兒科臨床分離腸球菌的耐藥性監(jiān)測及大環(huán)內酯類耐藥機制研究

楊豐

(新蔡縣人民醫(yī)院 檢驗科 河南 新蔡 463500)

腸球菌為條件致病菌，可引起泌尿系感染、心內膜炎、腹腔感染、傷口感染等嚴重感染［1］。隨著抗菌藥物及免疫抑制劑應用的日益廣泛，腸球菌感染率、耐藥性不斷增強，已成為醫(yī)院感染的主要致病菌［2］。為監(jiān)測兒科臨床分離腸球菌的耐藥性，并初步探討腸球菌對大環(huán)內酯類耐藥機制，現(xiàn)收集新蔡縣人民醫(yī)院兒科2011 年12 月至2012 年12 月收治的120 例腸球菌感染患兒的臨床資料，結合文獻報道如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 收集2011 年12 月至2012 年12 月兒科收治的120 例腸球菌感染患兒的臨床資料，從120 例送檢標本中分離出糞、屎腸球菌，經VITEK 全自動生物分析系統(tǒng)、ATB 自動細菌鑒定儀進行細菌鑒定后確診為腸球菌。送檢標本包括尿液(51 例，42.5%)、糞便(32 例，26.7%)、血液(20 例，16.7%)、膿液(11 例，9.2%)、痰(6 例，5.0%)。

1．2 檢驗方法 抗菌藥敏感性試驗采用Kirby －Baner(KB)法［3］。對120 株腸球菌進行氨芐青霉素、紅霉素、環(huán)丙沙星藥物敏感試驗。MH 培養(yǎng)基及藥敏紙片購自博文生物醫(yī)藥公司，質控菌株ATCC2012929 由北京天壇藥品生物制品鑒定所提供。根據(jù)KB 法藥敏試驗結果，將對紅霉素有耐藥性的菌株定義為觀察組，非耐藥性菌株為對照組，對兩組菌株采用PCR 方法檢測ermB 基因，引物為5’－ GAAAAGGTACTCAACAAAATA －3’。PCR 產物大小為639 bp。50 μg 反應體系中，DNA 模板液5 μl，KCl 濃度50 mmol/L、(NH4)2SO440 mmol/L、Tris － HCl 50 mmol/L、MgCl222.5 mmol/L。94 ℃預變性5 min 后，94 ℃變性30 s，50 ℃退火30 s，72 ℃延伸1.5 min，35 個循環(huán)后72 ℃再延伸3 min。擴增產物瓊脂糖凝膠電泳，溴化乙錠染色成像。

1．3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 17.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)處理分析，定性資料的組間比較采用χ2檢驗，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2．1 耐藥性統(tǒng)計 患兒腸球菌對氨芐青霉素、紅霉素、環(huán)丙沙星的耐藥性分別為21.7%(26/120)、65.8%(79/120)、33.3%(40/120)，經兩兩比較差異均具有統(tǒng)計學意義(P ＜0.05)。

2．2 ermB 基因檢測結果 對紅霉素耐藥的79 株腸球菌(觀察組)中ermB 基因陽性株57 株，陽性率72.2%，非紅霉素耐藥菌41 株(對照組)中ermB 基因陽性1 株，陽性率2.4%，組間比較差異具有統(tǒng)計學意義(P ＜0.05)。

3 討論

調查顯示，由腸球菌引起的院內感染已位居第2 位，占所有院內感染病因的12%［4］。由于腸球菌本身具備固有耐藥和獲得性耐藥特征，使其對多種抗菌藥物具有耐藥性，給臨床治療腸菌感染帶來了一定的困難，因此，長期進行腸球菌耐藥性監(jiān)測，分析耐藥變化特點十分必要。

本次統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，腸球菌對紅霉素的耐藥性最高，遠高于氨芐青霉素、環(huán)丙沙星，與國內相關報道接近。查閱相關文獻示，不同地區(qū)腸球菌的耐藥性也有差異［5］。經過PCR 檢測ermB基因示，對紅霉素耐藥的79 例菌株中有57 株ermB 基因陽性，而非耐藥的41 株菌株中有1 株ermB 基因陽性，組間比較差異具有統(tǒng)計學意義(P ＜0.05)。ermB 基因是球菌耐藥性的常見耐藥基因，其編碼的23 Sr RNA 甲基化酶致靶位改變從而發(fā)揮出耐藥性［6］。由結果分析，耐藥性與非耐藥性腸球菌的ermB基因陽性率差異具有統(tǒng)計學意義，腸球菌對大環(huán)內酯類耐藥性可能與ermB 有關。

綜上所述，兒科病房患者腸球菌對紅霉素的耐藥性明顯高于氨芐青霉素及環(huán)丙沙星，耐藥菌株中ermB 基因的陽性率較高，可能是導致腸球菌對紅霉素耐藥的機制之一。

［1］汪玲．兒科臨床分離腸球菌的耐藥性監(jiān)測及大環(huán)內酯類耐藥機制研究［J］．中華檢驗醫(yī)學雜志，2008，12(9):984 －988．

［2］吳慶．腸球菌臨床感染特點及耐藥機制研究［J］． 河南醫(yī)學研究，2010，14(17):133 －137．

［3］劉祥琴．2011 年四川省人民醫(yī)院分離致病菌的分布特點和耐藥分析［J］．實用醫(yī)院臨床雜志，2012，15(6):3345 －3346．

［4］喬俊英．2008 年我院兒科病房病原菌檢測及耐藥性分析［J］． 中國婦幼保健，2011，12(22):545 －548．

［5］余素飛．肺炎鏈球菌對大環(huán)內酯類的耐藥機制研究［J］．中華醫(yī)院感染學雜志，2012，19(6):1222 －1223．

［6］姚杰．臨床分離腸球菌的耐藥性分析及相關耐藥機制的研究［J］．安徽醫(yī)科大學，2011，14(5):112 －113．