臨床上患鴨主要表現(xiàn)為拉稀、消瘦和關(guān)節(jié)變形。經(jīng)病理組織切片觀察，其肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞發(fā)生顆粒變性，偶見壞死灶;腎小管上皮細(xì)胞顆粒變性，腎臟間質(zhì)淤血;腸絨毛壞死脫落。以上結(jié)果顯示鴨棉子餅中毒的靶器官是肝、腎以及腸。

關(guān)鍵詞：鴨;棉子餅;中毒;病理學(xué)

中圖分類號(hào)：S858.32 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ?文章編號(hào)：0439-8114（2015）02-0388-07

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.02.033

Pathological Observation of Duck Poisoned by Cottonseed Meal

ZENG Rao-qiong

（Yibing Professional College， Yibing 644003， Sichuan，China）

Abstract： The ducks poisoned by cottonseed meal through clinical diagnosis were observed with pathological histologic sections. The sick ducks performed as diarrhoea， skinny and deformity of metatarsus joint. Through histopathologically observation， the hepatocytes were granular degeneration. Necrosis was occasionally observed in liver. The epithelium of renal tubule was granular degeneration. The veins in kidney interstitial tissues were congestion. Necrosis and cast of intestinal villi were found. It is indicated that the target organs poisoned by cottonseed meals were liver， kidney and intestine.

Key words： duck; cottonseed meal; poisoning; pathology

棉子餅中含有大量蛋白質(zhì)，是良好的蛋白質(zhì)飼料來源，品質(zhì)上接近于豆類蛋白質(zhì)，營養(yǎng)價(jià)值也比谷類蛋白質(zhì)高，具有8種必需氨基酸，尤其是賴氨酸含量高達(dá)6%[1，2]，因而倍受養(yǎng)殖戶的青睞。有報(bào)道稱棉子餅中蛋白質(zhì)含量高達(dá)33.21%～45.09%[3，4]。現(xiàn)在飼料中棉子餅的用量情況分別是：肉豬、肉雞可占飼料的10%～20%;母豬及產(chǎn)蛋雞可占飼料的5%～10%;反芻動(dòng)物的耐受性較強(qiáng)，用量可適當(dāng)增大;但若直接使用未經(jīng)去毒處理的棉子餅，其在飼料中的比例不得超過5%[5-7]。這是因?yàn)槊拮语炛泻卸拘晕镔|(zhì)——棉酚及其衍生物。

棉酚又名棉毒素，多以脂腺體或樹膠狀存在于子葉的腺體內(nèi)，其顏色從淡黃、橙黃、紅、紫到黑褐色，稱為色素腺體或棉酚色素。棉子餅中含有15種以上的棉酚類色素，其中最主要的是棉酚色素，棉酚色素可分為結(jié)合棉酚（BG）和游離棉酚（FC）兩類，其他色素均為棉酚的衍生物。棉酚及其衍生物的含量因棉花的栽培環(huán)境條件、棉子貯存期、含油量、蛋白質(zhì)含量、棉花纖維品質(zhì)、制油工藝過程等諸多因素的變化而不同[1，2，5，8]。據(jù)報(bào)道，在棉酚類色素中，游離棉酚、棉紫酚、棉綠酚、二氨基棉酚等對(duì)動(dòng)物均有毒性，其對(duì)大鼠的口服LD50分別為2 570、6 680、660和327 mg/kg[9]，可見，棉酚的毒性強(qiáng)弱主要取決于其含量;棉酚的毒性主要由活潑醛基和活潑羧基引起，因?yàn)锽G中的活性基團(tuán)多數(shù)已被結(jié)合，所以FC分子結(jié)構(gòu)中的活性基團(tuán)（醛基與羧基）相對(duì)較多，因而主要是FC產(chǎn)生對(duì)機(jī)體的毒害作用，但BG在動(dòng)物體內(nèi)也有可能由結(jié)合態(tài)轉(zhuǎn)化為游離態(tài)，繼而對(duì)動(dòng)物體產(chǎn)生毒性[3]。FC在肝臟中含量最多，其次是膽汁、血清和腎，在脾、心、肺、胰中含量很低，吸收后主要由膽汁隨糞便排出體外，少量由尿液排出。棉酚的排泄緩慢，在體內(nèi)有明顯的蓄積作用[1]。現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)研究表明，棉酚通過對(duì)膜基質(zhì)及蛋白質(zhì)分子的結(jié)合，以及通過負(fù)離子自由基機(jī)制對(duì)膜相結(jié)構(gòu)的破壞和對(duì)電子傳遞體系的干擾，從多方面干擾細(xì)胞的代謝，尤其是與Ca2+依賴性蛋白激酶有關(guān)的代謝。棉酚最主要的靶細(xì)胞器是線粒體[3，8];還具有影響動(dòng)物的生殖機(jī)能的作用——破壞睪丸生精上皮細(xì)胞，對(duì)附睪等雄性附屬生殖器官也有不同程度的影響，造成死精、少精、無精子癥。棉酚對(duì)妊娠母畜有較嚴(yán)重的危害，可引起流產(chǎn)、死胎、弱胎、胎兒畸形、出生后發(fā)育遲緩等[10，11]。另據(jù)報(bào)道，棉酚可與鐵離子結(jié)合，干擾血紅蛋白的結(jié)合，引起缺鐵性貧血。棉酚能抑制、滅活組織中的多種酶，可導(dǎo)致溶血。

