不同產地白術多糖含量考察

張旭

摘要：目的 分析測定浙江、安徽、河北不同產地白術的多糖含量。方法 用乙醇除去干擾物質后采用水浸提法提取多糖，以苯酚-硫酸比色法測定多糖的含量。結果 多糖含量最高的為浙江白術，其次為安徽白術，再次為河北白術。結論 浙江、安徽、河北三產地白術原藥材中多糖含量有存在明顯的差異。

關鍵詞：白術；多糖；苯酚-硫酸比色法

菊科植物白術有健脾益氣，燥濕利水，止汗，安胎等功效，常用于治療脾虛食少，腹脹泄瀉，痰飲眩悸，水腫，自汗，胎動不安[1]。白術主要含揮發(fā)油、內酯類和多糖類成分[2]。由于多糖具有獨特療效的物質基礎，白術多糖在抗腫瘤、抗衰老、增強機體免疫力、降血糖等方面的均有作用[3～5]。白術多為人工栽培品，分布廣泛，主產于浙江、安徽、湖南、湖北、江西、河北等地。其中，浙江的于潛、新昌、天臺等地為傳統(tǒng)的地道產區(qū)。已有研究表明，白術隨生長期或者生長地不同，藥材中活性成分的含量不同[6]。近年來，國內外對白術的需求量大增，傳統(tǒng)產地的白術供不應求，因此不同地區(qū)的白術培植得到了大力發(fā)展。研究不同產地白術中的活性成分對于白術的研究與醫(yī)用具有重要的意義。本文將采用硫酸-苯酚比色法測定產地為浙江、安徽和河北的白術多糖的含量，為評判不同產地白術品質及合理用藥提供科學依據。

1 材料與方法

1.1儀器與試藥 采用的主要儀器為雙光束紫外-可見分光光度計IU-1901（日本島津）。使用的藥品試劑包括：80%乙醇、硫酸鋅、氫氧化鋇、硫酸、苯酚（均為分析純）、浙江白術、安徽白術、河北白術（由天津中醫(yī)藥大學提供）、葡萄糖對照品（中國藥品生物制品檢定，批號：110833-200503）。

1.2方法

1.2.1供試品溶液的制備 稱取浙江、安徽、河北三產地白術藥材粉末各0.5g，置于平底燒瓶中，分別加入80%乙醇50ml，加熱微沸，計時1h停止，放置室溫時濾過，濾渣中加入80℃水10ml，浸提1h，取出，趁熱濾過，所得濾渣與第一次濾渣合并，加80℃水10ml，繼續(xù)浸提1h，取出趁熱過濾，合并2次所得濾液。將所得濾液轉移至100ml容量瓶中，加蒸餾水定容。

1.2.2對照品溶液的制備 精密稱取經五氧化二磷減壓干燥12h的無水葡萄糖對照品50mg，加蒸餾水使溶解，轉移至100ml容量瓶中，定容，制成每1ml含無水葡萄糖0.5mg的溶液，作為對照品溶液。

1.3方法學考察

1.3.1線性關系考察 精密量取質量濃度為0.5mg/ml的對照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，分別置于具塞試管中，加入蒸餾水于各試管補至2ml溶液，然后精密加入50g/L的苯酚溶液，搖勻，迅速精密加入5ml濃硫酸，振搖，待其反應10min，置水浴中保溫20 min，取出冰浴5min，于489nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程為Y=73.234X+0.0053，r2=0.998，表明對照品溶液在濃度范圍為0～8μg/ml內呈現(xiàn)良好的線性關系，見圖1。

1.3.2精密度試驗 取河北產地白術藥材提取多糖供試品溶液，按供試品溶液的制備方法處理并適當稀釋，于489nm波長處測定吸光度。6次測量的相對標準偏差RSD值為3.1%，表明儀器精密度良好。

1.3.3重復性試驗 取浙江產地白術藥材提取多糖供試品溶液，按供試品溶液的制備方法處理并適當稀釋，于489nm波長處測定吸光度。RSD為3.5%，表明實驗的重復性良好，見圖2。

