牛原奶體細(xì)胞數(shù)的檢測(cè)及應(yīng)用研究

倪興軍，薛仰全

（甘肅酒泉職業(yè)技術(shù)學(xué)院，甘肅 酒泉735000）

白細(xì)胞和乳腺脫落的上皮組織（體細(xì)胞）在乳房內(nèi)隨乳汁排出，當(dāng)乳房（乳腺）受到外來影響，主要是有害細(xì)菌侵入乳房內(nèi)，就會(huì)產(chǎn)生白細(xì)胞對(duì)抗有害菌，保護(hù)乳腺的健康，所以體細(xì)胞數(shù)可直接反映乳腺的健康狀況。牛乳含體細(xì)胞數(shù)在20萬個(gè)∕mL 以內(nèi)，表明乳腺健康；如果體細(xì)胞數(shù)大于20 萬個(gè)∕mL，則乳腺已被感染，而且體細(xì)胞數(shù)數(shù)值越高，乳腺受感染程度越嚴(yán)重。利用原奶體細(xì)胞數(shù)可預(yù)測(cè)牛群隱性乳房炎的發(fā)生趨勢(shì)和產(chǎn)奶損失。

1 材料與方法

1.1 樣品的采集

擠奶結(jié)束后，奶液經(jīng)過冷處理被收集在總奶缸中。取樣時(shí)抽樣進(jìn)行檢測(cè)，在奶罐內(nèi)攪拌均勻后隨機(jī)抽取200mL奶樣于干凈采樣瓶中送至化驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)。

1.2 儀器設(shè)備

牛奶體細(xì)胞電子檢測(cè)儀、牛博士牛奶體細(xì)胞檢測(cè)試紙、歸零試紙、激活劑、200μL 移液微量移液器、溫度計(jì)、收集牛奶的容器試管、恒溫水浴鍋。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 體細(xì)胞數(shù)的檢測(cè) 將奶樣收集到清潔的試管中，將奶樣溫水浴加熱到32～38℃之間檢測(cè)。吸樣前將試管內(nèi)的奶樣搖勻，用原裝滴管在測(cè)試試紙小孔內(nèi)垂直加入一滴奶樣，或者用移液器加入40 μL奶樣，等待奶樣被充分吸入小孔。滴加奶樣后兩分鐘內(nèi)，在小孔內(nèi)垂直滴入3滴激活劑。45min后，打開電子檢測(cè)儀測(cè)定準(zhǔn)確數(shù)值。開啟檢測(cè)儀并歸零后，試紙點(diǎn)樣孔朝下，朝前插入儀器，顯示讀數(shù)，即可獲得準(zhǔn)確的體細(xì)胞數(shù)量。

1.3.2 電子檢測(cè)儀的使用方法 按左側(cè)藍(lán)色開關(guān)鍵開機(jī)，待屏幕顯示“543”，取一張清潔的歸零試紙，白色小孔部位朝下插入試紙插口。屏幕顯示試紙條和水滴符號(hào)后，抽出歸零試紙，待水滴符號(hào)消失，即可插入檢測(cè)。多個(gè)奶樣檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)儀不需要?dú)w零，直接檢測(cè)即可。結(jié)果以“x.xx”格式顯示，乘以100萬得到體細(xì)胞數(shù)為萬個(gè)／mL。

2 結(jié)果與分析

通過連續(xù)檢測(cè)某牧場(chǎng)2000頭奶牛10月份奶缸體細(xì)胞數(shù)，并與臨床表現(xiàn)健康的泌乳牛產(chǎn)量對(duì)照，來研究奶牛體細(xì)胞數(shù)與產(chǎn)奶量的關(guān)系。

表1 某牧場(chǎng)10月份體細(xì)胞數(shù)與產(chǎn)奶量統(tǒng)計(jì)表

3 分析與討論

3.1 奶缸體細(xì)胞數(shù)與泌乳牛單產(chǎn)關(guān)系

根據(jù)牧場(chǎng)10月份體細(xì)胞與產(chǎn)奶量統(tǒng)計(jì)表，畫出日奶缸體細(xì)胞數(shù)與泌乳牛單產(chǎn)變化趨勢(shì)圖如圖1。

圖1 體細(xì)胞數(shù)與泌乳量對(duì)照?qǐng)D

從上圖看出，奶缸體細(xì)胞數(shù)每天都會(huì)在一定范圍內(nèi)波動(dòng)，這也反映了整個(gè)牛群正常的生理變化。從總體趨勢(shì)看，泌乳牛單產(chǎn)升高，體細(xì)胞數(shù)降低。說明了牛奶體細(xì)胞與奶牛產(chǎn)量呈負(fù)相關(guān)。

3.2 原奶分級(jí)使用

表3 奶品質(zhì)與體細(xì)胞數(shù)列對(duì)應(yīng)表

3.3 奶中體細(xì)胞數(shù)升高的因素

引起牛奶中體細(xì)胞數(shù)升高的原因是奶牛泌乳系統(tǒng)受致病菌侵襲而使乳腺感染，通過機(jī)體免疫機(jī)制，承擔(dān)排除感染和修復(fù)受破壞組織任務(wù)的白細(xì)胞大量聚集并進(jìn)入乳汁。

3.3.1 乳房炎 據(jù)統(tǒng)計(jì)，95%的奶牛乳房炎都是由金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、大腸埃西氏桿菌等引起的。傳染性致病菌比環(huán)境性致病菌更易引起隱性感染，因此更容易使體細(xì)胞數(shù)增加。由環(huán)境性致病菌引起的感染容易被清除，體細(xì)胞數(shù)通常只在乳房炎期間升高，且升高幅度不高。