未經(jīng)過任何處理的棉子餅，其棉酚含量可達(dá)0.15%～1.80%。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前中國生產(chǎn)的機(jī)榨或預(yù)壓浸出的棉子餅，一般含棉酚0.06%～0.08%，農(nóng)村生產(chǎn)的土榨餅中棉酚含量一般為0.20%以上[5]。研究表明，當(dāng)豬的日糧中棉酚含量為0.01%～0.02%時(shí)可引起中毒，達(dá)0.03%則可導(dǎo)致死亡[10]。實(shí)際生產(chǎn)中，養(yǎng)殖戶由于不清楚棉子餅的毒性及其脫毒方法，常因過量飼用棉子餅導(dǎo)致畜禽中毒。

本研究對(duì)臨床上一例棉酚中毒鴨進(jìn)行了詳細(xì)的臨床觀察，并且在尸體剖檢后取組織器官進(jìn)行病理組織形態(tài)學(xué)觀察，以明確鴨棉子餅中毒的臨床特征及病變靶器官，觀察結(jié)果可為獸醫(yī)臨床診斷鴨棉子餅中毒提供科學(xué)依據(jù)和理論參考。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

試驗(yàn)動(dòng)物：某養(yǎng)殖戶送檢的5只病鴨。

試驗(yàn)器材：手術(shù)剪、托盤、鑷子、尼康數(shù)碼照相機(jī)、切片機(jī)刀片、酒精燈、LEICARM2135型半自動(dòng)切片機(jī)、毛刷、木塊、修組織塊刀、修蠟塊刀、銅制蠟塊模型、三腳架、鋁制飯盒容器、火柴、載玻片、蓋玻片、切片染色架、溫箱、標(biāo)簽紙、OLYMPUS電光源顯微鏡、數(shù)碼照相顯微鏡、酒精燈、等。

試劑：70%乙醇溶液、85%乙醇溶液、95%乙醇溶液、蘇木紫試劑、伊紅試劑、冰塊、1%的鹽酸乙醇溶液（1%的鹽酸1 mL和無水乙醇99 mL配制）、10%福爾馬林固定液高效切片石蠟、蛋白膠、樹脂膠等。

1.2 ?方法

1.2.1 ?臨床觀察 ?觀察患鴨臨床癥狀并做記錄。

1.2.2 ?剖檢病變 ?頸靜脈放血處死鴨，剖檢觀察各組織器官的眼觀變化并做記錄。

1.2.3 ?病理組織學(xué)觀察 ?在剖檢觀察后，分別取心、肝、脾、肺、腎、腺胃、小腸段、胰臟、法氏囊、胸腺、骨骼肌、腦等組織1～2塊，置于10%福爾馬林固定液中固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，H.E染色，OLYMPUS顯微鏡觀察，對(duì)病變明顯部位進(jìn)行數(shù)碼顯微照相。

