公豬的精液采集、評價和處理

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公豬的精液采集、評價和處理

(廣東省河源市源城區(qū)埔前動物衛(wèi)生監(jiān)督分所 517000)

袁克金

種公豬精液的正確采集、鑒定和處理是豬繁育配種的關(guān)鍵技術(shù)。種公豬采精前的爬跨訓(xùn)練是必要的，應(yīng)確保合適的采精時間、采精方法和精液品質(zhì)評價方法，還需正確地處理新鮮精液。

一般未成熟的公豬對環(huán)境中的行為刺激特別敏感。觸覺刺激對公豬行為發(fā)育尤為重要。在隔離飼養(yǎng)、缺乏觸覺刺激環(huán)境下長大的公豬青春期到來較遲，性欲較差，交配能力也較差。隨著公豬的成長，人為的干預(yù)可以促使公豬產(chǎn)生接近或者逃避反射。一旦公豬留作種用，有許多因素可以影響到射精的時間和精子的質(zhì)量，包括：采精頻率、采精地點、采精前公豬的準(zhǔn)備工作等。在種公豬的管理上，推擠沖撞種公豬不利于將來采精工作的進行。

1種公豬采精前的訓(xùn)練

一般后備公豬在體成熟時才能進行采精爬跨調(diào)教，年齡在8～10月齡，體重在90～120 kg[1]。爬跨臺畜采精的關(guān)鍵在于：必須在早期就開始對公豬進行訓(xùn)練，采精地點必須能讓公豬立即注意到采精的臺畜；公畜必須將采精地點和過程與采精的愉悅聯(lián)系起來。當(dāng)公豬看到一個類似豬的不動的物體時，可以刺激公豬產(chǎn)生爬跨反射。所以，采精場所必須干凈，而且除了采精臺畜以外，不存在能分散公豬注意力的其他東西。當(dāng)然，當(dāng)采精臺畜和地點使用時間久后，會散發(fā)出強烈的氣味，此氣味也可以刺激公豬，加速爬跨的過程。年幼公豬對臺畜的注意力時間較短暫，爬跨通常發(fā)生在訓(xùn)練初期的5～7 min。若此時公豬對臺畜沒有任何興趣，則此次訓(xùn)練中，公豬可能不會出現(xiàn)爬跨行為。

在訓(xùn)練過程中，接觸臺畜前5～10 min給公豬注射PGF2α(20 mg/只，肌肉注射)可以促進爬跨行為的出現(xiàn)。若公豬將采精地點或采精過程與不好的感覺(如害怕、疼痛等)相聯(lián)系，則訓(xùn)練會變得比較困難。采精過程中的不愉快的記憶會降低種公豬的性活動。所以，采精過程中避免粗暴采精和噪聲是訓(xùn)練成功的關(guān)鍵。年幼的未有過自然交配經(jīng)歷的公豬是最容易訓(xùn)練的。年齡較大且有過自然交配經(jīng)歷的公豬，其訓(xùn)練時間會較長，且成功率較低。公豬開始訓(xùn)練的時間和訓(xùn)練的成功率之間是呈負相關(guān)的。若在10月齡之前開始訓(xùn)練，成功率可達90%；但在10～18月齡開始訓(xùn)練，則成功率僅為70%。

2精液的采集

精液采集最常用的方法是手套采精。但目前已經(jīng)出現(xiàn)了自動采精技術(shù)，且逐漸在推廣。不管是哪一種技術(shù)，都必須通過擠壓陰莖頭來促進陰莖勃起和射精。在陰莖勃起后，減小陰莖末端的壓力有利于精子的射出。在采精前要先清除包皮中的液體，包皮剃毛能極大地減少精液污染。

采精時降低精液污染的措施為：①包皮口周圍去毛；②使用雙層手套，在公豬準(zhǔn)備過程結(jié)束后將外層手套扔掉，保證抓握陰莖的手套是清潔的；③為了減少精液的污染、降低交叉污染的風(fēng)險，在采精過程中應(yīng)使用一次性手套或進行手部消毒；④清潔包皮口及其周圍區(qū)域；⑤在采精前清洗包皮，防止包皮內(nèi)殘留液體；⑥水平持握陰莖，以最大程度減小包皮中的液體造成精液和精液采集容器污染；⑦射精初期的部分和采精管中的凝膠部分需要丟棄；⑧在將精液送到實驗室之前需要處理橡膠圈和過濾器/紗布[2]。

需要說明的是，應(yīng)激和過度采精是導(dǎo)致豬精子質(zhì)量不佳的主要原因，其中熱應(yīng)激是最常見的原因。熱應(yīng)激可以影響生精過程，導(dǎo)致精子運動力下降，形態(tài)異常的精子比例升高，精子總數(shù)減少。在熱應(yīng)激后的10～14 d，射出的精液就出現(xiàn)變化，此種變化可以持續(xù)幾周時間。所以，公豬的環(huán)境溫度應(yīng)該保持在27 ℃以下，50%的相對濕度，這樣就可以有效避免熱應(yīng)激。

