XN-1000希森美康對孕婦外周靜脈血分析提示與細胞涂片染色分析的相關(guān)性

傅遠碧(重慶市第五人民醫(yī)院檢驗科 400062)

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·論 著·

XN-1000希森美康對孕婦外周靜脈血分析提示與細胞涂片染色分析的相關(guān)性

傅遠碧(重慶市第五人民醫(yī)院檢驗科 400062)

目的 探討XN-1000希森美康細胞分析儀對孕婦外周靜脈血白細胞分類計數(shù)、有核紅細胞計數(shù)分析提示與相關(guān)細胞涂片染色人工分析結(jié)果相關(guān)性及意義。方法 采用XN-1000型希森美康細胞分析儀對婦產(chǎn)科采集的280份外周靜脈血進行白細胞分類計數(shù)、有核紅細胞計數(shù)分析，同時對應(yīng)外周靜脈血標本進行細胞涂片染色分析，比較儀器分析和細胞染色人工分析結(jié)果。結(jié)果 儀器分析重復(fù)性良好，儀器分析和細胞染色人工分析具有較高的相關(guān)性，報警提示結(jié)果和細胞染色人工分析陽性結(jié)果特異性大于95%，靈敏度100%，陽性預(yù)測值大于90%，陰性預(yù)測值100.00%。結(jié)論 XN-1000希森美康細胞分析儀分析報警提示可以有效篩選陽性標本，同時對陽性標本需要細胞染色人工分析，避免假陽性結(jié)果。

XN-1000希森美康細胞分析儀； 細胞計數(shù)； 有核紅細胞； 白細胞； 鏡檢

血細胞分析儀器在近代醫(yī)學檢驗中發(fā)揮著重要的作用，具有科學、準確、快速等特點[1-2]。XN-1000希森美康細胞分析儀是希森美康公司最新一代的血細胞分析儀器，于2012 年11 月23 日獲得美國食品和藥物管理局的批準，相比于較早一代的XE系列的細胞分析儀，XN-1000希森美康細胞分析儀在細胞分析方法、通道、試劑方面作了一些調(diào)整，各類細胞分析的通道和試劑都作了相應(yīng)的改進，其中包括白細胞分類和有核紅細胞計數(shù)[3]。有核紅細胞亦稱作幼稚紅細胞，健康成人外周血中幾乎不存在，如有出現(xiàn)提示疾病現(xiàn)象的存在，比如溶血性貧血、造血系統(tǒng)惡性疾病等[4]。白細胞分類計數(shù)在醫(yī)學檢驗中屬于常規(guī)檢測，可以提供血液中各類白細胞數(shù)量和形態(tài)方面信息，為疾病篩查和診斷提供依據(jù)。對于孕婦特別是孕周大于10周的孕婦，因為特殊的生理情況，上述兩項內(nèi)容的檢測可能出現(xiàn)非病理的陽性結(jié)果，因此對于其結(jié)果的檢測具有重要的意義。此次研究主要內(nèi)容為對孕周大于10周的孕婦采用XN-1000希森美康細胞分析儀對外周血進行分析，并和細胞涂片染色人工計數(shù)進行比較，探討XN-1000希森美康細胞分析儀在白細胞和有核紅細胞計數(shù)陽性結(jié)果報警提示與細胞涂片染色人工分析結(jié)果相關(guān)性，同時對孕婦外周血陽性結(jié)果的意義進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年3～9月本院婦產(chǎn)科孕周大于10周的體檢者280例,真空采集研究對象的靜脈采血2 mL，采用濃度為1.5～2.2 mg/mL的二乙胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝，血液和抗凝劑及時混勻待測。

1.2 儀器 XN-1000型希森美康細胞分析儀及其相應(yīng)的分析試劑、質(zhì)控品、校準品(日本Sysmex 公司生產(chǎn))；Olympus光學顯微鏡(日本奧林巴斯生產(chǎn))；瑞氏-姬姆薩染液(天津市賽瑞達生物工程有限公司生產(chǎn))。

1.3 方法

1.3.1 血液采集后4 h內(nèi)進行分析。儀器分析如下：(1)首先對XN-1000型希森美康細胞分析儀進行校準，待儀器穩(wěn)定正常進行樣品測定。(2)細胞分析儀對白細胞分類和有核紅細胞計數(shù)的重復(fù)性進行分析，考察儀器分析的精密度。(3)細胞分析儀對待測樣品進行白細胞分類計數(shù)和有核紅細胞計數(shù)分析，并和細胞染色人工計數(shù)分析進行比較。

1.3.2 同儀器分析的血樣品制備成血細胞涂片，然后瑞氏-姬姆薩染液染色，本科室經(jīng)驗豐富的分析人員對染色涂片計數(shù)分析，并和儀器分析結(jié)果進行比較。

