6例維吾爾族患者A3B亞型檢測與血清學(xué)分析

宋小川，李凌波

(1.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科，烏魯木齊 830011；2.長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司，長春 130102)

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·臨床探討·

6例維吾爾族患者A3B亞型檢測與血清學(xué)分析

宋小川1，李凌波2△

(1.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科，烏魯木齊 830011；2.長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司，長春 130102)

目的 對新疆維吾爾族患者中A3B亞型進行血清學(xué)檢測并分析，為臨床安全輸血提供借鑒。方法 采用微柱凝集技術(shù)對住院患者進行常規(guī)血型檢測，對正定型為AB型，且紅細胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”凝集的血型進一步結(jié)合血清學(xué)吸收放散試驗等進行鑒定。結(jié)果 在45 326例維吾爾族患者中檢出AB型8 450例，其中紅細胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”凝集6例，結(jié)合唾液ABH血型物質(zhì)檢測及吸收放散等試驗最終判斷該6例為A3B亞型。結(jié)論 A3B亞型由于其A抗原性較弱，正定型容易誤定為“B型”，為避免誤判，血型鑒定一定要做正反定型，并注意觀察凝集強度，防止亞型漏檢給臨床輸血帶來隱患。

A3B亞型； 微柱凝集技術(shù)； 分析； 輸血

ABO血型亞型是表型，主要是經(jīng)血型血清學(xué)試驗以抗原性弱為主要特征的多種表型，A1和A2是血型血清學(xué)方法確定的最重要的A型紅細胞亞型，其余還包括A的弱亞型A3、Ax、Am、Ael等，其A抗原表達逐漸減弱，A3型紅細胞的最大特征是混合視野凝集，即A3細胞與抗-A和大多數(shù)抗-AB孵育后出現(xiàn)一些由數(shù)個紅細胞形成的小凝集塊，并被絕大部分游離的非凝集紅細胞包圍，在微柱凝集技術(shù)則表現(xiàn)為離心后凝集的紅細胞位于凝膠頂部而陰性紅細胞沉于微柱凝膠的尖底部的雙群(混合凝集)形式，A3B即是AB血型的一種亞型[1-3]。ABO血型的表型，通常是由正反定型二者決定的，正定型檢測紅細胞抗原，反定型檢測人血清中抗體，由于部分ABO亞型由于其抗原性弱常表現(xiàn)為正定型凝集強度弱、混合視野凝集或正反定型不相符合，因此只有正反方向ABO血型抗原和抗體的同時檢測，才能正確完整地進行ABO血型定型。本研究自2013年1月至2015年1月采用微柱凝集技術(shù)對45 326例維吾爾族患者血液標(biāo)本進行ABO血型正反定型，共檢出AB型8 450例，并對其中6例紅細胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”的血型進一步結(jié)合血清學(xué)吸收放散試驗等進行鑒定，最終判斷為A3B亞型，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 45 326例血液標(biāo)本來自新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2013年1月至2015年1月收治的維吾爾族住院患者，其中男24 672例，女20 654例，年齡0～87歲。AB型中發(fā)現(xiàn)6例其紅細胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”凝集，需進一步結(jié)合血清學(xué)吸收放散試驗等進行鑒定。

1.2 試劑與儀器 ABODE血型檢測卡(微柱凝膠)，ABO血型反定型試劑盒(人血紅細胞)，由長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)；抗-A、抗-B血型定型試劑(單克隆抗體)由北京金豪制藥股份有限公司生產(chǎn)；單克隆抗-AB、抗-H、抗-A1由德國Bio-Rad Medical Diagnostics GmbH公司生產(chǎn)，以上所有試劑均在效期內(nèi)使用。人血清抗-A、抗-B及A1B、A2B型紅細胞試劑由本科室自制。BYL型血型血清學(xué)多用離心機由長春博研醫(yī)學(xué)生物儀器公司生產(chǎn)；電熱恒溫水槽由上海申賢恒溫設(shè)備廠生產(chǎn)。

1.3 方法 樣本ABO血型鑒定，采用微柱凝膠卡式法及試管法，試管法分別在不同溫度條件下檢測，卡式法按廠家說明書操作，試管法按文獻[4]操作；紅細胞吸收放散試驗、唾液中HAB血型物質(zhì)測定均按文獻[4]操作。

2 結(jié) 果

2.1 ABO血型鑒定(微柱凝集卡式法) 6例血樣經(jīng)卡式法檢測，正定型均顯示為AB型，且6例樣本紅細胞均與抗-A出現(xiàn)“雙群”(混合凝集)形式，反定型均為AB型。

2.2 ABO 血型鑒定及H 抗原檢查(試管法) 見表1。

表1 6例患者ABO血型鑒定及H抗原檢查(試管法)

注：“mf”為混合視野凝集。

2.3 紅細胞吸收放散試驗 6例患者樣本均取洗滌3次后的紅細胞懸液(1 mL)分別與等量人血抗-A、抗-B血清混合，4 ℃吸收1 h，洗滌后經(jīng)56 ℃熱放散；取放散液與4% A1型及B型紅細胞懸液反應(yīng)發(fā)生凝集，證實患者紅細胞上存在A及B抗原。

