血漿內(nèi)皮素、一氧化氮與視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞的關(guān)系

程金濤等

[摘要] 目的 探討血清內(nèi)皮素（ET）、一氧化氮（NO）在視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞（CRVO）發(fā)病中的作用。 方法 采用放免分析法檢測30例CRVO患者和30例健康人及28例無并發(fā)癥的高血壓患者血清ET-1、NO濃度，由專人測定并進行統(tǒng)計學分析。 結(jié)果 CRVO組血清中ET-1的濃度與正常對照組和高血壓對照組相比明顯增高（P<0.01），缺血組與非缺血組比較ET-1濃度顯著增高（F值=4.029，P<0.01）；CRVO組血清中NO濃度與正常對照組和高血壓對照組相比明顯降低，缺血組與非缺血組比較NO濃度顯著降低（F值=5.012，P<0.01）。 結(jié)論 CRVO患者血清中存在ET濃度的增高和NO濃度的降低，ET和NO參與了CRVO的發(fā)病過程，兩者在CRVO的發(fā)生與發(fā)展過程中起重要作用。ET和NO可能反映CRVO患者視網(wǎng)膜缺血的程度。

[關(guān)鍵詞] 內(nèi)皮素；一氧化氮；視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞

[中圖分類號] R774.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2015）04-0058-03

[Abstract] Objective To clarify the possible involvement of endothelin-1 （ET-1） and nitric oxide（NO） in the pathogenesis of central retinal vein occlusion （CRVO）. Methods ET-1 and NO plasma concentrations were determined by radio immunoassays in a double blind fashion in a group of 30 patients selected with CRVO， in 30 healthy cases and in 28 patients with uncomplicated essential hypertension in the same age range， the data were analyzed statisticly. Results The concentration of ET-1 plasma levels of CRVO patients increased significantly compared with both normal subjects and hypertensive patients（P<0.01）. The higher concentration of circulating ET-1 were found in patients with CRVO of the ischaemic type（F=4.029， P<0.01）. The NO plasma levels of CRVO patients decreased significantly compared with both normal subjects and hypertensive patients. The lower concentration of circulating NO were found in patients with CRVO of the ischaemic type （F=5.012，P<0.01）. Conclusion These findings raise the possibility that the increase of circulating ET-1 levels and the decrease of circulating NO levels in patients with CRVO， ET and NO may be markers of the occlusive event， there by suggesting that ET-1 and NO homeostasis may be relevant to CRVO pathogenesis and retinal ischaemic manifestations.

[Key words] Endothelin-1； Nitric oxide； Central retinal vein occlusion

內(nèi)皮素（endothelin，ET）是血管內(nèi)皮細胞分泌的縮血管肽，一氧化氮（nitric oxide，NO）也是來自于內(nèi)皮細胞的舒血管因子，ET與NO在視網(wǎng)膜自動血管調(diào)節(jié)系統(tǒng)中起關(guān)鍵作用，維持視網(wǎng)膜血流的穩(wěn)定 [1，2]。視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞（central retinal vein occlusion，CRVO）是眼科常見的可致盲視網(wǎng)膜血管性疾患，血管硬化、內(nèi)皮損傷及血流動力學的改變在該病發(fā)病過程中起重要作用[3-5]。ET與NO在心血管疾病方面的研究曾被報道[10]，但是它們在視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞發(fā)病機制中起到何種作用，目前尚不明確，為探討ET、NO與CRVO的關(guān)系，我們選取2012年6月～2013年6月間30例CRVO患者，測定血清中ET及NO濃度，探討CRVO病變程度與ET、NO的關(guān)系。

1資料與方法

1.1臨床資料

選擇2012年6月～2013年6月在我院眼科門診就診的CRVO患者共30例，根據(jù)視力、眼底及眼底熒光造影結(jié)果分為缺血組與非缺血組，缺血組14例，男8例，女6例；年齡（53±7.9）歲，合并高血壓者9例占64.29%；非缺血組16例，男10例，女6例；年齡（52.2±8.1）歲，合并高血壓者12例占75.00%。正常對照組30例，男21例，女9例，年齡（49.2±9.3）歲，來自于我院體檢中心健康查體者，無眼部異常，無高血壓、糖尿病及其他系統(tǒng)疾病。高血壓對照組來自于我院內(nèi)科門診確診的原發(fā)性高血壓患者28例，無高血壓并發(fā)癥，男19例，女9例，年齡（51.3±11.2）歲。

