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    馬脾鐵蛋白的應(yīng)用研究

    2015-03-12 16:40:07權(quán)靜管增東
    科技資訊 2015年24期
    關(guān)鍵詞:疾病診斷

    權(quán)靜 管增東

    摘 要:鐵蛋白廣泛存在于生物體內(nèi),哺乳動(dòng)物鐵蛋白在脾臟中含量較高,其中馬脾臟中鐵蛋白的含量最高。馬脾鐵蛋白在免疫顯微分析、疾病診斷等方面均有重要的作用。鐵雖是組成生物體的微量元素,但卻是機(jī)體進(jìn)行氧化還原反應(yīng)的重要元素,鐵元素參與多種生化反應(yīng),是生物體必須的化學(xué)元素之一,具有特殊的化學(xué)及生物學(xué)性質(zhì)。人體血液中的血紅蛋白就是鐵的配合物,具有固定氧和輸送氧的功能。

    關(guān)鍵詞:馬脾鐵蛋白 免疫顯微分析 疾病診斷

    中圖分類號(hào):TQ917 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1672-3791(2015)08(c)-0214-02

    1937年Laufberge首先從馬的脾臟中分離出馬脾鐵蛋白,研究表明,鐵蛋白是由蛋白殼包裹一個(gè)由水合氧化鐵構(gòu)成的鐵核形成的特殊的結(jié)構(gòu)。鐵蛋白的蛋白殼由若干亞基組成,亞基間留有孔隙作為通道。

    1 馬脾鐵蛋白的結(jié)構(gòu)及特征

    (1)馬脾鐵蛋白的蛋白結(jié)構(gòu)特征。馬脾鐵蛋白的蛋白殼空腔是由24個(gè)亞基構(gòu)成的,亞基間位置和取向是有序的,并具有高對(duì)稱性特點(diǎn)。馬脾鐵蛋白的蛋白殼空穴直徑約7.8 nm,厚度約2.5 nm。鐵蛋白中的亞基兩兩成對(duì),每對(duì)相互平行,尾首相對(duì),構(gòu)成菱形十二面體,結(jié)構(gòu)中有6個(gè)四重軸和8個(gè)三重軸,形成14條通道,其中6個(gè)四重軸通道是疏水性的,另外8條三重軸通道呈親水性。兩種通道的功能不同,非極性4重軸通道允許水及中性小分子通過,而阻止帶電荷物質(zhì)進(jìn)入,3重軸通道可能是適于金屬離子通過的。

    (2)馬脾鐵蛋白亞基結(jié)構(gòu)特征。鐵蛋白具有H和L兩種不同類型的亞基。酸性的H亞基分子量約為2.1×104 D,堿性的L亞基分子量約1.9×104 D。H亞基和L亞基結(jié)構(gòu)有差別,電荷分布也不同。不同結(jié)構(gòu)的鐵蛋白中由于H亞基和L亞基的比例不同,由亞基聚合形成純聚合體或雜合體中各種鐵蛋白圖譜也不盡相同。馬脾鐵蛋白的H/L=1/9。

    (3)馬脾鐵蛋白的理化性質(zhì)。鐵蛋白中的鐵核相對(duì)穩(wěn)定性,因?yàn)榘F核的蛋白殼具有穩(wěn)定鐵核的作用,80 ℃高溫或10 mol/L脲室溫下放置,都不能使之變性。鐵蛋白的穩(wěn)定性與其結(jié)構(gòu)中的氫鍵、鹽橋和疏水作用力有關(guān)。其中,氫鍵對(duì)穩(wěn)定鐵蛋白結(jié)構(gòu)的作用最大,其次是疏水作用力,鹽橋的作用最小。由于蛋白質(zhì)分子中帶電荷基團(tuán)少,能接近的更少,故鹽橋作用對(duì)穩(wěn)定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的作用有限。疏水作用力能夠使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變得更緊密,也是穩(wěn)定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的重要作用力。但是有機(jī)溶劑能夠破壞疏水作用力卻不能使鐵蛋白變性,由此可見,疏水作用力并不是穩(wěn)定鐵蛋白結(jié)構(gòu)的主要因素[5]。