1.3.3 儀器參數(shù)精密度、重復(fù)性 取1份抗凝后的血液標本，儀器白細胞分類計數(shù)重復(fù)測定20次，求出平均值和變異系數(shù)。

1.3.4 儀器分析和細胞涂片染色分析相關(guān)性 隨機取總標本中30份血液標本，儀器分析連續(xù)兩次，取其均值，與此同時，血液涂片染色，由有經(jīng)驗的工作人員油鏡分類分析，分析儀器分析和人工分析的相關(guān)性。

1.4 觀察指標 (1)儀器分析重復(fù)性進行分析，取一正常血液標本，重復(fù)測定20次，測定儀器的精密度；(2)取總標本中30份血液標本，同時進行儀器分析和細胞染色人工分析，比較兩種分析的相關(guān)性；(3)所有血液標本儀器分析和細胞染色人工分析陽性和陰性結(jié)果進行統(tǒng)計，計算陽性標本檢出靈敏度、陽性和陰性預(yù)測值、報警提示的特異性。

1.5 統(tǒng)計學處理 采用統(tǒng)計學軟件SPSS 17.0進行統(tǒng)計學分析,關(guān)聯(lián)性的檢驗采用直線相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。對可靠性的界限進行界定，例如變異系數(shù)進行界定。

2 結(jié) 果

2.1 儀器參數(shù)精密度、重復(fù)性 見表1。結(jié)果顯示各類白細胞分類計數(shù)重復(fù)性良好，變異系數(shù)值低于5%，符合標準要求。取3份有核紅細胞值高、中、低血液標本，儀器有核紅細胞計數(shù)重復(fù)測定20次，求出有核紅細胞絕對值和相對值的平均值和變異系數(shù)，結(jié)果見表1。有核紅細胞高、中值標準變異系數(shù)值低于5%，低值標準低于15%，符合標準要求。

表1 儀器白細胞分類的重復(fù)性

2.2 儀器分析和細胞涂片染色分析相關(guān)性 見表2。結(jié)果顯示各類白細胞儀器分析法和細胞染色分析具有良好的相關(guān)性，特別是在嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞分析方面，對結(jié)果分析的準確性有了較大的提高。儀器有核紅細胞分析和細胞涂片染色分析的相關(guān)性，在有核紅細胞高、中值具有良好的相關(guān)性，在有核紅細胞低值方面相關(guān)性較差，但是對結(jié)果分析和儀器陽性報告無干擾作用。

2.3 不同細胞儀器分析檢測陽性結(jié)果細胞涂片染色檢測 通過表3可以看出白細胞分類分析與有核紅細胞分析分別和細胞涂片染色分析進行比較，白細胞分類分析出報警提示的特異性為97.50%，陽性標本檢出靈敏度為100.00%，陽性和陰性預(yù)測值分別為94.12%、100.00%。有核紅細胞分析出報警提示的特異性為99.19%，陽性標本檢出靈敏度為100.00%，陽性和陰性預(yù)測值分別為94.29%、100.00%。

表2 白細胞分類、有核紅細胞儀器分析和細胞涂片染色分析的相關(guān)性

表3 儀器白細胞分類分析和細胞涂片染色分析

2.4 檢測陽性結(jié)果再分析 對檢測結(jié)果為陽性患者的病因進行診斷和分析，結(jié)果見表4，對于孕周大于10周的孕婦，外周血的血常規(guī)分析中可以發(fā)現(xiàn)幼稚粒細胞和有核紅細胞出現(xiàn)非病理原因的陽性結(jié)果。

表4 陽性結(jié)果原因分布(n)

3 討 論

1987年Coutler公司首次介紹推出了細胞分析的新技術(shù)后，血細胞分析儀器得到了飛速的發(fā)展，儀器生產(chǎn)廠家和型號多樣，其中希森美康細胞分析儀在各級醫(yī)院廣泛使用[5]。XN-1000希森美康細胞分析儀采用熒光流式細胞技術(shù)，結(jié)合不同的試劑可以通過儀器半導(dǎo)體激光光源照射待測樣品，前向散射光來表達待測定細胞的大小體積，側(cè)向散射光可用來判定待測細胞的內(nèi)容物，而側(cè)向熒光則反映核酸的含量，最終以數(shù)據(jù)和散點圖、直方圖等圖像呈現(xiàn)出來，保證了細胞分類的準確性[6]。希森美康細胞分析儀XN系列相比于XE系類，分析方法、通道、試劑有所調(diào)整，靜脈血有核紅細胞可以采用儀器直接計數(shù)，在白細胞測定時可以加以扣除，降低了白細胞數(shù)值異常升高而造成假陽性結(jié)果的概率[3]。有核紅細胞的計數(shù)同時進行白細胞計數(shù)無需調(diào)整通道和模式,臨床分析中，細胞分析儀在臨床血液檢測中的經(jīng)驗，儀器報警顯示某類細胞數(shù)目呈現(xiàn)陽性結(jié)果后，進行細胞染色涂片顯微再分析結(jié)果顯示其中有一部分為假陽性，儀器分析雖然提高了檢測效率，降低了人工分析的難度，但是儀器提示結(jié)果的準確性也是有待進一步的提高[7-10]。