2 ?觀察結(jié)果

2.1 ?臨床癥狀

患鴨生長發(fā)育不良、消瘦;雙腳跖關(guān)節(jié)變形向內(nèi)彎曲呈O形、跗關(guān)節(jié)明顯腫大（圖1）;以跗關(guān)節(jié)著地、喜臥、站立不穩(wěn)、行走困難;肛周羽毛被黃綠色或黃白色稀便污染;蹼毛細(xì)血管充血;有多只鴨雙腳向外拐呈“八”字形（圖2），該鴨右眼結(jié)膜充血，流清亮鼻液，排黃褐色稀糞。

2.2 ?剖檢病變

眼觀病變主要見于蹼、跗關(guān)節(jié)、跖關(guān)節(jié)、心臟、肝臟、腸道和胸腺。

蹼：蹼部皮膚血管充血呈樹枝狀。

關(guān)節(jié)：跗關(guān)節(jié)明顯腫大變形，僵硬不靈活（圖1），關(guān)節(jié)囊內(nèi)充有黃色渾濁液體或紅色血性內(nèi)容物（圖3），關(guān)節(jié)囊外周肌腱增粗并伴有結(jié)締組織增生。跖關(guān)節(jié)及趾關(guān)節(jié)亦有變形，導(dǎo)致整個(gè)足部畸形。

心臟：心外膜見有大小不等的暗紅色出血斑，心冠脂肪出血（圖4），左心室心內(nèi)膜有多量密集的小點(diǎn)狀出血。

肝臟：肝臟體積輕度腫大，呈黃褐色，表面有少量淤斑（圖5），肝臟邊緣有少量黃色壞死灶，隆起、略高于肝臟表面。

腸道：腸道內(nèi)容物呈褐色，腸黏膜充血、潮紅。

胸腺：胸腺表面有針尖大小的出血點(diǎn)（圖6）。

2.3 ?病理組織形態(tài)學(xué)觀察

2.3.1 ?肝臟 ?2只患鴨的肝細(xì)胞腫脹，發(fā)生顆粒變性（圖7）和脂肪變性，中央靜脈和肝竇擴(kuò)張淤血（圖8）。2只患鴨病變較嚴(yán)重，肝臟腺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞重度腫脹，空泡變性（圖9），肝竇貧血，肝小葉內(nèi)見數(shù)量不等的假嗜伊紅白細(xì)胞浸潤（圖10）。1只鴨還見肝組織內(nèi)灶性壞死，壞死灶內(nèi)散在有數(shù)量不等的紅細(xì)胞。

2.3.2 ?腎臟 ?腎小球體積不同程度增大，腎小球毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，嚴(yán)重者腎小球明顯腫大，充滿腎小囊，腎小管上皮細(xì)胞顆粒變性和空泡變性（圖11），管腔狹窄;腎小管間質(zhì)內(nèi)靜脈和毛細(xì)血管淤血（圖12），間質(zhì)內(nèi)有假嗜伊紅白細(xì)胞浸潤（圖13）。

2.3.3 ?腸管 ?腸黏膜上皮脫落，腸絨毛頂端凝固性壞死（圖14、圖15），部分腸絨毛的壞死深達(dá)黏膜下層，平滑肌肌層增厚，細(xì)胞空泡變性，并呈帶狀分布。

2.3.4 ?心臟 ?心肌橫縱紋模糊，心肌纖維腫脹，肌漿內(nèi)可見有大量微細(xì)的紅染顆粒，間質(zhì)水腫增寬（圖16），肌間靜脈擴(kuò)張，內(nèi)有大量紅細(xì)胞淤滯（圖17）。