3精液的評價

目前，已經(jīng)能對精液的質(zhì)量進行常規(guī)的體外檢查。很多檢查都可以診斷出質(zhì)量明顯不佳的精子。在豬的人工授精產(chǎn)業(yè)中，標(biāo)準(zhǔn)的檢查內(nèi)容包括外觀、精子運動性、精子形態(tài)、精子濃度以及射精量。

外觀評估：每一次采精后，都需要進行外觀評價，包括透明度和顏色。正常情況下，精液應(yīng)該呈灰白色，外觀呈奶樣。異常顏色包括棕色、紅色、黃色，分別表示受到了膿液、血液、尿液的污染，此精液不能用于人工授精。

精子的運動性和形態(tài)學(xué)：運動性一般通過計數(shù)精液中有較強運動力的精子所占的比例來表示。在精液的評估中，精子的運動性是最常用的檢測指標(biāo)。它既可以人為估測，也可以通過計算機輔助精液分析(CASA)系統(tǒng)來進行檢測。人為估測，即在放大200或400倍的顯微鏡下觀察精子的運動性。一般來說，精子的運動力是評估精子活力的指標(biāo)，而不代表其受精能力。公豬的精子運動力一般在80%，甚至更高。之前的研究表明，精子運動性≥60%時，若母豬的繁殖率下降，可排除精子的原因。

評價精子形態(tài)的方法有干片法和濕片法。干片法是利用染料使細胞輪廓變得更加明顯，再置于顯微鏡的油鏡下觀察。濕片法是利用細胞本身進行對比，再借助顯微鏡或者CASA系統(tǒng)利用內(nèi)部對比(相差干涉或者微分干涉對比)對固定的單層精子進行評估。正常情況下，異常精子的比例應(yīng)低于20%～25%。

精子濃度和精子總量：常通過分光光度計測量精液的透明度或CASA計數(shù)精子數(shù)量來測量不含凝膠的精液中精子的濃度。未經(jīng)處理的精液一般過于濃稠，儀器難以進行測量。所以會先用等滲液進行稀釋，根據(jù)公豬精液的測量要求進行提前校正；使用CASA系統(tǒng)時則要提前將所有的精液參數(shù)輸入系統(tǒng)。這兩種方法都是通過血細胞計數(shù)的方法來進行測量的，但由于過程繁瑣、耗時較長而未在臨床普及。計算精子總數(shù)需要先測量精液的體積。一般多假設(shè)精液的密度為1 g/mL，通過精液的重量計算得出體積，再通過體積乘以濃度即可計算出精子總數(shù)。

其他繁殖力檢查：精子在獲得受精能力之前會經(jīng)歷一系列的生化、代謝和分子變化。目前有多種檢查，包括：精子結(jié)合能力、精子低滲膨脹性、滲透壓抗性、細胞膜/細胞器檢查以及精子或精清的生化和分子檢查。但這些檢查在養(yǎng)豬業(yè)中的應(yīng)用仍有待考察。

4精液的處理

精液稀釋液：精液稀釋液可以為精液的保存提供營養(yǎng)和代謝支持。葡萄糖是主要的供能物質(zhì)；電解質(zhì)參與調(diào)節(jié)滲透壓；緩沖液可以中和代謝廢物，維持pH；抗生素則用于減少細菌污染。儲存時間越長，受精能力越低，而降低的速度主要取決于稀釋液的成分。儲存精液保持受精能力的時間長短受很多因素影響，包括種公豬本身、精液稀釋液組成、精子濃度、儲存溫度。不管使用何種稀釋液，都需要根據(jù)保質(zhì)期內(nèi)要求的精子濃度來決定稀釋液的最大使用量。

精液稀釋過程：大部分的精液稀釋液已商品化，以粉末的形式銷售。使用前需先用純凈水來溶解，配制后需要留足夠的時間讓稀釋液平衡，穩(wěn)定其pH和滲透壓，之后才能用于稀釋精液。平衡過程一般需要45～60 min。在稀釋過程中，要使稀釋液和精液之間的溫差盡可能的小，這樣有利于保護精子的活力?？梢酝ㄟ^檢測精液和稀釋液的溫度，調(diào)整稀釋液的溫度至精液溫度的±2 ℃。用于人工授精的精液濃度為(25～65)×106/mL，體積為65～80 mL。稀釋后的精液要冷卻保存在15～18 ℃的環(huán)境中。目前，在養(yǎng)豬業(yè)中所有的精液均通過此途徑用于人工授精，而冷凍精液由于繁殖率較低，很少用于臨床。

參考文獻5

[1]盧剛瓊，陳吉紅.豬人工授精中的種公豬調(diào)教及采精技術(shù)[J].云南畜牧獸醫(yī)，2011(2)：12.

[2]趙德明，張仲秋，周向梅，等.豬病學(xué)(第10版)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2014：348.

作者簡介：袁克金(1981-)，男，本科，獸醫(yī)師，主要從事動物防疫工作。

收稿日期：2015-02-12

中圖分類號：S828.3

文獻標(biāo)識碼：B

文章編號：1005-2739(2015)03-0027-02