    2 馬脾鐵蛋白的功能與用途

    2.1 馬脾鐵蛋白的生理功能

    鐵蛋白能夠?qū)⒋罅繜o毒且能被生物體利用的可溶性鐵轉(zhuǎn)化為固態(tài)化鐵貯藏于組織內(nèi),是生物體主要的鐵貯藏單元。鐵蛋白在調(diào)節(jié)機(jī)內(nèi)鐵代謝方面具有重要的作用,可保持機(jī)體內(nèi)鐵的平衡。當(dāng)機(jī)體缺鐵時(shí),鐵蛋白可將體內(nèi)貯藏的固態(tài)鐵通過還原釋放機(jī)制轉(zhuǎn)化為機(jī)體可利用的可溶性鐵,當(dāng)生物體鐵含量過高時(shí)會(huì)發(fā)生鐵中毒現(xiàn)象,鐵蛋白可將生物體內(nèi)過量的可溶性鐵轉(zhuǎn)化為固態(tài)的鐵儲(chǔ)存到蛋白質(zhì)空腔內(nèi),從而降低機(jī)體內(nèi)可溶性鐵的含量,保持機(jī)體內(nèi)鐵的平衡。鐵蛋白能通過胞飲作用進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)部,可以最大限度的攝取鐵,所以對(duì)鐵缺乏的防治非常重要,鐵蛋白作為補(bǔ)鐵制劑具有良好的應(yīng)用前景。故而鐵蛋白在生物體內(nèi)調(diào)節(jié)鐵平衡主要從兩方面著手,一方面可作為鐵元素補(bǔ)充劑;另一方面還可以作為鐵元素中毒的解毒劑。

    2.2 馬脾鐵蛋白在醫(yī)藥新材料中的應(yīng)用

    鐵蛋白的蛋白殼空腔不僅能夠包裹鐵核,還能夠裝載特定的物質(zhì),有人將馬脾鐵蛋白中的鐵核通過特殊的還原釋放機(jī)制從蛋白質(zhì)空腔中釋放到外界環(huán)境中,最后可以得到一個(gè)仍具有活性的蛋白殼空腔,然后設(shè)法將其他的物質(zhì)裝載到蛋白質(zhì)空腔內(nèi),可應(yīng)用于醫(yī)療診斷領(lǐng)域。目前已有人將一些金屬核如FeS核、CdS核、Mn30核、Fe304磁性鐵核及放射性材料的鈾核等,成功地組裝到鐵蛋白蛋白殼的空腔內(nèi),這些組裝后的鐵蛋白可應(yīng)用于臨床診斷。實(shí)驗(yàn)證明鐵蛋白空腔不僅可以儲(chǔ)存鐵和其它重金屬離子,還可以貯存鈣、鋅、維生素等對(duì)人體有利的營養(yǎng)物質(zhì)和一些有機(jī)小分子物質(zhì)。故完全有可能將鐵蛋白進(jìn)行改造,將它作為合成生物來源的納米新材料。如果在鐵蛋白空腔內(nèi)裝載藥物,并使其外蛋白殼與生物素或特定的抗體相結(jié)合,可以實(shí)現(xiàn)藥物的靶向給藥,其應(yīng)用前景良好,鐵蛋白靶向藥物還可以避免產(chǎn)生免疫反應(yīng)的問題,這對(duì)人類的健康將產(chǎn)生巨大的積極影響。

    2.3 馬脾鐵蛋白在免疫電子顯微鏡分析技術(shù)中的應(yīng)用

    鐵蛋白免疫電子顯微鏡分析技術(shù)在檢測(cè)抗原位置中應(yīng)用廣泛,鐵蛋白的核心是高電子密度氫氧化鐵膠態(tài)分子團(tuán),在電子顯微鏡下,鐵很容易和其他粒子區(qū)別,顯像清晰。故可用交聯(lián)劑使鐵蛋白與抗體共價(jià)結(jié)合,再進(jìn)行免疫反應(yīng),與抗原結(jié)合,找出抗原的位置。首先是用鐵蛋白標(biāo)記抗體,再以鐵蛋白抗體與待測(cè)抗原作用,通過電子顯微鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原。鐵蛋白免疫電子顯微鏡檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)是鐵標(biāo)記物呈顆粒狀,分辨率高,易于觀察;缺點(diǎn)是鐵的分子量太大,難以透過細(xì)胞膜和組織,只適用于細(xì)胞表面抗原定位。鐵蛋白電鏡檢測(cè)操作時(shí)先將同鐵蛋白結(jié)合的抗體作用于已固定的細(xì)胞后,制成超薄切片,再用電子顯微鏡觀察,而且鐵染色標(biāo)本只適合電子顯微鏡檢測(cè),不能用普通光學(xué)顯微鏡觀察,這也限制了鐵蛋白免疫電鏡檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用。