2.3.5 ?肺臟 ?肺臟小靜脈擴(kuò)張淤血。肺毛細(xì)血管壁增厚，毛細(xì)管壁上的毛細(xì)血管擴(kuò)張淤血（圖18、圖19）。

2.3.6 ?脾臟 ?白髓中央動(dòng)脈充血（圖20）;紅髓區(qū)淤血，并有數(shù)量不等的假嗜伊紅白細(xì)胞浸潤（圖21）。

2.3.7 ?腦 ?大腦和小腦中血管內(nèi)有紅細(xì)胞充盈;血管周圍間隙增寬（圖22、圖23）。

2.3.8 ?胸腺 ?可見皮質(zhì)區(qū)有假嗜伊紅白細(xì)胞浸潤（圖24）;髓質(zhì)區(qū)毛細(xì)血管和小靜脈淤血。

2.3.9 ?胰臟 ?實(shí)質(zhì)細(xì)胞顆粒變性。

2.3.10 ?法氏囊 ?未見明顯病變。

2.3.11 ?骨骼肌 ?未見明顯病變。

3 ?小結(jié)與討論

3.1 ?臨床觀察

本次觀察結(jié)果顯示，棉子餅中毒后，病鴨的臨床癥狀主要表現(xiàn)為拉稀、消瘦、關(guān)節(jié)出現(xiàn)畸形、行走不穩(wěn)、與前人[12，13]的觀察結(jié)果相似。懷疑可能是當(dāng)機(jī)體因過食棉子餅而致棉酚中毒后，由于在棉酚的影響下，肝臟、腎臟以及小腸發(fā)生病變，機(jī)體最大的解毒器官、排泄器官和消化器官功能發(fā)生異常，在肝臟中的一系列生化酶促反應(yīng)由于條件的改變而開始降低其反應(yīng)速度，因?yàn)槊薹涌膳c許多功能蛋白和酶結(jié)合，使它們失活，所以機(jī)體便開始進(jìn)入代謝低下的狀態(tài)，包括合成和分解代謝低下，這可能是營養(yǎng)代謝障礙的早期表現(xiàn)。由于合成代謝受阻，蛋白質(zhì)生成困難，加上機(jī)體在不斷耗能，導(dǎo)致機(jī)體開始消瘦;與此同時(shí)，由于棉酚對(duì)腸黏膜的直接損害作用使得腸道黏膜的腸絨毛發(fā)生壞死脫落[9]，腸壁的有效吸收面積縮小，食糜中脂質(zhì)成分和鹽分吸收不全，便成為了天然的“容積性瀉劑”和“油性瀉劑”，通過脂質(zhì)成分的作用使腸道變得潤滑，從而開始出現(xiàn)腹瀉，機(jī)體的水分在腹瀉時(shí)大量丟失，更加重了消瘦的程度。長時(shí)間的腹瀉會(huì)因?yàn)閮?nèi)容物與腸壁間的摩擦而加重腸壁的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致腸絨毛的壞死和脫落越發(fā)嚴(yán)重，這樣一來，惡性循環(huán)建立。腎臟作為機(jī)體最重要的排泄器官，在棉酚的作用下，由于腎小管壁細(xì)胞發(fā)生顆粒變性，影響了原尿的吸收，最后原尿相對(duì)增多，和糞便混在一起后，也可能成為腹瀉的原因之一。由于代謝低下，分解代謝受阻，可能導(dǎo)致下肢無力。從中醫(yī)的角度來說，腎主固，腎虛水泛，則下肢腫脹，這里表現(xiàn)為關(guān)節(jié)腫脹。由于對(duì)跗關(guān)節(jié)的持續(xù)壓迫，導(dǎo)致該處肌腱異常增生。行走不穩(wěn)，可能不是單純的關(guān)節(jié)畸形造成的，還可能是神經(jīng)癥狀的一種表現(xiàn)，也可能是兩種因素共同作用的結(jié)果。

3.2 ?病理組織形態(tài)學(xué)觀察

觀察病變組織切片后發(fā)現(xiàn)肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞顆粒變性，靜脈淤血，臨床特征較明顯的2只鴨肝細(xì)胞發(fā)生空泡變性，中央靜脈缺血，這可能是由于前期的淤血導(dǎo)致中央?yún)^(qū)肝細(xì)胞缺氧相對(duì)于邊緣區(qū)的細(xì)胞缺氧更為嚴(yán)重，加快了中央?yún)^(qū)細(xì)胞腫脹變性的發(fā)展過程，腫脹更加劇烈，肝細(xì)胞體積的不斷增大導(dǎo)致肝竇的間隙不斷縮小，從而加重了邊緣區(qū)的淤血和中央?yún)^(qū)的缺氧，形成惡性循環(huán)。