1.3.4穩(wěn)定性試驗 取安徽產地白術藥材提取多糖供試品溶液，按供試品溶液的制備方法處理并適當稀釋，分別在溶液配好并放置0、5、10、20、40、60min后測定多糖的含量，結果見圖2，RSD為1.3%，表明樣品用硫酸-苯酚法顯色后在1h內具有良好的穩(wěn)定性。

1.3.5加樣回收率 稱取已知含量的安徽產地白術藥材粉末6份，0.5000g/份，分別加入葡萄糖對照品適量，按供試品溶液制備方法制備，于489nm波長處測定吸光度。平均回收率為98.74%，RSD為0.68%。

2 結果

取浙江、安徽、河北三產地白術藥材提取多糖供試品溶液，按供試品溶液的制備方法處理并適當稀釋，于489nm波長處測定吸光度，計算出樣品多糖的含量，見表1。

3 討論

我國對白術的使用歷史久遠，不同地域對其稱謂也有所不同。產于浙江省于潛地區(qū)的白術又稱為于術，品質最佳為道地藥材[7，8]。于術又名于潛術、于白術、煙術。浙白術泛指產于浙江地區(qū)的白術。種術則指產于安徽地區(qū)的白術。平術指產于湖南平江地區(qū)?；招g指產于安徽省歙縣即舊時徽州，品質亦優(yōu)。白術最早記錄于《神農本草經》，被列為上品，但和蒼術一直通用，延續(xù)至宋代才有所區(qū)分。我國古代大量醫(yī)藥巨著對不同產地白術的特點早有記載及區(qū)分。如《本草綱目拾遺》也有記載："于術亦野生，出于潛，產縣治龍脈土上者……產他處，內或無點純白，或有黃點，總不及龍脈上產者為商品。"由此可見，我國古代醫(yī)者對于不同地域，不同品類白術屬性的認知與區(qū)分十分重視。

多糖類成分在強酸作用下水解生成單糖，并迅速脫水生成糠醛，糠醛與酚性物質如苯酚縮合成穩(wěn)定的有色化合物，并且有色物生成量與多糖濃度存在定量關系，這樣用分光光度法在適當波長（489nm） 處可以得到總糖含量，結果準確，重現(xiàn)性好，簡便易行，應注意控制硫酸、苯酚加入時的速度，速度不同，其顯色的程度也不同[7]。本實驗測定方法的原理是先用80%乙醇提取以除去單糖、低聚糖、苷類及生物堿等干擾性成分，再用水提取其中的多糖類成分。多糖類成分在硫酸作用下，先水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛衍生物，然后和苯酚縮合成有色化合物，用紫外-可見分光光度法于適當波長處測定其多糖含量?？疾炝瞬煌a地白術藥材多糖含量的差異性，為了更全面地認識和利用白術這一珍貴的植物資源， 同時也為探討多糖結構與功能的關系，以期為白術多糖的進一步開發(fā)利用提供參考。由此實驗可得出結論浙江、安徽、河北三產地白術原藥材中多糖含量存在明顯的差異，含量最高的為地道產區(qū)的浙江白術，符合"一脈相承"、"沿革變遷"的特點[9]。

參考文獻：

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[3]季宇彬，高世勇.多糖的研究進展[J].中草藥，2003，34（增刊）：45-53.

[4]湯新江.白術多糖對小鼠免疫功能的影響[J].中醫(yī)研究，1998，11（2）：79.

[5]單俊杰，田庚元.白術多糖復合物AMPB的理化性質及降血糖活性研究[J].藥學學報， 2003，6（6）：38.

[6]壽旦，戴詩文，章建民，等.白術微管液相色譜含量測定方法及在種質資源調查中的應用[J].中華中醫(yī)藥學刊，2009，27（1）：61-62.

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[8]田蘭，畢升順，孫穩(wěn)健，等.白術的化學模式識別[J].中國中藥雜志，2003，28 （2）：143.

[9]張鐵軍.中藥質量認識與評價[J].中草藥，2011，42（1）：1-9.

編輯/成森