1.2方法

清晨空腹肘靜脈取血5 mL，留取標本，置于含10%依地酸二鈉30 μl和抑肽酶40 μl的試管內(nèi)混勻，于2 h內(nèi)離心分離血清，放置-20℃低溫保存。ET-1與NO測定：采用放免分析技術(shù)測定，試劑盒由中國原子能科學研究院提供，批內(nèi)變異<10%。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS for windows 13.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析處理，計量資料近似正態(tài)分布，以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間分析采用單因素方差分析及兩兩比較用Dunnet t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 CRVO組與對照組血清ET-1、NO濃度比較

從表1可以看出CRVO組血清中ET-1濃度與正常對照組、高血壓對照組比較明顯增高（單因素方差分析F值=4.693，P<0.01），有高度統(tǒng)計學意義。CRVO組血清中NO的濃度與正常對照組和高血壓對照組比較明顯降低（F值=4.352，P<0.01），有高度統(tǒng)計學意義。

CRVO組與正常對照組、高血壓對照組間ET-1濃度兩兩比較：CRVO組與正常對照組比較有顯著性差異（Dunnet t值=3.22，P<0.01）；CRVO組與高血壓對照組比較亦有顯著性差異（Dunnet t值=2.78，P<0.01）；高血壓對照組與正常對照組比較無顯著性差異（Dunnet t值=0.89，P>0.05）。三組間NO濃度兩兩比較：CRVO組與正常對照組比較有顯著性差異（Dunnet t值=3.58，P<0.01）；CRVO組與高血壓對照組比較亦有顯著性差異（Dunnet t值=3.01，P<0.01）；高血壓對照組與正常對照組比較無顯著性差異（Dunnet t值=1.02，P>0.05）。

2.2 CRVO患者缺血組、非缺血組血清ET-1、NO濃度比較

從表2可以看出缺血組ET-1濃度與非缺血組比較顯著增高（t值=4.029，P<0.01），缺血組NO的濃度與非缺血組比較顯著降低（t值=5.012，P<0.01）。

3 討論

視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞的發(fā)生常為多因素致病，既有血管的異常也有血液成份的改變或血流動力學異常，這些異常造成視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞損傷，從而引起由此分泌的血管活性物質(zhì)大量釋放[3，6，7]。視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞是視網(wǎng)膜血管的半透膜血管屏障，還具有很重要的內(nèi)分泌作用，它可以合成釋放血管活性物質(zhì)，如內(nèi)皮舒張因子（NO、前列腺素等）和內(nèi)皮縮血管因子（ET等），目前認為生理狀態(tài)下NO和ET在視網(wǎng)膜血管的管徑和血流量受體液調(diào)節(jié)系統(tǒng)中起關(guān)鍵作用[8，9]。

內(nèi)皮素有三種同源異構(gòu)體，ET-1是其中收縮血管作用最強的因子[10]，我們選擇它做代表研究內(nèi)皮素在CRVO病變中的作用。NO是一種在細胞間和細胞內(nèi)起神經(jīng)遞質(zhì)作用的內(nèi)源性反應氣體[11]。

我們選取在眼科門診就診的視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞患者作為實驗觀察組，根據(jù)視力、眼底檢查及眼底熒光造影結(jié)果，將觀察組患者進一步分為視網(wǎng)膜缺血組與非缺血組，選取同年齡段的健康查體者與單純性高血壓患者作為對照組，排除高血壓作為一種因素對實驗結(jié)果的影響，檢測ET-1、NO在CRVO患者血清中的變化。三組患者年齡、性別等組成差異均無統(tǒng)計學意義。為保證結(jié)果真實可靠，減少誤差，采集標本混合編號后由專門的化驗室工作人員進行檢驗，保證檢查結(jié)果的可靠性，檢驗結(jié)果使用專用的統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析，檢驗用的試劑盒均由有正規(guī)廠家生產(chǎn)，質(zhì)量可靠。