2.4 唾液中H及AB血型物質(zhì)測定 6例患者唾液中，2例未測到A、B物質(zhì)，只含有H物質(zhì)，為非分泌型；4例唾液中有A、B及H物質(zhì)，為分泌型。

2.5 紅細胞H物質(zhì)活性強度測定 將6例患者紅細胞及正常成人A1、B、O、A1B、A2B型紅細胞分別與抗-H反應(yīng)，結(jié)果凝集強度分別為+++、-、++、++++、-、+。

3 討 論

血型是人類的一種遺傳性狀，當(dāng)前已發(fā)現(xiàn)的人類血型系統(tǒng)達到33個、血型抗原集合7個[5-6]。ABO血型系統(tǒng)是與人類關(guān)系最密切的一個，ABO血型的遺傳規(guī)律和分布能夠很好地反映出種族的延續(xù)和早期人類的遷徙情況，對不同地區(qū)人群血型的研究，在科學(xué)地解釋某些疾病高發(fā)的相關(guān)問題及對疾病的預(yù)防和研究等有著重要的意義。維吾爾族是新疆地區(qū)最主要的少數(shù)民族，關(guān)于維吾爾族ABO血型分布的狀況已有諸多研究，有研究顯示，烏魯木齊地區(qū)健康維吾爾族體檢者ABO血型表型分布是A>B>O>AB，其中AB型最少，占16.46%[7]。本研究檢測了維吾爾族患者45 326例，檢出AB型8 450例，占18.64%，與上述報道類似。但在檢出的AB型中，經(jīng)卡式法檢測發(fā)現(xiàn)有6例正定型紅細胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”的格局，反定型正常，排除人為及疾病因素后，懷疑為ABO亞型，遂通過試管法定型并結(jié)合血清學(xué)吸收放散試驗等進行了驗證。

在ABO血型亞型的鑒定中，一般可根據(jù)受檢者紅細胞抗原與相應(yīng)血清抗體反應(yīng)的強弱、血清中抗體的特異性及分泌型人血型物質(zhì)的性質(zhì)及量來判斷。在本試驗，6例樣本紅細胞與試管法中單克隆抗-A在4 ℃、室溫、37 ℃均發(fā)生弱凝集(混合凝集)，說明其紅細胞上存在A抗原(吸收放散試驗亦證實)，唾液型物質(zhì)測定中也有4例分泌型證實含有A、B及H物質(zhì)，可見6例樣本均應(yīng)為AB型而不是B型，這也與反定型結(jié)果一致。A3(或A3B)型最重要特征就是混合視野凝集外觀，即A3(或A3B)紅細胞與抗-A混合后出現(xiàn)一些由數(shù)個紅細胞形成的小凝塊，并被絕大部分游離的非凝集紅細胞包圍，少部分A3(或A3B)型人的血清中含有抗-A1。本試驗研究顯示，發(fā)現(xiàn)的6例患者均是紅細胞與抗-A混合后出現(xiàn)混合視野(或卡式法的雙群)，但血清中均含有抗-A1，只要能分辨弱凝集與混合視野凝集，在正反定型中已可初步定為A3B亞型。

A2B是AB型的一個最常見的亞型，其與A3B亞型血清學(xué)特征一致的是紅細胞上均不含A1抗原，僅含A抗原，血清中可能含有抗-A1抗體。二者主要區(qū)別即在于紅細胞與抗-A反應(yīng)的強度及是否存在混合凝集視野，有研究認為這應(yīng)與不同亞型紅細胞上的A抗原表達有關(guān)[8]。紅細胞H物質(zhì)活性強度測定可以幫助部分鑒別ABO亞型，常見的ABO血型成人紅細胞H抗原性從強到弱依次順序為O>A2>B>A2B>A1>A1B，而A3≥A2。本試驗結(jié)果顯示，6例患者紅細胞及健康成人A1、B、O、A1B、A2B型紅細胞分別與抗-H反應(yīng)，H抗原性從強到弱依次為O>患者紅細胞>B>A2B>A1=A1B，由此也可判斷樣本非A2B，而為A3B亞型。

A3B亞型由于其A抗原性較弱，正定型容易誤定為“B型”，引起ABO血型的誤判[9]。尤其需注意的是，A3B亞型血型定型更容易被定為AB型，在不做反定型情況下，如血清中出現(xiàn)了抗-A1抗體，輸血輸入正常AB型血液也會引起溶血性輸血反應(yīng)，威脅患者健康[10]。研究認為，對于諸如此類抗原減弱的患者必須認真咨詢其血型，并進行吸收放散試驗、唾液型物質(zhì)檢測，監(jiān)測紅細胞表面H抗原強度、紅細胞與抗-A、抗-B、抗-AB的反應(yīng)情況，甚至做ABO血型基因鑒定確定血型，并保證同型輸血或輸入O型紅細胞，以保障患者輸血安全[11-12]。

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吉林省科技發(fā)展計劃資助項目(20150307011YY)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.15.044

A

1672-9455(2015)15-2245-03

2015-02-25

2015-04-15)

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