3.3.2 奶牛的年齡、泌乳期 總體上講，體細(xì)胞數(shù)隨著奶牛年齡增大而呈上升趨勢(shì)；在同一泌乳期，泌乳末期體細(xì)胞數(shù)增加。經(jīng)產(chǎn)牛乳中體細(xì)胞數(shù)比初產(chǎn)牛的多，老齡牛體細(xì)胞數(shù)有增加趨勢(shì)，隨著胎次的增加，泌乳期體細(xì)胞平均數(shù)也增加。原因可能是由于多次泌乳，奶牛被金黃色葡萄球菌感染所致的慢性乳房炎的概率增加；乳頭管可能損傷，細(xì)菌更容易進(jìn)入乳腺；老齡牛的免疫能力降低，導(dǎo)致清除細(xì)菌的能力下降等。

3.3.3 環(huán)境、管理、擠奶程序等因素 如溫暖潮濕的夏季，隨著病原體的增多，體細(xì)胞數(shù)也相應(yīng)增加。奶牛的活動(dòng)場(chǎng)地衛(wèi)生狀況得不到保障，奶牛乳頭沾上糞便、泥土等因素會(huì)誘發(fā)乳腺炎，進(jìn)而導(dǎo)致體細(xì)胞數(shù)上升。另外，飼養(yǎng)管理中出現(xiàn)的飼料調(diào)整、檢疫、錯(cuò)誤的擠奶方式等因素都會(huì)引起牛奶中體細(xì)胞數(shù)升高。

3.4 調(diào)低體細(xì)胞數(shù)的措施

3.4.1加強(qiáng)管理 定期進(jìn)行環(huán)境消毒，及時(shí)清除糞便、污水，保持牛舍、牛床和運(yùn)動(dòng)場(chǎng)干凈衛(wèi)生，牛床應(yīng)鋪有清潔干燥的墊料，運(yùn)動(dòng)場(chǎng)地應(yīng)盡量避免潮濕。尤其要做好圍產(chǎn)期的管理和衛(wèi)生工作，減少新生牛乳房炎的發(fā)生。

3.4.2 規(guī)范擠奶 定期更換擠奶橡膠內(nèi)套，以免將奶杯上的細(xì)菌帶入乳頭管內(nèi)，使乳房發(fā)生炎癥。擠奶前保證藥浴時(shí)間，每頭牛確保藥浴在5秒鐘以上。嚴(yán)格執(zhí)行擠奶程序：擠奶前準(zhǔn)備→擠奶前檢查→擠奶棄頭三把奶→藥浴→擦干→套杯→擠奶過程→脫杯→脫杯后藥浴→奶杯消毒。脫杯后藥浴要在脫杯后立即進(jìn)行，藥浴后用一次性紙巾擦干乳頭，注意經(jīng)常更換消毒液，以免細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性而影響消毒效果。

3.4.3 科學(xué)配制日糧 合理的日糧結(jié)構(gòu)，可以為奶牛提供全面營養(yǎng)，保證奶牛產(chǎn)奶量。如體內(nèi)缺硒、鋅、VA、VC、VE 會(huì)增加臨床乳房炎的發(fā)病率。確保飼料新鮮、多汁，無霉變，可以防止乳房炎發(fā)生，提高機(jī)體抵抗力。定時(shí)清槽，保持飼槽清潔和飼料新鮮，以防殘余飼料腐敗造成污染，同時(shí)根據(jù)剩料情況調(diào)整飼喂量和配方。牛乳中體細(xì)胞數(shù)及臨床乳房炎的發(fā)生率均與其VE的攝入量及血漿硒濃度呈負(fù)相關(guān)，適量的抗氧化微量養(yǎng)分可增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體細(xì)胞殺傷金黃色葡萄球菌的大腸桿菌的能力，增強(qiáng)抵抗力。

3.4.4 定期監(jiān)測(cè) 每日對(duì)奶缸及群體體細(xì)胞數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，確定牛群中隱性乳房炎牛，發(fā)現(xiàn)后及時(shí)進(jìn)行治療，建議患病牛與健康牛分開飼養(yǎng)。對(duì)那些長期呈陽性、乳汁表現(xiàn)異常、產(chǎn)奶量低、反復(fù)發(fā)作、長時(shí)間醫(yī)治無效的病牛，要堅(jiān)決淘汰，以免從乳中不斷排出病原微生物，成為感染源。對(duì)于患隱性乳房炎的奶牛，建議體細(xì)胞數(shù)大于75 萬個(gè)／mL 時(shí)就進(jìn)行的治療，最好是將體細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果結(jié)合奶牛泌乳階段、感染數(shù)量及種類進(jìn)行。對(duì)新調(diào)入的奶牛，要隔離觀察，確定為無任何疾病的才能合群。防止因自身壓迫導(dǎo)致乳房炎，外出放牧應(yīng)帶乳罩，防止刺傷乳房，控制奶牛相互頂架，杜絕各種致病因素。

隨著奶牛業(yè)的迅速發(fā)展和人民生活水平的不斷提高，對(duì)牛奶品質(zhì)的要求也越來越高。牛奶中體細(xì)胞數(shù)的高低已成為乳品加工廠和牧場(chǎng)評(píng)定牛奶質(zhì)量的重要指標(biāo)。因此控制牛奶中體細(xì)胞數(shù)的含量，提高乳產(chǎn)量及乳品質(zhì)是奶業(yè)發(fā)展的趨勢(shì)。

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