本次研究表明CRVO組ET-1濃度與正常對照組和高血壓對照組比較，單因素方差分析差異有高度統(tǒng)計學意義（F值=4.693，P<0.01）；三組間兩兩比較用Dunnet t檢驗：CRVO組ET-1濃度明顯高于正常對照組和高血壓對照組，差異有統(tǒng)計學意義；正常對照組和高血壓對照組ET-1濃度無差異，說明在CRVO患者血清內(nèi)皮素顯著升高，而在健康人及無并發(fā)癥的單純高血壓患者體內(nèi)，內(nèi)皮素無明顯升高。CRVO組NO濃度與正常對照組和高血壓對照組比較，單因素方差分析差異有統(tǒng)計學意義（F值=4.352，P<0.01）；三組間兩兩比較用Dunnet t檢驗：CRVO組NO濃度明顯低于正常對照組和高血壓對照組，差異有統(tǒng)計學意義，高血壓對照組與正常對照組NO濃度比較差異無統(tǒng)計學意義，說明視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞的患者血清中ET-1濃度增高和NO濃度降低，單獨的高血壓沒有引起血清中ET-1、NO濃度的改變，可能是早期的血壓增高還沒有引起視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞的損害，血清中的ET-1、NO濃度與健康人無差別。

CRVO兩組間ET-1、NO濃度差異有統(tǒng)計學意義，缺血組的ET-1濃度明顯增高和NO濃度明顯降低，說明視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞造成內(nèi)皮細胞的損傷，內(nèi)皮細胞分泌的ET增加而NO減少，視網(wǎng)膜缺血對兩者影響更大，兩者分泌失衡進一步引起視網(wǎng)膜血管功能紊亂，加重病情，影響預后。

由于條件的限制我們未能從CRVO患者玻璃體和視網(wǎng)膜中檢測到ET-1、NO的濃度改變，本研究檢測到CRVO患者血清中ET-1濃度增高和NO濃度降低，缺血性CRVO患者兩者濃度的改變更明顯，而單純的高血壓患者血清中ET-1、NO的濃度與健康人無差異，說明ET和NO參與了CRVO的發(fā)病過程，兩者在CRVO的發(fā)生與發(fā)展過程中起重要作用。

[參考文獻]

[1] Mohamed TA1，MohamedSel-D. Effect of pan-retinal laser photocoagulation on plasma VEGF，endothelin-1 and nitric oxide in PDR[J]. Int J Ophthalmol，2010，3（1）：19-22.

[2] Ozden S，tatlipinar S，Bicer N et al. Basal serum levels in patients with type 2 diabetes mellitus and different stages of retinopathy[J]. Can J Ophthalmol，2003，38（5）：393-396.

[3] 魏潔，孫時英，牛建軍. 視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞病因的研究進展[J]. 臨床眼科雜志，2010，18（6）：569-572.

[4] Chandrasekaran K，Mehrabian Z，Spinnewyn B，et al. Neuroprotective effects of bilobalide，a component of Ginkgo biloba extract（EGb 761）in global brain ischemia and in excitotoxicity-induced neuronal death[J]. Pharmacopsychiatry，2003，36（1）：S89-94.

[5] Mohamed Q，McIntosh RL，Saw SM，et al. Interventions for central retinal vein occlusion： An evidence-based systematic review[J].Ophthalmology，2007，114（3）：507-519.

[6] Parodi MB1，F(xiàn)riberg TR，Pedio M，et al. Panretinal photocoagulation and photodynamic therapy for anterior segment neovascularization secondary to ischemic central retinal vein occlusion[J]. Ophthalmic Surg Lasers Imaging，2007，38（2）：94-99.

[7] 段毅琴，朱小華，王啟常. 視網(wǎng)膜靜脈阻塞致病機制淺析[J]. 國際眼科雜志，2011，11（8）：1382-1384.

[8] Acuna-Castroviejo D，Escames G，Venegas C，et al. Extrapineal melatonin：Sources，regulation，and potential functions[J]. Cell Mol Life Sci，2014，71（16）：2997-3025.

[9] CioffiGA，VanbuskirkEM. Microvasculature of the anterior optic nerve[J]. Surv Ophthalmol，1994，38：285-295.

[10] 陳甲興，唐寧. 視網(wǎng)膜靜脈阻塞相關(guān)因素的臨床觀察[J].國際眼科雜志，2014，14（2）：354-357.

[11] Stangos AN，Petropoulos IK，Pournaras JA，et al. The vasodilatory effect of juxta-arteriolar microinjection of endothelinA receptor inhibitor in healthy and acute branch retinal vein occlusion minipig retinas[J]. Invest Ophthalmol Vis Sci，2010，51（4）：2185-2190.

（收稿日期：2014-02-19）