腎臟主要是以腎小管壁細(xì)胞發(fā)生顆粒變性和間質(zhì)淤血為特征，可能是由于有少量棉酚要經(jīng)尿液排出，但是因?yàn)槠渑判咕徛?，不排除有一定量的棉酚蓄積在腎臟，從而對(duì)腎臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生影響，同對(duì)肝臟的影響相似，這可能就是棉酚對(duì)實(shí)質(zhì)細(xì)胞毒性的體現(xiàn)。因?yàn)榧?xì)胞的腫脹導(dǎo)致局部循環(huán)發(fā)生障礙而淤血，再由淤血加重缺氧，缺氧再加重實(shí)質(zhì)細(xì)胞的變性，最后導(dǎo)致實(shí)質(zhì)器官的壞死而致代謝障礙。

腸的病變主要是腸黏膜的壞死和脫落，這是棉酚對(duì)腸道直接損害作用的結(jié)果。

脾臟的病變雖然不是很明顯，但還是可見有大量假嗜伊紅白細(xì)胞的浸潤，而且有出血跡象，懷疑該處的出血為漏出性出血，因?yàn)橐环矫嫜軆?nèi)長期淤積大量紅細(xì)胞而產(chǎn)生的高壓會(huì)使血管壁通透性升高;另一方面，棉酚吸收入血后，能增強(qiáng)血管壁的通透性，促使血漿和血細(xì)胞向周圍組織滲透，可能使受累組織發(fā)生出血性炎癥[2，4]，所以很可能在這兩個(gè)因素的作用下，有漏出性出血的發(fā)生。

腦中未見明顯病變，只有血管充血的跡象，由此可見該病確實(shí)呈急性經(jīng)過，因?yàn)橛坞x棉酚的酚醛式結(jié)構(gòu)，使得其具有很強(qiáng)的脂溶性，所以棉酚的神經(jīng)毒性有很多相關(guān)報(bào)道[3]，但多在呈慢性經(jīng)過的病例中見到。由于神經(jīng)可能受到被充盈的血管的壓迫，導(dǎo)致鴨出現(xiàn)輕微的神經(jīng)癥狀。行走不穩(wěn)可能是一種表現(xiàn)。

其他臟器的病變表現(xiàn)有些與上述臟器的病變相似，有些甚至沒有任何病變，盡管病變輕微的臟器看似對(duì)機(jī)體的影響很小，但也可能在不斷加速受累器官病變的發(fā)生過程，從而影響機(jī)體的營養(yǎng)代謝過程，造成代謝障礙，使機(jī)體衰竭，抵抗力下降，最終可能導(dǎo)致機(jī)體繼發(fā)感染而死亡。

3.3 ?預(yù)防措施

3.3.1 ?選育無色素腺體棉花新品種 ?通過選育棉花新品種，使棉子中不含或含微量棉酚，提高棉子餅的質(zhì)量并防止家畜中毒。國外于20世紀(jì)50年代培育成功，中國于20世紀(jì)70年代初引進(jìn)并選育出一些無色素腺體的棉花品種，無色素腺體棉花棉仁中的棉酚含量由1.04%降到0.02%，但無色素腺體棉花對(duì)病蟲害的抗性減弱[5，14，15]。

3.3.2 ?脫毒處理棉子餅 ?對(duì)棉子餅的脫毒處理方法有很多種，筆者搜集了其中被廣泛使用的3種介紹如下。①自然發(fā)酵法。將棉子餅加水拌均勻，堆積或裝入缸內(nèi)發(fā)酵2～3 d，當(dāng)棉子餅具有酸、香、酒味后即可飼用[1，2]。②硫酸亞鐵處理法。用2%硫酸亞鐵水溶液浸泡棉子餅6 h，濾去藥液，再用清水淘洗數(shù)次，即可達(dá)到脫毒目的[1]。③生石灰加硫酸亞鐵脫毒法。取生石灰0.5 kg，硫酸亞鐵適量（帶殼棉子餅用0.5 kg，棉仁餅用0.25 kg），加水100 kg，充分?jǐn)嚢枞芙夂箪o置5 min，取其上清液備用。然后稱取50 kg粉碎的棉子餅，加入上述配制好的水，充分拌勻后堆積30 min。用此法脫毒既經(jīng)濟(jì)又安全，效果較好[2，5]。

3.3.3 ?嚴(yán)格控制用量 ?為了安全起見，棉子餅在飼料中的添加量不要超過5%。

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