本次研究為了證實XN-1000希森美康細胞分析儀在有核紅細胞的計數(shù)和白細胞計數(shù)分析中，儀器重復(fù)性良好，兩種細胞分析方法重復(fù)性符合標準要求。各類白細胞儀器分析法和細胞染色人工分析具有良好的相關(guān)性，特別是在嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞分析方面對結(jié)果分析的準確性有了較大的提高,同時在有核紅細胞高、中值具有良好的相關(guān)性，而在有核紅細胞低值方面相關(guān)性較差。有核紅細胞分析出報警提示的特異性為99.19%，陽性標本檢出靈敏度為100.00%，陽性和陰性預(yù)測值分別為94.29%、100.00%。白細胞分類分析出報警提示的特異性為97.50%，陽性標本檢出靈敏度為100.00%，陽性和陰性預(yù)測值分別為94.12%、100.00%。對檢測結(jié)果為陽性的患者的病因進行診斷和分析后發(fā)現(xiàn)有核紅細胞非病理性陽性結(jié)果出現(xiàn)，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因有多種可能，首先正常孕婦的胎盤建立的屏障可以允許一部分細胞通過，胎兒血液可能進入母體的血液循環(huán)，導(dǎo)致部分有核紅細胞檢測呈現(xiàn)陽性；其次孕婦懷孕期間機體處于一個特殊的應(yīng)急狀態(tài)，同時造血功能比較活躍導(dǎo)致血液中幼稚粒細胞或者有核紅細胞檢測呈現(xiàn)陽性；外周血涂片染色與XN-1000提示相符率占90%以上，同時幼稚粒細胞非病理原因?qū)е玛栃越Y(jié)果比例也非常高，孕期中出現(xiàn)這種情況的原因一方面可能是由于妊娠導(dǎo)致造血功能的應(yīng)激反應(yīng),從而導(dǎo)致幼稚粒細胞數(shù)目增加。另外妊娠期間是胎兒的生長期，母體的骨髓造血效率提高，進入循環(huán)系統(tǒng)的幼稚粒細胞數(shù)目增加從而導(dǎo)致陽性結(jié)果。

研究結(jié)果提示，大量血液標本分析可以先用儀器分析篩除陰性標本，可以減少人工篩選時間和精力的投入，陽性標本則需要重新進行人工涂片分析，而對于孕婦的血常規(guī)檢測，特別是白細胞分類計數(shù)和有核紅細胞計數(shù)分析，陽性結(jié)果需要格外注意，因為孕婦特殊的機體狀態(tài)，陽性結(jié)果即便經(jīng)過儀器和人工分析，也有可能是由于非病理原因?qū)е?，因此陽性結(jié)果的準確性分析對疾病的診斷和預(yù)防具有重要的意義。

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Correlation between analysis prompts in XN-1000 Sysmex hematology analyzer and blood cell smear staining analysis for peripheral venous blood in pregnant women

FUYuan-bi

(DepartmentofClinicalLaboratory,ChongqingMunicipalFifthPeople′sHospital,Chongqing,400062,China)

Objective To investigate the correlation between the analysis prompts of white blood cells(WBC) count and nucleated red blood cells(NRBC) count by the XN-1000 Sysmex hematology analyzer and the related blood cell smear staining artificial analysis for peripheral venous blood in pregnant women.Methods 280 specimens of periphery venous blood from pregnant women in our hospital were collected and simultaneously detected the WBC count and NRBC count by using the XN-1000 Sysmex hematology analyzer and the blood cell smear staining analysis.Then the detection results were compared between the two kinds of detection method.Results The instrumental analysis had good reproducibility.The higher correlation existed between the instrumental analysis and blood cell staining artificial analysis.The specificity of alarm suggesting analysis results and the positive results of the cell staining artificial analysis was greater than 95%,the sensitivity was 100%,the positive prediction value was greater than 90% and the negative prediction value was 100.00%.Conclusion The analysis alarm prompts of the XN-1000 Sysmex hematology analyzer can effectively screen the positive samples,at the same time the positive samples need to conduct the cell staining artificial analysis for avoiding the false positive results.

XN-1000 Sysmex hematology analyzer; cell counting; NRBC； WBC； microscopic examination

傅遠碧，女，中級職稱，大專，主要從事血液、體液、細胞學的研究工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.01.026

A

1672-9455(2015)01-0068-03

2014-04-18

2014-08-28)