    2.4 馬脾鐵蛋白在疾病診斷中的應(yīng)用

    鐵蛋白分為血清鐵蛋白和組織鐵蛋白兩大類,人體內(nèi)長期儲(chǔ)存鐵元素的組織是組織鐵蛋白。組織鐵蛋白廣泛存在于哺乳動(dòng)物的肝脾和骨髓中,其中脾臟中的組織鐵蛋白可占其干重的20%左右,主要起著保護(hù)細(xì)胞免受鐵誘導(dǎo)傷害的作用,人體出現(xiàn)疾病時(shí)鐵蛋白功能會(huì)改變,機(jī)體內(nèi)鐵元素的含量會(huì)發(fā)生變化,可以通過檢測(cè)機(jī)體內(nèi)鐵蛋白的含量進(jìn)行疾病診斷。血清鐵蛋是由部分糖基化的L亞基組成,其功能與組織鐵蛋白不同,雖然其生理功能尚未完全清楚,但是它的濃度與組織鐵蛋白濃度相關(guān)聯(lián),故可以通過檢測(cè)血清鐵蛋白的含量診斷各種疾病的形成和發(fā)展。

    (1)馬脾鐵蛋白在血液檢查中的應(yīng)用。血液檢查是臨床上疾病診斷的重要手段,血液中的各項(xiàng)指標(biāo)與疾病有一定的相關(guān)性,隨著對(duì)鐵蛋白研究的深入,血液中的鐵蛋白檢測(cè)作為一些疾病診斷的指標(biāo)越來越受到重視。過多輸血、營養(yǎng)不良、炎癥、肝臟病變等均會(huì)造成血液中鐵蛋白升高,這可能是由于鐵蛋白來源增加或清除障礙造成的。惡性腫瘤如肝癌、肺癌、胰癌、白血病等由于癌細(xì)胞合成的鐵蛋白增加,也會(huì)使血清鐵蛋白含量升高,故血清中鐵蛋白的檢測(cè)可作為惡性腫瘤的早期檢測(cè)方法,對(duì)于惡性腫瘤的早期診斷具有重要的意義。缺鐵性貧血、營養(yǎng)性貧血、失血、長期腹瀉等會(huì)造成鐵蛋白降低,常見于鐵吸收障礙、感染、肝硬化等疾病,血液中鐵蛋白的含量降低預(yù)示著可能有此類疾病。血液中鐵蛋白的檢測(cè)作為臨床診斷的常規(guī)方法將在疾病早期診斷方面具有廣闊的發(fā)展前景。

    (2)馬脾鐵蛋白在核磁共振檢查中的應(yīng)用。磁共振成像技術(shù)是目前臨床診斷中首選的、無創(chuàng)傷性的檢測(cè)手段,在惡性腫瘤、腦神經(jīng)退化性疾病檢測(cè)中應(yīng)用廣泛。近年研究發(fā)現(xiàn)鐵蛋白與多種神經(jīng)退化性疾病和癌癥相關(guān),阿爾茨海默癥、帕金森癥、亨廷頓癥等病人的腦組織中都曾發(fā)現(xiàn)有固態(tài)化鐵異常沉淀,這些異常的鐵主要是亞鐵磁性礦物沉淀,而這些異常的鐵沉淀有可能主要是來自功能異常的鐵蛋白。研究發(fā)現(xiàn)多種腫瘤細(xì)胞中的鐵蛋白表達(dá)也出現(xiàn)異常,故可以將鐵蛋白作為神經(jīng)母細(xì)胞瘤和其他癌癥的標(biāo)志物和免疫治療的目標(biāo),用核磁共振定量地檢測(cè)組織內(nèi)鐵的含量以及病變組織損傷程度該方法在腦神經(jīng)退化性疾病和腫瘤的檢測(cè)中應(yīng)用前景良好。

    3 結(jié)語

    隨著鐵蛋白與疾病相互關(guān)系的不斷研究, 越來越多的研究顯示鐵蛋白水平異常與許多疾病相關(guān), 說明鐵蛋白將可以作為這些疾病診斷和治療的輔助手段。由鐵蛋白構(gòu)建納米材料, 在生物醫(yī)藥方面也將有著廣泛的應(yīng)用價(jià)值。馬脾中鐵蛋白的含量最高,故其在疾病診斷等方面的應(yīng)用更為廣泛。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 陳靜,趙永亮,王丹.鐵蛋白研究現(xiàn)狀[J].河南師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2010,38(1):152-155.

    [2] 林志超.四種胰臟鐵蛋白的理化特性[D].廈門大學(xué),2008.

    [3] 王群力, 孔波, 黃河清.鐵蛋白納米蛋白殼結(jié)構(gòu)與功能研究新進(jìn)展[J].化學(xué)進(jìn)展,2004,16(4):516-519.

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